Оценка возможности внедрения международного протокола по ведению детей с энтеровирусным везикулярным стоматитом на амбулаторном этапе оказания педиатрической помощи
В статье рассмотрена возможность внедрения международного протокола по ведению детей с энтеровирусным везикулярным стоматитом на амбулаторном этапе оказания педиатрической помощи в России
Введение
Энтеровирусный везикулярный стоматит (ЭВС, синдром «рука-нога-рот») — это антропонозное вирусное инфекционное заболевание, вызываемое энтеровирусами (чаще всего Coxsackievirus A16 и Enterovirus 71), отличительной особенностью которого является появление везикулярной экзантемы на коже ладоней, стоп, периорально, а также на слизистой оболочке полости рта. Данное заболевание имеет широкую распространенность в Японии, Китае, Малайзии, Сингапуре, Республике Корея, Вьетнаме. Например, в 2009 г. в Китае была крупная вспышка ЭВС — 1 155 525 зарегистрированных случаев заболевания, 13 810 тяжелых случаев и 353 летальных исхода [1]. Истинная распространенность заболевания в Российской Федерации не установлена, подъем заболеваемости ЭВС регистрируется в летне-осенний период и часто связан с завозными случаями.
С учетом высокой устойчивости энтеровирусов в окружающей среде, а также возможности длительного вирусоносительства завозные случаи заболевания могут представлять эпидемиологическую угрозу для детских коллективов. А это, в свою очередь, определяет необходимость внедрения четких клинических протоколов по лечению и профилактике неполиоэнтеровирусных инфекций на амбулаторном этапе оказания педиатрической помощи в соответствии с международным консенсусом. На сегодняшний день лечение и профилактика ЭВС во всем мире проводятся согласно «A Guide to Clinical Management and Public Health Response for Hand, Foot and Mouth Disease», изданному ВОЗ в 2011 г. Профилактика энтеровирусной (неполио) инфекции в Российской Федерации регламентируется Санитарными правилами (СП) 3.1.2950-11, утвержденными в 2011 г. и устанавливающими основные требования к комплексу организационных, санитарно-противоэпидемических мероприятий.
Возможность внедрения международного протокола ведения ЭВС
Нами была поставлена задача оценить возможность внедрения международного протокола по ведению детей с ЭВС на амбулаторном этапе оказания педиатрической помощи.Основными методическими материалами для анализа выступили: международный протокол ВОЗ по лечению и профилактике ЭВС у детей, СП 3.1.2950-11, приказ Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 16 апреля 2012 г. № 366н «Об утверждении Порядка оказания педиатрической помощи». Метод исследования — сравнительно-аналитический. Международные рекомендации были апробированы нами на одном клиническом случае в рамках лечения ребенка с ЭВС на амбулаторном этапе.
Группа экспертов ВОЗ указывает, что большинство случаев ЭВС подлежат амбулаторному лечению. Критериями госпитализации по медицинским показаниям можно считать: симптомы вовлечения ЦНС (миоклонические судороги при засыпании/бодрствовании, атаксия, «блуждающие глаза», парезы/параличи, общемозговой синдром, менингеальный синдром), симптомы вовлечения вегетативной нервной системы (тахикардия, артериальная гипертензия, обильное потоотделение), симптомы сердечно-легочной недостаточности (одышка, падение артериального давления, отеки) [1].
Доказанной этиотропной терапии ЭВС (как и других неполиоэнтеровирусных инфекций) не существует. Применение ацикловира и любых других противовирусных препаратов не имеет под собой доказательной базы [1]. На амбулаторном этапе лекарственная терапия ЭВС должна носить симптоматический характер и заключаться в назначении антипиретических препаратов (по показаниям), усиленного питьевого режима, также должна проводиться разъяснительная работа с семьей. Тактические мероприятия по диагностике и лечению ЭВС (по консенсусу ВОЗ) представлены в таблице 1.
Согласно СП 3.1.2950-11, карантин на контактных по неполиовирусной энтеровирусной инфекции накладывается на 10 дней, при наличии признаков поражения ЦНС — на 20 дней. Обязательна изоляция пациента на все время болезни. Рекомендовано проведение текущей и заключительной дезинфекции [2].
Клинический случай
Оценка возможности внедрения международных протоколов проводилась на базе поликлиники № 1 МАУ ДГКБ № 11 г. Екатеринбурга. Протокол был апробирован на одном клиническом случае в июле 2017 г.
Пациент — мальчик, 9 лет. Первичный вызов врача-
педиатра на дом (на 3-й день болезни). Жалобы на момент осмотра: лихорадка до 38° С, боль в горле, слабость, двукратная рвота (в 1-й день заболевания). Из анамнеза заболевания известно, что ребенок заболел 2 дня назад во время его нахождения с семьей на отдыхе (Республика Кипр), заболевание началось с рвоты и подъема температуры тела до 37° С. На 2-й день болезни — лихорадка до 38° С (родители купировали ибупрофеном с положительным эффектом), на утро 3-го дня болезни присоединилась боль в горле. В анамнезе — герпетичес-
был выписан на 10-й день с момента начала заболевания.
По нашему мнению, рекомендации экспертов ВОЗ применимы в условиях амбулаторной поликлинической службы Российской Федерации, не противоречат действующим нормативным документам, просты и понятны в применении, что подтверждается приведенным нами клиническим случаем. Представляется необходимым проведение лекций и семинаров с врачами участковой педиатрической службы по обсуждаемой в данной статье проблеме с целью повышения их профессиональных компетенций и навыков, что, несомненно, приведет к оптимизации лечебно-диагностического процесса в поликлинической педиатрии.
Выводы
Большинство случаев ЭВС подлежат амбулаторному лечению с соблюдением международного консенсуса ВОЗ, а также СП 3.1.2950-11.
Применение ацикловира и любых других противовирусных препаратов при неполиоэнтеровирусных инфекциях не имеет под собой доказательной базы.
Рекомендации экспертов ВОЗ по лечению и профилактике ЭВС могут быть применимы в условиях амбулаторной поликлинической службы Российской Федерации.
С целью повышения лечебно-диагностического процесса и профилактики ЭВС представляется необходимым проведение лекций и семинаров по данной проблеме в рамках курсов повышения квалификации и усовершенствования участковых педиатров.
Везикулярный стоматит: симптомы, диагностика, лечение
Везикулярный стоматит является острым инфекционным заболеванием, которым, зачастую, страдают представители животного мира (преимущественно крупный рогатый скот). Но данное заболевание может поражать и людей. Везикулярный стоматит характерен тем, что на слизистой оболочки рта появляется высыпание: водянистые пузырьки. Иногда недуг может проходить и бессимптомно.
Случаи заражения везикулярным стоматитом чаще всего регистрируется на американском континенте, Азии (Индия, Китай) и немногих странах Европы. Вспышка заболевания в основном приходится на жаркий период года – август, сентябрь.
Симптомы везикулярного стоматита
Напомним, что заболевание везикулярным стоматитом чаще всего диагностируется в летний период времени, когда буйствуют насекомые, а жаркая погода провоцирует появление различных заболеваний. Инкубационный период вируса после попадания его в организм человека составляет 2-6 дней, после чего заражённый начинает ощущать головную боль, боль при движении глаз, общую мышечную слабость, появляется озноб, насморк, повышается температура. Больные также нередко жалуются на увеличение лимфоузлов в шейном отделе. Характерным для данного заболевания является появление на слизистой оболочки рта пузырьков наполненных водой – везикул, вокруг которых образуется красный контур. Эти пузырьки локализируются, в основном, на губах, дёснах, языке и внутренней поверхности щёк. Везикулы носят довольно болезненный характер, поэтому приём пищи при данном заболевании вызывает очень неприятное ощущение.
Энтеровирусный везикулярный стоматит у детей
Заболеванию энтеровирусного везикулярного стоматита подвержены маленькие дети, поэтому среди взрослых данное заболевание практически не встречается. Недуг носит вирусный характер, который может передаваться как воздушно-капельным путём, так и фекально-оральным. Возбудителем же энтеровирусного везикулярного стоматита является Коксаки вирус А-16 из рода Энтеровирусов. Наиболее благоприятной средой обитания вируса отмечается жаркая погода с повышенной влажностью, поэтому именно в летний период дети более всего склонны подхватить эту инфекцию. Необходимо заметить, что данный вид недуга не передаётся через животных, а является именно детским вирусным заболеванием.
Главным симптомом данного вирусного заболевания является появление водянистых пузырьков не только на слизистой оболочки рта, но и на ладонях и ступнях, от чего энтеровирусный везикулярный стоматит прозвали синдромом «рука-нога-рот». Иногда в литературе можно встретить и альтернативное название этого заболевания: энтеровирусный везикулярный стоматит с экзантемой и коксаки вирус. Детки попадают в зону риска этого недуга после перенесения респираторного заболевания, так как иммунная система еще ослаблена, и противостоять в полную силу новому вирусу еще не может. Энтеровирусы достаточно быстро распространяются, так как их переносчиками являются как люди, так и насекомые.
[5], [6], [7], [8], [9], [10], [11]
Симптомы и лечение энтеровирусного везикулярного стоматита
Симптомами заболевания, помимо водянистых пузырьков (везикул), являются повышенная температура, насморк, боль в голе, слабость в теле и боль в мышцах. Активность ребёнка заметно падает, он становиться раздражительным и вялым. Отметим, что везикулы носят достаточно болезненный характер, а их появление провоцирует зуд.
Энтеровирусный везикулярный стоматит лечится достаточно быстро и проходит бесследно, если вовремя обратиться к врачу. В качестве лекарства можно порекомендовать иммуномодулятор «Интерферон», который не только поможет быстро справиться с недугом, но так же станет хорошим профилактическим препаратом для борьбы с детскими вирусными заболеваниями. Лечение энтеровирусного везикулярного стоматита проводиться тем же методом, что и везикулярный стоматит, то есть симптоматическим. Болезнь требуется не запускать, так как есть опасность появления осложнений в виде менингита, острого вялого пареза, энцефалита.
Профилактика энтеровирусного везикулярного стоматита и его осложнений
Профилактикой заболевания же является общее укрепление организма ребёнка, здоровое и полноценное питание. Тщательное мытьё рук так же является хорошей профилактикой энтеровирусного везикулярного стоматита, так как вирус может передаваться и контактным путём. Закаливание организма очень положительно влияет на укрепление иммунной системы. Если же какой-то ребёнок подхватил данный недуг, его необходимо на время изолировать от других деток, так как инфекция очень быстро распространяется.
Профилактикой возникновения осложнений является исключение бесконтрольного употребления антибиотиков, которые лишь снижают защитную реакцию иммунной системы организма. Родители должны внимательно следить за ротовой полостью своего чада, вовремя проводить процедуру полоскания.
Везикулярный стоматит у животных
Везикулярный стоматит по своей природе является, в первую очередь, болезнью копытных животных, которая вызывает повышенную температуру, обильное слюноотделение, сниженный аппетит, а так же образование водянистых пузырей различных размеров – везикул. Сыпь наблюдается в ротовой полости и слизистой оболочки носа, нижней части живота, а так же в межкопытных щелях.
Вирус везикулярного стоматита обычно поражает крупный рогатый скот. Лошади, свиньи, мулы, овцы так же подвержены данному заболеванию, но в меньшей степени. В дикой природе везикулярный стоматит встречается среди диких кабанов, оленей, косуль, енотов. Молодняк от полугода до двух лет более всего восприимчив к заболеванию. Вирус распространяется преимущественно воздушно-капельным путем и через укусы насекомых – переносчиков недуга. Источником вируса служит инфицированное животное, вирус которого может быть распространён через воду, корм, доильные установки. Животное, перенесшее везикулярный стоматит приобретает иммунитет к данному вирусу на 6-12 месяцев.
Симптомы везикулярного стоматита у животных
Везикулярный стоматит вызывает лихорадку у животных, обильное слюноотделение, а так же появление везикул разных размеров. Водянистые пузырьки в основном сосредоточены на слизистой оболочке: на губах, внутренней стороне щек, языке, нёбе. Часто у животных поражаются носовое зеркало, вымя и межкопытные щели (у крупного рогатого скота), а так же крылья носа, ушные раковины, нижняя часть живота, венчик копыта (у лошадей). Обычно болезнь длится около двух недель, после чего животные идут на поправку. Но бывают случаи и летального исхода, в частности молодого поколения.
Лечение и профилактика везикулярного стоматита у животных
Лечение везикулярного стоматита у животных, как и у людей, подразумевает симптоматическую терапию. Во время лечения прибегают к антимикробным препаратам и противовоспалительным средствам. Животное, страдающее от заболевания, часто поят водой и кормят мягким кормом. Профилактикой стоматита везикулярного является вакцинация скота для укрепления иммунной системы. Замечено, что при первой вакцинации животное приобретает иммунитет на 2-3 месяца, а при повторном проведении процедуры продолжительность иммунитета составляет 12 месяцев. Если есть подозрение на заражение животного РНК-содержащим вирусом, его необходимо немедленно оградить от других млекопитающих. В случае распространения везикулярного стоматита среди скота, необходимо принять меры по карантинированию местности.
Лечение и признаки энтеровирусного везикулярного стоматита у детей
Воспаление слизистой оболочки полости рта или стоматит распространенное детское заболевание. Невозможно вырастить ребенка и не познакомиться с проявлениями этой патологии. Мелкие высыпания, в ротовой полости доставляют массу неприятностей ребенку, мешая нормально кушать из-за сильной боли. Наиболее опасны своими осложнениями инфекционные формы, к которым относится энтеровирусный везикулярный стоматит.
Эта разновидность стоматита легко поддается лечению в начале своего развития. Запущенная же форма болезни может сказаться тяжелыми осложнениями, опасными для здоровья малыша.
Информация о том, по каким признакам определить везикулярный энтеровирусный стоматит у детей и какие меры профилактики следует соблюдать, поможет многим избежать тяжелых последствий.
Оглавление
- 1 Механизм поражения
- 2 Причины заражения и группы риска
- 3 Симптомы и первые признаки заболевания
- 4 Методы лечения
- 5 Профилактика
Механизм поражения
В обиходе этот вид стоматита принято называть «синдром рука, нога рот» из-за характерной локализации сипи, покрывающей не только слизистую рта, но и ладошки со ступнями.
Возбудителями везикулярного стоматита у детей выступают энтеровирусы типа Коксаки или эховирусы. Это РНК-содержащие микроорганизмы, проникающие внутрь клетки, и разрушающие ее своей жизнедеятельностью.
Заражение происходит в основном от больного воздушно-капельным или фекально-оральным путями. За редким исключением переносчиком вирусов могут выступать кровососущие насекомые. Проникнув в организм, вредители поселяются на слизистых ротовой полости. Окрепнув в клетках эпителия, вирус Коксаки по лимфатической системе добирается до кишечника. Там происходит основной рост и развитие колоний паразитов. Затем с током крови молодые штаммы разносятся по всему организму. Излюбленными местами энтеровируса являются ткани плевры, сердца, печени, кожных покровов. Первые проявления патологии выглядят как сыпь на ступнях и ладошках, при этом в ротовой полости везикул может быть совсем мало.
Свою жизнь вирусы способны вести только за счет чужих клеток. Попадая внутрь, вирус начинает быстро развиваться и активно размножаться, что приводит к отеку и гибели клетки. На месте мертвых участков скапливается жидкость, на фоне которой образуется везикула, это маленький пузырек, наполненный прозрачной жидкостью. После изъявления везикулы содержимое разливается по окружающим тканям и начинается новый виток в жизни паразита.
Неприятной отличительной чертой Коксаки считается его устойчивость к действию кислот желудочного сока. Поэтому, проходя через пищевод и желудок, колонии почти не несут потерь, и спокойно продолжают свою губительную деятельность.
Причины заражения и группы риска
Иммунная система, наш верный защитник, легко справляется самостоятельно с вирусными атаками на организм. Взрослый человек, заразившись энтеровирусом, даже не заметит этого. Легкое недомогание, слабость и небольшое повышение температуры тела мало у кого вызывают беспокойство.
Детский иммунитет не такой крепкий, как у взрослого, но и он справится с вирусом, если ребенок ни чем не болеет, а родители правильно подходят к вопросу как организовать быт, что бы вырастить здорового ребенка.
Спровоцировать развитие везикулярного стоматита, симптомы которого достаточно болезненны и неприятны, вирус может только в случае снижения иммунитета у малыша за счет перенесенных заболеваний или неправильного питания.
Более других подвержены энтеровирусным заболеваниям:
- дети первого года жизни, так как иммунная система еще не достаточно развилась и окрепла;
- малыши, находящиеся на искусственном вскармливании, так как материнское молоко является первым и самым важным источником полезных бактерий, необходимых для пищеварения и иммунной системы;
- детки, мало играющие в подвижные игры для детей на свежем воздухе;
- малыши, тянущие все из рук в рот.
Идеальными условиями для жизни Коксаки и эховирусов является теплый и дождливый сезон. Поэтому чаще всего вспышки синдрома рука, нога, рот приходятся на позднюю весну и раннюю осень, когда поднимают голову вирусы гриппа и других респираторных инфекций.
Симптомы и первые признаки заболевания
Прежде чем появятся первые признаки везикулярного энтеровирусного стоматита у детей, вредителю необходимо проникнуть внутрь клеток, обосноваться там, и размножиться до определенного количества.
Этот период занимает примерно 5 дней.Вначале ребенок станет вялым и малоподвижным, затем будет жаловаться на головную боль, боли в мышцах ручек и ножек, озноб и тошноту. Мама в этот период может заметить такие признаки как:
- сильное слюнотечение;
- насморк;
- повышение температуры тела.
Первое, что приходит на ум при такой ситуации, это ОРВИ. Даже некоторые врачи умудряются спутать стоматит с респираторными инфекциями. Насторожить родителей должны жалобы ребенка на боли в горле при глотании, изменение характера стула (понос) и сильное покраснение не только небных миндалин, но и всей ротовой полости.
Правильным решением будет сдача общего анализа крови, по результатам которого можно судить о характере заболевания. Если врач ставит вашему малышу ОРВИ, и не назначает при этом проверку анализов, немедленно требуйте направление. Это поможет вам выявить патологию на ранней стадии, и не допустить ее перерождения в энтеровирусный везикулярный стоматит с экзантемой – форма патологии, опасная развитием таких осложнений как:
- Менингит – воспаление оболочки головного мозга;
- Энцефалит – воспалительное поражение тканей головного мозга;
- Вялый парез – прогрессирующее нарушение двигательной функции конечностей;
- Лимфаденит – воспаление лимфатических узлов;
- Миокардит – воспаление тканей сердечной мышцы.
На 3-й день после возникновения симптомов появляются первые везикулы, возникает сначала сыпь на ступнях у детей, затем становится заметна сыпь на ладошках и в полости рта. Отличить от ветрянки, кори или другого вида дерматита везикулярный стоматит можно по таким признакам как:
- Выраженная отечность кожи под везикулами;
- Жалобы на сильные боли в суставах, даже когда ребенок не двигается;
- Лихорадка с высокими показателями температуры, доходящими до 38*С – 40*С.
Методы лечения
На фото изображен везикулярный энтеровирусный стоматита у ребенка в виде сыпи на лице
Специализированных препаратов, уничтожающих сам вирус пока не существует. Лечение рта и всего организма обязует родителей следить за тем, чтобы полость рта ребенка не пересыхала. Это значит не только часто и помногу давать ему пить, но и создать в комнате комфортный влажный климат.
Дальнейшие действия должны быть направлены на укрепление иммунной системы малыша и смягчение неприятных симптомов заболевания.
Для иммунной системы в первую очередь важны самые полезные и необходимые продукты питания для растущего организма (о них здесь), обилие витаминов и минералов в ежедневном меню. Пища в течение всего срока болезни должна быть комнатной температуры, протертая и не острая.
Из медикаментов иногда рекомендуют интерферон, но эффективность его действия при энтеровирусах пока полностью не изучена и не доказана.
Для снижения температуры можно применять привычные жаропонижающие, которые вы уже давали ребенку, во избежание аллергической реакции на незнакомое лекарственное средство.
Снять боль помогут жидкие и мазевые формы, содержащие лидокаин и ультракаин. Обязательно в схему лечения включают антигистаминные средства, такие как Дезал, Зодак, Кларитин.
Сыпь на ногах и ладошках хорошо смазывать зеленкой или Камистад Гелем. Этот препарат обладает высокоактивным противовоспалительным и анестезирующим действием. Это купирует зуд, и даст возможность ребенку спокойно спать по ночам.
Профилактика
Основное правило профилактики заболевание, это своевременное грамотное лечение острых респираторный и кожных патологий, лечение вазомоторного ринита и других инфекционных заболеваний, негативно отражающихся на состоянии иммунной системы.
Соблюдение ежедневных гигиенических процедур. Исключение использования чужих личных принадлежностей.
А так же разумные физические нагрузки, включающие ежедневную гимнастику для развития движений детей раннего возраста, и здоровый образ жизни всей семьи.
А что по поводу стоматита думает Комаровский? Смотри на видео
Герпангина: причины, симптомы и лечение
Авторы: Редакторы WebMD
В этой статье
- Что такое герпангина у малышей?
- Causes of Herpangina
- Symptoms of Herpangina
- Herpangina vs Hand, Foot, and Mouth
- Diagnosis of Herpangina
- Herpangina Treatment
- Herpangina Home Remedies
- Complications of Herpangina
Herpangina is a common childhood illness caused by вирус Коксаки.
Что такое герпангина у малышей?
Герпангина — распространенный вирус, вызывающий язвы во рту. Это очень заразное заболевание, которое обычно поражает маленьких детей в возрасте от 3 до 10 лет, хотя подростки и взрослые также могут заболеть.
Дети обычно подвергаются воздействию вируса в школе или детском саду, и чаще всего это происходит летом и осенью. В тропических странах ваши дети могут болеть герпетической ангиной круглый год.
Новорожденные, беременные женщины и люди с ослабленным иммунитетом могут заболеть герпетической ангиной и подвергаются риску серьезной инфекции.
Для большинства людей герпетическая ангина является легким и самоизлечивающимся заболеванием. Это означает, что через какое-то время он исчезнет сам по себе.
Причины герпангины
Герпангина вызывается вирусом. Наиболее распространенные вирусы включают:
- Коксаки B
- Коксаки A16
- Энтеровирус 71
- Эховирус
Герпангина распространяется воздушно-капельным путем, слюной, через фекалии или при непосредственном контакте с жидкостью. Вы можете заразиться вирусом от больного герпетической ангиной человека, который кашляет, чихает, кричит или поет рядом с вами.
Симптомы герпетической ангины
Симптомы герпетической ангины могут различаться в зависимости от того, какой вирус вызывает инфекцию. Некоторые дети с герпетической ангиной не имеют никаких симптомов.
Герпангина обычно проявляется через два-пять дней после контакта с вирусом. Симптомы включают:
- Белые волдыри в задней части глотки или на нёбе, миндалинах, язычке или языке
- Внезапная лихорадка
- Высокая температура
- Боль в горле
- Головная боль
- Боль в шее
- Потеря аппетита
- Слюнотечение
- Беспокойство
- Обезвоживание
В зависимости от типа вируса дыхания, у некоторых детей также возникают такие симптомы, как слабость мышц и рвота. У детей старшего возраста также может быть боль в спине.
Лихорадка обычно длится от 3 до 6 дней и иногда бывает очень высокой. В редких случаях это может вызвать судороги, называемые фебрильными судорогами.
Герпангина против рук, ног и рта
Заболевания рук, ящура и герпетической ангины связаны между собой. Оба заболевания вызываются вирусом Коксаки, но герпетическая ангина вызывает только язвы во рту. У людей с заболеванием рук, ног и рта есть герпетическая ангина, а также язвы на подошвах ног и ладонях.
Диагностика герпетической ангины
Ваш врач соберет анамнез вашего ребенка и проведет медицинский осмотр. Язвы выглядят иначе, чем другие инфекции или язвы, поэтому их легко идентифицировать. Если это легкая инфекция, вам могут не понадобиться никакие тесты или сканирование.
Лечение герпангины
Герпангина лечится путем купирования симптомов. Болезнь будет отличаться в зависимости от возраста и общего состояния здоровья вашего ребенка, а также тяжести инфекции. Поскольку герпангина является вирусной инфекцией, антибиотики не помогут.
Изоляция. Лучше не пускать ребенка в школу или детский сад, пока он болен. Дети могут вернуться в школу, как только язвы исчезнут и они поправятся. Болезнь обычно длится около недели.
Пейте много воды. Язвы во рту могут быть болезненными, и ваш ребенок может не хотеть есть или пить. Это может быстро привести к обезвоживанию, поэтому важно убедиться, что он пьет много воды.
Если у вашего ребенка высокая температура, это может усугубить обезвоживание. Вы можете дать ребенку напиток с электролитом, чтобы помочь.
Здоровое питание. Сосредоточьтесь на легкой, здоровой диете с прохладными мягкими продуктами и избегайте всего горячего или острого. Вот некоторые идеи:
- Несладкое яблочное пюре
- Йогурт
- Молоко
- Мороженое
Фруктовое мороженое и ледяная стружка также успокаивают полость рта и горло и помогают им получать жидкость.
Обезболивающие. Безрецептурные обезболивающие, такие как ацетаминофен или ибупрофен, могут облегчить боль и головную боль.
Спреи для рта. Вы можете найти спреи для полости рта, жидкости для полоскания рта или гели, которые могут облегчить боль от язв. Леденцы от горла также могут помочь. Убедитесь, что ваш ребенок достаточно взрослый, чтобы принять леденец и не подавиться.
Домашние средства от герпангины
Есть некоторые домашние средства, которые также могут облегчить состояние при герпетической ангине.
Ополаскиватель с морской водой. Вы можете полоскать язвы соленой водой после еды.
Холодные компрессы. Прохладный компресс, смоченный прохладной водой, может помочь при лихорадке и боли. Вы можете положить его на лоб или шею ребенка, пока ткань не станет теплой, а затем повторно замочить ее в прохладной воде.
Осложнения герпетической ангины
Герпангина редко вызывает осложнения. Большинство случаев легкие, и вашему ребенку обычно становится лучше в течение недели.
Однако иногда дети сильно болеют герпетической ангиной. Обезвоживание является наиболее частым осложнением.
В редких случаях у некоторых детей, инфицированных штаммом энтеровируса 71, возникают другие проблемы со здоровьем. К ним могут относиться:
- Менингит
- Энцефалит
- Мышечная слабость
- Судороги
Если вы или ваш ребенок очень плохо себя чувствуете с герпетической ангиной, немедленно обратитесь к врачу.
Оценка вклада инактивации, удаления и переноса вируса Эбола и вируса везикулярного стоматита с помощью салфеток, предварительно пропитанных дезинфицирующим средством HITES) в медицинских и домашних условиях (1, 2). В случае эмерджентных вирусов использование DPW в качестве вмешательства в цикл передачи инфекции может быть эффективным в результате двух ортогональных механизмов снижения вирусной нагрузки на контаминированные HITES (1): вирусной инактивации (уменьшение инфекционного вируса) и физическое удаление вируса с HITES путем стирания. Срок
обеззараживание было предложено Sattar и Maillard (3) для включения функций удаления и инактивации таких салфеток. Салфетка, которая обеспечивает только физическое удаление возбудителя, на самом деле представляет собой источник распространения инфекционного агента путем переноса возбудителя с зараженной поверхности на незараженную поверхность. Это потенциально может привести к распространению инфекционного агента из исходного источника на новые поверхности (3–5). По этой причине салфетки, не содержащие надлежащего микробицидного активного вещества, могут оказаться бесполезными для ограничения распространения инфекционных заболеваний, вызываемых патогенами, загрязняющими поверхности окружающей среды. Насколько значителен потенциал распространения патогенов с помощью таких салфеток?До недавнего времени было практически невозможно оценить отдельно эффективность DPW для удаления и инактивации патогенов, а также возможность переноса удаленных патогенов, включая вирусы, собранные во время протирания, на другие поверхности. Недавняя разработка и использование стандартного метода тестирования [ASTM E2967-15 (6)] с использованием инструмента, известного как Wiperator (FiltaFlex, Almonte, ON) (6–8), позволили исследователям проанализировать вклад инактивации. и удаление в сторону общей эффективности DPW для бактериальных патогенов, таких как Staphylococcus aureus (7, 8), Acinetobacter baumannii (7, 8) и Clostridium difficile (7). Совсем недавно такие исследования были распространены и на вирусные патогены. Например, Wesgate и Maillard (9) оценивали перенос и инактивацию бактериофага MS2 с помощью Wiperator. Беккер и др. (10) оценили эффективность различных DPW против трех безоболочечных вирусов (мышиный норовирус, человеческий аденовирус типа 5 и вирус SV40) с использованием теста с 4 полями [EN 16615:2015 (11)]. Последний представляет собой альтернативную методологию оценки удаления и инактивации DPW.
В настоящей статье мы исследовали эффективность DPW для удаления, инактивации и переноса вируса Эбола и вируса везикулярного стоматита (VSV) с поверхностей из нержавеющей стали. Наш интерес в этом исследовании заключался в оценке двух оболочечных вирусов, каждый из которых должен был быть инактивирован микробицидным активным веществом, используемым в DPW, в то время как ожидалось, что каждый тестовый вирус будет удален, но не инактивирован контрольной салфеткой без микробицидного активного вещества. . Кроме того, VSV использовался в качестве суррогата вируса Эбола в предыдущих исследованиях (12). Два вируса, конечно, отличаются одним очень специфическим свойством, а именно их летальностью для человека. То есть инфекции, вызываемые вирусом VSV у людей, приводят к очень легкой симптоматике, в то время как инфекции, вызванные лихорадкой Эбола, связаны с высокой смертностью (13, 14). Вирус Эбола представляет собой относительно большой (80 × 14000 нм), цилиндрической формы, с отрицательной одноцепочечной РНК вирус Семейство Filoviridae (14). Вирус везикулярного стоматита использовался в качестве суррогатного вируса для изучения инактивации вируса Эбола, поскольку VSV (70 × 170 нм) также является относительно большим, покрытым оболочкой, пулевидным, отрицательным одноцепочечным РНК-вирусом, в данном случае из Rhabdoviridae . семейство вирусов (15). Результаты для двух различных DPW, содержащих микробицидное активное вещество, сравнивали с результатами, полученными для салфетки, содержащей только DMEM (без активного ингредиента).
Материалы и методы
Клеточная линия, вирусы и среда
Клетки Vero E6 африканской зеленой мартышки (ATCC CRL-1586; Американская коллекция типовых культур, Манассас, Вирджиния, США) содержали при 37°C/5% CO 2 в лаборатории Дульбекко. модифицированная среда Игла (DMEM; HyClone, Logan, UT, США) с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS; Gibco, Гранд-Айленд, Нью-Йорк, США) и 10 единиц/мл пенициллина/стрептомицина (Gibco). Вариант Makona вируса Эбола (EBOV/Mak; вирус Эбола/H. sapiens-tc/GIN/2014/Makona-C05; инвентарный номер GenBank KJ660348) был получен из клинического изолята и биотехнологически сконструирован для экспрессии зеленого флуоресцентного белка (GFP). Мазки вируса везикулярного стоматита (VSV) были приготовлены из конструкции обратной генетики (16, 17) и биотехнологически сконструированы для экспрессии GFP.
Приготовление исходного вируса
Охарактеризованный запас вируса EBOV/Mak готовили путем заражения пяти флаконов Т-175 клеток Vero E6 вирусом EBOV/Mak, экспрессирующим GFP, при множественности заражения 0,01. Клетки Vero E6, по-видимому, являются превосходной клеткой-хозяином для амплификации и обнаружения вируса Эбола и указаны в описании клеток Американской коллекции типовых культур (18) как чувствительные к ряду вирусов геморрагических заболеваний, включая вирус Заира Эбола. Клеточная линия также чувствительна к заражению вирусом VSV, используемым в этом исследовании. Экспрессия GFP была очевидна в инфицированных клетках Vero E6 уже через 3 дня после инокуляции, хотя вирусный цитопатический эффект (CPE), определяемый как отслоение клеток, дегенерация клеточного листа и округление клеток, не наблюдался до ~6 дней. дней после прививки (рис. 1). В это время колбы замораживали при -70°С. На следующий день колбы оттаивали, кондиционированную среду удаляли и осветляли низкоскоростным центрифугированием (4500 g) в течение 10 мин. Осветленный супернатант из каждой колбы объединяли и накладывали на подушку из 20% вес./об. сахарозы в трис-NaCl-ЭДТА (TNE) буфере. Центрифужные пробирки вращали со скоростью 134 000 RCF Max (ротор Beckman Coulter 30 Ti при 28 000 об/мин) в течение 2 ч в роторе SW 32 Ti. Супернатанты удаляли, а оставшиеся вирусные осадки ресуспендировали в среде DMEM + 2% FBS + 10 единиц/мл пенициллина/стрептомицина (VCM) в течение ночи при 4°C. Запасы вирусов объединяли, делили на аликвоты в количествах, пригодных для использования, и замораживали при -70°C до тех пор, пока они не понадобятся. Титры вируса в рабочей массе были определены на основе вирусного CPE/GFP в клетках Vero E6 и превышали 8,8 log 9.0189 10 TCID 50 /мл методом Рида-Мюнха (19). Как показано на рисунке 1, использование GFP в качестве индикатора инфекции значительно повышает чувствительность анализа за счет более раннего считывания с возможностью визуализации положительного результата в меньшем проценте клеток-детекторов. Кроме того, показания GFP считаются более специфичными, поскольку кажущийся CPE может быть результатом других факторов, таких как цитотоксичность или длительные инкубационные периоды, приводящие к чрезмерному слиянию и отторжению клеток.
Рисунок 1 . Появление вирусного CPE или GFP в клетках Vero E6 через 2–14 дней после инокуляции EBOV/Mak.
Криопробирку со штаммом VSV Indiana оттаивали и использовали для инфицирования почти конфлюэнтной колбы Т-175 с клетками Vero E6. Вкратце, среду для культивирования клеток (DMEM + 10% FBS + 10 единиц/мл пенициллина/стрептомицина [CCM]) аспирировали из колбы T-175 и заменяли 5 мл разведенного вирусного раствора (MOI 0,01) на 1 ч при 37°С. °С ± 5% СО 2 . Колбу осторожно встряхивали каждые 10 мин в течение 1 ч. После этого инокулят отсасывали и заменяли 15 мл свежей VCM и инкубировали в течение 72 ч, пока большая часть клеточного монослоя не вытеснялась. Колбу замораживали при -70°С в течение ночи и затем оттаивали на следующий день. Кондиционированную среду очищали низкоскоростным центрифугированием (5000×g в течение 10 мин), супернатант делили на аликвоты и хранили при -70°C до тех пор, пока он не понадобится. Титры вируса в рабочей массе были определены на основе вирусного CPE в клетках Vero E6 как превышающие 8,8 log 9. 0189 10 TCID 50 /мл методом Рида-Мюнха (19).
Влажные салфетки для отрицательного контроля
В качестве отрицательного контроля использовалась ткань J-Cloth, репрезентативный тканевый материал, который использовался в предыдущих исследованиях этого типа (6, 8). Материал J-Cloth разрезали на квадраты 4 см × 4 см, и квадраты автоклавировали при 121°C в течение 60 мин. Используя стерильные щипцы, один стерильный квадрат J-Cloth помещали в пластиковую чашку Петри и добавляли к квадрату 320 мкл DMEM. Пропитанные квадраты ткани J-Cloth были помещены на бобышку стеклоочистителя в соответствии со стандартом ASTM 29.67-15 стандарт (6).
Подготовка салфеток для анализа эффективности
Салфетки «AHP» состояли из квадратов J-Cloth, пропитанных раствором ускоренной перекиси водорода (AHP) 1:40. Стерильные J-салфетки (4 × 4 см) готовили так же, как указано выше. Одну стерильную ткань J-Cloth помещали в стерильную чашку Петри с добавлением 320 мкл приготовленного AHP на салфетку. Пропитанную салфетку сразу же поместили поверх стерильного уплотнительного кольца (рис. 2) и в салфетку (8) вставили стерильную втулку салфетки (часть инструмента, которая манипулирует тестовой салфеткой). Загруженную салфетку добавляли в Wiperator, где она использовалась для протирки предварительно инокулированных поверхностей, а затем использовалась для протирания вторичной (не инокулированной) поверхности.
Рисунок 2 . Компоненты салфетки, используемые для исследования удаления, переноса и инактивации VSV и EBOV/Mak с помощью DPW и контрольных салфеток.
Салфетки «ЧАС» представляли собой готовые к использованию имеющиеся в продаже салфетки, пропитанные соединением четвертичного аммония (ЧАС: бензил-С12-16-алкилдиметилхлорид; три независимых партии). Каждая из исследованных партий салфеток с ЧАС была протестирована в конце установленного срока годности. Салфетки для ЧАС использовали свежими в день каждого анализа. Перед использованием в анализе контейнер, содержащий салфетки с ЧАС, пять раз переворачивали в течение 10 с. С помощью стерильных щипцов три салфетки ЧАС были удалены и помещены в стерильную пластиковую чашку Петри (150 × 15 мм). Дополнительные салфетки для ЧАС извлекали из того же контейнера и вырезали шестнадцать квадратов 4 × 4 см из центра четырех салфеток для ЧАС с использованием стерилизованных щипцов и ножниц. Несколько других салфеток для ЧАС извлекали из контейнера для салфеток для ЧАС и накладывали на вырезанные квадраты, чтобы тестируемые квадраты оставались влажными. Сверху на чашку Петри надели пластиковую крышку, чашку запечатали парафильмом и перенесли в бокс биобезопасности в испытательной лаборатории. Перед тестированием эффективности запечатанные чашки Петри переворачивали, как описано выше, и квадратные салфетки удаляли с помощью стерильных щипцов и помещали на бобышку Wiperator (8). Вырезанные образцы салфеток добавляли в Boss в течение 2 часов после запечатывания в чашку Петри.
Анализ нейтрализации дезинфицирующим средством
Перед оценкой эффективности салфеток для обеззараживания инфекционного вируса (вируса Эбола или ВВС) был проведен анализ нейтрализации для оценки взаимодействия нейтрализаторов и дезинфицирующих средств, цитотоксичности по отношению к клеткам Vero E6, используемым для регистрации GFP/ CPE и влияет на восстановление инфекционного вируса с поверхностей после тестирования. Были оценены комбинации нейтрализаторов, дезинфицирующих средств и вирусов.
В день анализа нейтрализации несколько нейтрализующих реагентов (VCM, 1 × бульон Летина и 1 × бульон Летина + VCM [1:10 10 × исходный бульон Летина в сочетании с VCM]) были приготовлены свежими. Кроме того, запас вируса с низким титром (~100–1000 TCID 50 на мл) VSV или EBOV/Mak также был приготовлен с использованием только 10 мкл инокулята для соответствующих условий тестирования, требующих наличия живого вируса. Все контроли нейтрализации выполняли в трехкратной повторности в одном эксперименте. Контроли нейтрализации включали следующее:
Отрицательный контроль
Клетки культивировали в VCM и использовали в качестве контроля для оценки цитотоксичности и вирусного CPE.
Контрольный нейтрализатор
Исследуемый нейтрализатор десятикратно серийно разбавляли в VCM, и 50 мкл добавляли к клеткам Vero E6 в пяти повторностях для каждого разведения из 10 0 (чистый) до 10 −3 . Клетки оценивали на цитотоксичность через 14 дней после инокуляции.
Нейтрализующее дезинфицирующее средство (контроль цитотоксичности)
Салфетки, пропитанные микробицидным активным веществом, или салфетки, пропитанные DMEM, загружали в Wiperator, и стерильный образец из нержавеющей стали подвергался воздействию салфетки в течение 5 с. Образец из нержавеющей стали был помещен в 1 мл нейтрализатора, перемешан пипеткой и, наконец, 10-кратно серийно разбавлен VCM (от 10 0 до 10 -3 ). Для каждого разведения 50 мкл добавляли к 80% конфлюэнтному монослою клеток Vero E6 в пятикратной повторности и контролировали в течение 14 дней на предмет CPE. Для каждой тестовой салфетки использовали три технических повтора.
Положительный контроль (вирус)
Положительный контроль вируса готовили путем добавления 10 мкл разбавленного вируса с низким титром к 990 мкл VCM. Положительный контроль серийно разбавляли в 10 раз в VCM, и 50 мкл каждого разведения добавляли к клеткам Vero E6 в пятикратной повторности для каждого разведения из 10 0 (чистый) до 10 −3 . Клетки оценивали на вирусный CPE через 14 дней после инокуляции.
Нейтрализатор Вирусный контроль (вирус)
Для учета действия нейтрализатора на вирус к 990 мкл нейтрализатора добавляли 10 мкл вируса с низким титром. Контрольные образцы нейтрализующего вируса серийно разбавляли в 10 раз в VCM и 50 мкл добавляли к клеткам Vero E6 в пяти повторностях для каждого разведения от 10 0 (чистое) до 10 -3 . Клетки оценивали на вирусный CPE через 14 дней после инокуляции.
Нейтрализатор Дезинфицирующее средство для борьбы с вирусами (вирусами)
Чтобы учесть способность нейтрализатора эффективно смягчать эффекты тестируемого активного дезинфицирующего средства, подготовленную активную пропитанную салфетку загружали в салфетку, а стерильный носитель из нержавеющей стали подвергали воздействию активный вайп на 5 с. «Вытертый» носитель из нержавеющей стали помещали в 1 мл нейтрализатора, жидкость перемешивали пипеткой и добавляли 10 мкл вируса с низким титром. Контрольный образец вируса нейтрализующего дезинфектанта инкубировали в течение 10 мин при комнатной температуре, после чего его серийно разбавляли в 10 раз в VCM, добавляя по 50 мкл в повторах по 5, добавленных к клеткам Vero E6 для каждого разведения от 10 0 (чистый) до 10 −3 . Клетки оценивали на вирусный CPE через 14 дней после инокуляции.
Проверка эффективности салфеток
Проверка эффективности салфеток (рис. 3) проводилась в соответствии со стандартом ASTM 2967-15 (6). Инокуляты тестового вируса готовили в трехчастной почвенной нагрузке (20, 21). «Почвенная нагрузка» относится к матрице, предназначенной для испытания процесса инактивации и удаления тестового вируса. Термин «почвенная нагрузка» иногда заменяется термином «органическая нагрузка», и последний может быть более описывающим типичную матрицу заражения, которая предназначена для имитации выделений или выделений, при которых вирус высвобождается от инфицированного человека. В нашем исследовании мы использовали трехчастную загрузку почвы, указанную в стандарте ASTM, которая состоит из стерильных компонентов (12,5 мкл 5% бычьего сывороточного альбумина + 17,5 мкл 5% триптона + 50 мкл 0,4% муцина), к которым было добавлено 170 мкл вируса. запас. Его ежедневно готовили в свежем виде для каждой повторности проведенного вирулицидного теста. С помощью поршневой пипетки подготовленный вирус (10 мкл) наносили на стерильные носители из нержавеющей стали, и носители высушивали на воздухе в БББ класса II в лаборатории BSL-2 (VSV) или лаборатории BSL-4 (EBOV/Mak ) в течение 60 мин. Инокулированные носители помещали в одну канавку несущей пластины Wiperator (рис. 2) и закрепляли на месте с помощью магнита на противоположной стороне пластины. Второй неинокулированный носитель помещали во второй подогнанный паз и закрепляли магнитом на противоположной стороне пластин-носителей.
Рисунок 3 . Схематическое изображение используемой методологии тестирования инактивации/удаления.
С помощью стерильных щипцов стерильные пропитанные микробицидами активные салфетки или стерильные салфетки, пропитанные DMEM, удаляли из чашек Петри, помещали на бобышку Wiperator и закрепляли на месте с помощью большого уплотнительного кольца (рис. 2). Затем загруженные бобышки прикреплялись к шпинделю стеклоочистителя, а пластины с держателями поднимались на место. Действие стирания орбиты начиналось сразу после контакта с пластиной. Параметры орбиты: диаметр 10 мм, давление 150 г для моментов времени 5, 15, 30 или 60 с. После достижения временных точек планшет-носитель опускали из положения для протирания и переворачивали так, чтобы стерильный незасеянный носитель находился под использованной салфеткой, и поднимали его в положение. Орбитальное действие начиналось, как только был установлен контакт со вторичным контейнером, и продолжалось в течение 5 секунд, время протирания за цикл при давлении 150 g. Затем пластину, содержащую два носителя, удаляли из Wiperator, а обнаженные носители извлекали с помощью стерильных щипцов. Обработанные носители помещали в 1 мл нейтрализующего раствора VCM, и инфекционный вирус, оставшийся на носителях, извлекали пипетированием.
Результаты
Оценка эффективности нейтрализации
В ходе оценки возможных нейтрализующих агентов было установлено, что 100% культуральная среда для вирусов (VCM) добавлялась к разведениям AHP или QAC перед введением EBOV/Mak или VSV в трехкомпонентном почвенная нагрузка (21) предотвратила инактивацию вирусов. Как показано в Таблице 1, только VCM (нейтрализатор) и VCM + дезинфицирующее средство не вызывали цитотоксичности в отношении клеток Vero E6, даже при применении в неразбавленном виде. Как показано на фиг. 4, вирусные титры, полученные для положительных контролей вируса, нейтрализатора (VCM) + EBOV/Mak и нейтрализатора (VCM) + дезинфицирующего средства + EBOV/Mak, были неразличимы. Дезинфицирующий нейтрализующий агент, который использовался в каждом из описанных ниже исследований эффективности инактивации, представлял собой VCM.
Таблица 1 . Оценка цитотоксичности клеток Vero E6, подвергшихся воздействию отрицательного контроля (нейтрализатор VCM) или нейтрализатор + дезинфицирующее средство QAC или AHP из салфетки DPW.
Рисунок 4 . Способность VCM нейтрализовать инактивирующие EBOV/Mak эффекты дезинфицирующих средств QAC и AHP из салфеток DPW.
Тестирование эффективности удаления и инактивации
Результаты, полученные при тестировании носителя одной партии салфеток, пропитанных AHP, и трех партий салфеток, пропитанных ЧАС, а также салфеток отрицательного контроля (J-Cloth), представлены в таблице 2 (EBOV). /Mak) и табл. 3 (VSV). При отсутствии ожидаемой инактивации вируса (т. е. в случае стирания отрицательного контроля) степень распространения вируса 9Удаление 0167 оценивали по разнице титра инфекционного вируса, выделенного из высушенного носителя положительного контроля, и вируса, выделенного из инокулированного носителя после использования салфетки салфеткой Wiperator при различных оцененных временах салфетки. Степень переноса вируса была выражена в процентах от инфекционного вируса, оцененного (на основе восстановления из высушенного положительного контроля) на инокулированном контрольном носителе, который был извлечен из вторичного носителя после 5-секундного стирания переноса. шаг. Количество вируса, оставшегося на самой салфетке, не измерялось, поэтому полные балансы масс вирусов с шипами рассчитать было невозможно. В результате инактивация не может быть количественно измерена, но подразумевается отсутствием выделения вируса из инокулированных носителей после вытирания в течение 5, 15, 30 или 60 с или из вторичного носителя после 5-секундного этапа вытирания переноса инфекционного вируса .
Таблица 2 . Эффективность салфеток, пропитанных дезинфицирующим средством, по сравнению с салфетками, пропитанными DMEM, для удаления, переноса и инактивации EBOV-Mak * .
Таблица 3 . Эффективность салфеток, пропитанных дезинфицирующим средством, по сравнению с салфетками, пропитанными DMEM, для удаления, переноса и инактивации VSV * .
Результаты для EBOV/Mak
Все испытания с участием EBOV/Mak проводились при комнатной температуре в BSC класса II в лабораториях BSL-4 Агентства общественного здравоохранения Канады в Канадском научном центре здоровья человека и животных, Виннипег, Манитоба управляется правительством Канады. Результаты исследования Wiperator, проведенного для оценки эффективности салфеток AHP и салфеток QAC для обеззараживания носителей, зараженных EBOV/Mak, представлены в таблице 2. Показанные значения представляют собой объединенные данные трех испытаний (по три повторения в каждом) с использованием одной и той же партии активный AHP и по одному испытанию (три повтора на испытание) для трех партий активного QAC.
Салфетки для отрицательного контроля (J-ткань, пропитанная DMEM)
После протирания носителя, инокулированного EBOV/Mak, тканью J-cloth, пропитанной DMEM, инфекционный EBOV/Mak все еще выделялся из инокулированного носителя (таблица 2). Извлеченные титры EBOV/Mak от этих носителей варьировались от ~4,1 до ~3,1 log 10 TCID 50 /мл в течение 5, 15, 30 и 60 секунд после начального титра ~6,6 log 10 TCID 50 /мл. Log 10 удаления EBOV/Mak с инокулированного носителя для каждого времени обтирания колебался от ~2,5 до ~3,5 log 10 , при этом минимальное увеличение съема наблюдается при увеличении времени протирки (табл. 2). Эти значения соответствуют удалению ~99,7% вируса из зараженного носителя после 5-секундного стирания по сравнению с ~99,97% после 60-секундного стирания. Снижение выделения вируса из инокулированного носителя было связано скорее с удалением, чем с инактивацией, поскольку инфекционный вирус выделялся из вторичных носителей после этапа переноса.
На этапе переноса мы исследовали возможность переноса вируса, удаленного из инокулированного носителя (и взвешенного в салфетке J-Cloth), на вторичный носитель. Было обнаружено, что титры EBOV/Mak, полученные от вторичного носителя, находятся в диапазоне от ~3,9до ~2,3 log 10 TCID 50 /мл после переноса с инокулированных носителей, протертых в течение 5, 15, 30 и 60 с. Эти значения соответствуют передаче вторичному носителю от ~ 0,41 до ~ 0,01% вируса, извлеченного из инокулированных носителей. Эти результаты показывают, что салфетки J-Cloth, пропитанные DMEM, удалили EBOV/Mak с исходной зараженной поверхности, но также перенесли часть инфекционного вируса на вторичную поверхность.
Салфетки с пропиткой AHP
После протирки носителя, зараженного EBOV/Mak, салфеткой AHP низкий титр инфекционного EBOV/Mak (средние значения в диапазоне от ~1,1 до ~0,20 log 10 TCID 50 /мл; n = 3 повтора на момент времени) извлекали из инокулированного носителя после каждого времени вытирания (таблица 2). Количество повторов, дающих положительный результат обнаружения вируса, составляло 5 из 9, 2 из 9, 2 из 9 и 1 из 9 для времени очистки 5, 15, 30 и 60 с соответственно.
На этапе переноса мы исследовали возможность переноса вируса, удаленного из инокулированного носителя (и взвешенного в салфетке AHP), вторичному носителю. Инфекционные титры EBOV/Mak, полученные от вторичных носителей, составляли ~0,9 log 10 TCID 50 /мл и ~0,1 log 10 TCID 50 /мл; n = 9 повторов) после переноса с инокулированных носителей, протертых в течение 5 и 30 с соответственно. Вирус обнаружен в 3-х повторах из 9-ти.оценивали по инокулированным носителям, протертым в течение 5 с, и в одной повторности по инокулированным носителям, протертым в течение 30 с. От инокулированных носителей, протертых в течение 15 или 60 с, инфекционный EBOV/Mak не был передан. Эти результаты показывают, что протирание AHP инактивировало остаточный инфекционный вирус EBOV/Mak, который удалялся во время протирания инокулированных носителей в это время.
Салфетки, пропитанные ЧАС
После протирания носителя, зараженного EBOV/Mak, салфеткой ЧАС низкий титр инфекционного EBOV/Mak (в среднем ~0,6 log 10 TCID 50 /мл; n = 9 повторов) был извлечен из трех инокулированных носителей из общего числа девяти повторов, оцененных после 5-секундного времени вытирания (таблица 2). Один повтор из девяти протестированных после 30-секундного времени очистки также дал восстанавливаемый вирус (для общего среднего значения 0,2 log 10 TCID 50 / мл, n = 9 повторов). После 15 и 60-секундного обтирания у инокулированных носителей инфекционный вирус не выделялся.
На этапе переноса мы исследовали возможность переноса вируса, удаленного из инокулированного носителя (и взвешенного в салфетке для ЧАС), вторичному носителю. Низкий титр инфекционного EBOV/Mak (в среднем ~0,2 log 10 TCID 50 /мл; n = 9 повторностей) переносили с инокулированного носителя, протертого в течение 5 с (из одной повторности из девяти оцененных). Инфекционные EBOV/Mak не были выделены из инокулированных носителей, протертых в течение 15, 30 или 60 с. Эти результаты показывают, что салфетка QAC инактивировала вирус EBOV/Mak, который был удален во время салфетки инокулированных носителей.
Результаты для VSV
Результаты исследования Wiperator, проведенного для оценки эффективности салфеток AHP и QAC для обеззараживания носителей, инокулированных VSV, представлены в таблице 3. Приведенные значения представляют собой объединенные данные трех испытаний (по три повтора каждого). с использованием одной и той же партии активного AHP и по одному испытанию (три повтора на испытание) для трех партий активного ЧАС.
Салфетки для отрицательного контроля (J-ткань, пропитанная DMEM)
После протирания зараженного вирусом вируса носителя салфеткой J-cloth, пропитанной DMEM, инфекционный вирус VSV все еще выделялся из зараженного носителя после протирания в течение 60 с (таблица). 3). Вирусный инокулят составил в среднем ~5,8 log 10 TCID 50 /мл. Титры VSV, извлеченные из инокулированного носителя, варьировались от ~3,9 до ~3,3 log 10 TCID 50 /мл для 5, 15, 30 и 60-секундного времени очистки. Журнал 10 удаление вируса VSV с инокулированного носителя для каждого времени обтирания колебалось от ~1,9 до ~2,5 log 10 (таблица 3). Эти значения соответствуют удалению ~98,8% вируса из зараженного носителя после 5-секундного стирания по сравнению с ~99,7% после 60-секундного стирания. Снижение выделения вируса из инокулированного носителя было связано скорее с удалением, чем с инактивацией, поскольку вирус наблюдался на вторичных носителях после стадии переноса.
На этапе переноса мы исследовали возможность переноса вируса, удаленного из инокулированного носителя (и взвешенного в салфетке J-Cloth), на вторичный носитель. Было обнаружено, что титры VSV, извлеченные из вторичного носителя, колеблются от ~ 3,8 до ~ 3,3 log 9.0189 10 TCID 50 /мл после переноса с инокулированных носителей, протертых в течение 5, 15, 30 и 60 с. Эти значения соответствуют передаче вторичному носителю от ~ 1,7% до ~ 0,4% вируса, извлеченного из инокулированных носителей. Как и в случае с поверхностями, зараженными EBOV/Mak, это указывает на то, что салфетки J-Cloth удалили ВВС с исходной зараженной поверхности, хотя часть инфекционного вируса была перенесена на вторичную поверхность после использования этих салфеток.
Салфетки, пропитанные AHP
После протирания зараженного вирусом VSV носителя салфеткой AHP, через 5, 15, 30 или 60 секунд после протирания носителя инфекционный VSV не выявлялся (таблица 3). Это указывает на то, что салфетка AHP удалила или инактивировала практически весь VSV, осевший на исходной загрязненной поверхности (~ 6,2 log 10 TCID 50 /мл, оценено на основе значения для высушенного носителя положительного контроля).
Поскольку от вторичных носителей не было выделено ни одного инфекционного вируса VSV, предполагается, что любой вирус VSV, удаленный от инокулированных носителей, был инактивирован в процессе переноса или после переноса на вторичных носителей.
Салфетки, пропитанные ЧАС
После протирки зараженного вирусом VSV носителя салфеткой с ЧАС, через 5, 15, 30 или 60 секунд после протирки инфекционного вируса VSV не было выявлено. Это указывает на то, что салфетка с ЧАС удалила или инактивировала практически весь ВВС, осевший на исходной загрязненной поверхности (~ 6,0 log 10 TCID 50 /мл, рассчитано на основе значения для высушенного носителя положительного контроля).
Поскольку от вторичных носителей не было выделено ни одного инфекционного вируса VSV, предполагается, что любой вирус VSV, удаленный от инокулированных носителей, был инактивирован в процессе переноса или после переноса на вторичных носителей.
Обсуждение
Одноразовые пропитанные дезинфицирующим средством салфетки (DPW) обычно используются для снижения патогенной нагрузки на HITES в медицинских учреждениях и в домашних условиях (1, 2). Эти одноразовые салфетки удобны тем, что содержат микробицид, который обеспечивает возможность как удаления патогенов с поверхности, так и инактивации патогенов, остающихся на протираемой поверхности и внутри самой салфетки. Ожидается, что функция механического удаления пропитанной салфетки не будет такой высокой, как у сухой салфетки, поскольку DPW, содержащие микробициды, предварительно смачиваются и, следовательно, имеют ограниченную способность поглощать жидкость. Удаление облегчается растворением восстановленного вируса в ткани салфетки и в жидкости, используемой для пропитки салфетки. Инактивирующая функция определяется эффективностью включенного микробицидного активного вещества для инактивации представляющего интерес патогена. Эта инактивация может происходить в самой салфетке или в жидкости, выделяемой из салфетки во время протирания исходной поверхности или вторичной поверхности.
Двойная функциональность DPW была обозначена Sattar и Maillard (3) как обеззараживание , чтобы отразить как функцию удаления, так и функцию инактивации таких салфеток. В течение некоторого времени было очевидно, что протирание, которое обеспечивает только физическое удаление патогена, представляет собой потенциальный источник переноса патогена с загрязненной поверхности на незагрязненную (вторичную) поверхность во время протирания (3, 5). В случае эмерджентных вирусов, таких как вирусы, вызывающие геморрагическую лихорадку, низкий уровень переноса вируса с зараженной поверхности на вторичную поверхность представляет собой нежелательный механизм распространения инфекции среди здоровых людей. Это вызывает особую озабоченность в отношении вируса Эбола из-за его низкой инфекционной дозы (1–10 инфекционных единиц) (13, 22).
Насколько значителен потенциал распространения патогенов при использовании салфеток без соответствующих микробицидных активных ингредиентов? До недавнего времени можно было только предполагать, что распространение патогенов может происходить при использовании салфеток, не обладающих инактивирующей патогены активностью. Ранее было невозможно количественно и проанализировать удаление и перенос патогенов с одной поверхности на другую в процессе протирки. К счастью, в 2015 году были кодифицированы два метода оценки способности DPW обеззараживать поверхности. Они были стандартизированы как ASTM 29.67-15 (21) в США и EN 16615 (11) в Европе. Есть несколько заметных различий в методологиях, описанных в двух стандартах. Например, в стандарте EN 16615 используется другая нагрузка на почву (0,3 г/л бычьего сывороточного альбумина по сравнению с тройной нагрузкой на почву (21), описанной в разделе «Методы»). Стандарт EN требует, чтобы к салфетке прикладывалось давление в 5 фунтов (2,5 кг) во время операции протирки по сравнению с 0,33 фунта (0,15 кг) в стандарте ASTM (6, 8). Протирание в соответствии с EN 16615 выполняется вручную путем двукратного протирания тканью сбоку (вперед и назад) с типичной 5-минутной инкубацией после протирания. Wiperator выполняет очистку, используя синхронизированное орбитальное движение в соответствии с ASTM 29.67-15. EN 16615 использует тампон для взятия проб с поверхности, в то время как весь несущий диск в методе ASTM 2967-15 помещается в лунку, содержащую 1 мл нейтрализующего агента для экстракции. В результате в методе ASTM 2967-15 отбирается 100% поверхности носителя после процедуры протирки/переноса вместо того, чтобы полагаться на тампоны для отбора проб с части поверхности. Эффективность взятия мазка для выделения вируса с поверхности, как это делается в стандарте EN, может варьироваться в зависимости от используемой поверхности, исследуемого микроорганизма и самого состава мазка. Таким образом, оба стандарта позволяют оценить степень переноса патогена с инокулированной поверхности на вторичные поверхности, и каждый из них имеет характеристики, которые можно считать преимуществами или недостатками.
В нескольких публикациях описано использование ASTM-2967-15 и прибора Wiperator для оценки удаления, переноса и инактивации бактериальных патогенов с помощью DPW (7, 8). Эти исследования показали, что возможность переноса бактерий с инокулированной поверхности на одну или несколько вторичных (чистых) поверхностей зависит как от используемого DPW, так и от оцениваемых видов бактерий. Например, было обнаружено, что несколько протестированных DPW переносят 90 167 S. aureus 90 168, в то время как потенциал DPW переносить A. baumannii была меньше, как и степень переноса этого микроорганизма. Clostridium difficile переносился всеми оцениваемыми салфетками DPW и в наибольшей степени из трех оцениваемых микроорганизмов (7). Эти различия в потенциале переноса, вероятно, отражают различия в относительной чувствительности микробов к активным ингредиентам, включенным в DPW, поскольку известно, что спорообразующие бактерии ( C. difficile ) относительно менее чувствительны к микробицидам. Различия в составе поверхности разных микробов также могут играть роль в их способности прикрепляться к поверхности.
Насколько нам известно, Wesgate и Maillard (9) сообщили о первом использовании ASTM-2967-15 для оценки удаления, переноса и инактивации вируса с помощью DPW. В этом исследовании оценивали бактериофаг MS2 в качестве суррогата небольших безоболочечных вирусов млекопитающих. Результаты показали, что с помощью DPW достигается различная степень удаления MS2, и, что важно, все, кроме одного, из восьми типов DPW с различными микробицидными активными ингредиентами переносят инфекционный MS2 на вторичную поверхность (9). Небольшие вирусы без оболочки, как правило, менее восприимчивы к инактивации бактерицидными препаратами (23), и неудивительно, что в большинстве исследованных DPW не была достигнута достаточная инактивация MS2 для предотвращения переноса на новую поверхность во время протирания. Беккер и др. (10) оценили четыре DPW для инактивации трех безоболочечных вирусов (аденовирус, обезьяний вирус 40 и мышиный норовирус) с использованием методологии EN 16615. В этом исследовании было обнаружено, что только DPW, содержащий активную надуксусную кислоту, вызывает достаточную инактивацию трех вирусов, чтобы предотвратить перенос на вторичные поверхности во время протирания. Было обнаружено, что DPW с ЧАС или 2-пропанолом в качестве активных ингредиентов переносит один или несколько тестовых вирусов. Это опять-таки, вероятно, отражает относительно меньшую восприимчивость безоболочечных вирусов к некоторым бактерицидным препаратам (23).
В настоящем исследовании метод ASTM-2967-15 использовали для оценки эффективности DPW, содержащего одно из двух активных веществ, AHP и QAC, по сравнению с контрольной салфеткой (J-Cloth, пропитанной DMEM). Используемые модельные вирусы (EBOV/Mak и VSV) представляли собой оболочечные вирусы, которые, как ожидается, будут легко инактивированы двумя протестированными активными композициями. Салфетка с отрицательным контролем использовалась, чтобы помочь проанализировать вклад удаления и инактивации, поскольку ожидалось, что салфетка с отрицательным контролем удалит, но не инактивирует вирусы. Результаты, полученные с использованием салфетки отрицательного контроля в настоящем исследовании, также можно ожидать, когда используется DPW, пропитанный активным ингредиентом с ограниченной эффективностью в отношении целевого патогена. Примером неподходящего активного вещества может быть DWP, пропитанный детергентом, используемый для обеззараживания поверхности, содержащей загрузку безоболочечного вируса (например, норовируса человека).
Приведенные здесь результаты количественно демонстрируют уменьшение количества EBOV/Mak и VSV (каждый из которых суспендирован в трехкомпонентной органической нагрузке) с поверхности носителя из нержавеющей стали путем вытирания и, при отсутствии достаточной инактивирующей активности, переноса инфекционного вируса с поверхности инокулированного носителя на вторичную поверхность. Таким образом, в реальной ситуации можно ожидать, что использование салфетки, не обладающей микробицидной активностью или имеющей ограниченную активность, обеспечит некоторое удаление, хотя и ценой простого перемещения части загрязняющего вещества из одного места на поверхности в другое (24). . Для вируса Эбола удаление 99,97% (3,5 log 10 ) вируса с поверхности, зараженной более 6 log 10 вируса, недостаточно с точки зрения общественного здравоохранения, учитывая низкую инфекционную дозу этого вируса. Кроме того, распространение даже небольшого процента (например, 0,42%, что соответствует ~8000 инфекционных единиц) вируса Эбола с зараженной поверхности на новую поверхность может представлять значительную возможность передачи болезни, вызванной вирусом Эбола.
С другой стороны, настоящие результаты демонстрируют, что салфетка, пропитанная достаточной концентрацией соответствующего микробицидно-активного вещества (в данном случае примером является AHP или QAC), при достаточном времени контакта удаляет вирус и инактивирует оставшийся вирус на загрязненная поверхность. Перенос инфекционного вируса с инокулированной поверхности на вторичную поверхность также ограничивается инактивирующей активностью DPW. В дополнительных исследованиях с участием EBOV/Mak и VSV мы получили аналогичные данные об эффективности для DPW, содержащего различные микробицидные активные вещества, включая 70 % этанола, 1 % гипохлорита натрия и продукт, содержащий 5 % двойного ЧАС (Cutts et al. , публикация в стадии подготовки).
Заключение
Как отмечалось ранее (1–3, 5, 7–10) в отношении бактериальных и вирусных патогенов, эффективность DPW для обеззараживания поверхностей зависит от ряда факторов. К ним относятся конкретный патоген в органической нагрузке, загрязняющей поверхности окружающей среды, наличие соответствующего микробицидного активного вещества в DPW и время контакта (время, в течение которого патоген находится в контакте с микробицидом).
Таким образом, удаление EBOV/Mak и VSV с помощью салфеток в этом исследовании было обширным. При отсутствии достаточной концентрации и времени контакта соответствующего микробицидного активного вещества в DPW (например, испытанных DPW на основе AHP и QAC) перенос небольшого, хотя и значительного (с точки зрения инфекционной единицы/инфекционной дозы) количества инфекционного вируса с инокулированной поверхности на вторичную поверхность не наблюдалось. В случае вируса Эбола важно использовать DPW с соответствующим микробицидным активным веществом после соответствующего времени контакта для предотвращения непреднамеренного переноса инфекционного вируса на чистую вторичную поверхность (как наблюдается в отрицательном контроле / J-Cloth). . В противном случае существует возможность распространения вируса Эбола и связанный с этим риск передачи болезни, вызванной вирусом Эбола. Дезинфицирующие салфетки, предварительно пропитанные соответствующим образом подобранными бактерицидными активными веществами, должны быть полезны во время вспышек вируса Эбола, а также других высококонтагиозных новых вирусов, таких как SARS-CoV-2, которые в настоящее время вызывают пандемию COVID-19..
Заявление о доступности данных
Первоначальные материалы, представленные в исследовании, включены в статью/дополнительный материал. Дальнейшие запросы можно направлять соответствующему автору/авторам.
Вклад авторов
MI, TC и ST задумали и разработали эксперименты. RN и TC проанализировали данные. RN, MI, JR, TC, CR и SK внесли свой вклад в написание рукописи. Все авторы рассмотрели и одобрили рукопись.
Финансирование
Эта работа была поддержана и совместно профинансирована Агентством общественного здравоохранения Канады и РБ.
Конфликт интересов
JR и MI работают в компании RB, которая также оказала частичную финансовую поддержку этому исследованию. RN предоставил анализ данных и подготовку рукописи в качестве платного консультанта, нанятого RMC Pharmaceutical Solutions, Inc.
Остальные авторы заявляют, что исследование проводилось в отсутствие каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.
Дополнительный материал
Дополнительный материал к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fpubh.2020.00183/full#supplementary-material
Ссылки
1. Lopez G , Китадзима М. , Хавас А., Герба С., Рейнольдс К. Оценка воздействия дезинфицирующих салфеток на перенос микробов с фомита на палец. Appl Environ Microbiol . (2014) 80:3113–8. doi: 10.1128/AEM.04235-13
PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google
2. Song X, Vossebein L, Zille A. Эффективность пропитанных дезинфицирующим средством салфеток, используемых для дезинфекции поверхностей в больницах: обзор. Противомикробное средство для борьбы с инфекциями . (2019) 8:139. doi: 10.1186/s13756-019-0595-2
PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar
3. Саттар С., Майлард Дж. Решающая роль протирки в обеззараживании поверхностей, к которым часто прикасаются: обзор текущего состояния и направления на будущее. Am J Инфекционный контроль . (2013) 41:S97–S104. doi: 10.1016/j.ajic.2012.10.032
PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar
4. Sattar SA. Перспективы и недостатки недавних достижений в области химических средств предотвращения распространения внутрибольничных инфекций поверхностями окружающей среды. Am J Инфекционный контроль . (2010) 38:S34. doi: 10.1016/j.ajic.2010.04.207
PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar
5. Lei H, Li Y, Xiao S, Yang X, Lin C, Norris S, et al. Логистический рост сети поверхностного загрязнения и ее роль в распространении болезней. Научный представитель . (2017). 7:14826. doi: 10.1038/s41598-017-13840-z
PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar
6. ASTM International. ASTM E2967-15. Стандартный метод испытаний для оценки способности предварительно смоченных салфеток удалять и переносить бактериальное загрязнение на твердые, непористые поверхности окружающей среды с помощью салфетки . Уэст-Коншохокен, Пенсильвания: ASTM International (2015). Доступно в Интернете по адресу: https://www.astm.org/Standards/E2967.htm (по состоянию на 9 мая)., 2020).
Google Scholar
7. Ramm L, Siani H, Wesgate R, Maillard J. Перенос патогенов и высокая изменчивость в удалении патогенов моющими салфетками. Am J Инфекционный контроль . (2015) 43:724–8. doi: 10.1016/j.ajic.2015.03.024
PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar
8. Sattar S, Bradley C, Kibbee R, Wesgate R, Wilkinson M, Sharpe T, et al. Дезинфицирующие салфетки подходят для контроля микробной бионагрузки с поверхностей: использование нового стандартного протокола испытаний ASTM для демонстрации эффективности. Дж Хосп Заражение . (2015) 91:319–25. doi: 10.1016/j.jhin.2015.08.026
PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar
9. Wesgate R, Maillard J. Эффективность имеющихся в продаже дезинфицирующих салфеток для удаления, переноса и уничтожения суррогатного вирусного патогена человека in vitro . Представлено Британским обществом медицинских инфекций совместно с La Société Française d’Hygiène Hospitalière (SF2H) в Лионе, Франция (2014 г.). Доступно в Интернете по адресу: https://www.trycare.co.uk/files/ww/Cardiff. %20University%20-%20Efficacy%20of%20disinfectant%20wipes. pdf (по состоянию на 9 мая, 2020).
Google Scholar
10. Becker B, Henningsen L, Paulmann D, Bischoff B, Todt D, Steinmann E, et al. Оценка вирулицидной эффективности дезинфицирующих салфеток методом испытаний, имитирующим практические условия. Противомикробное средство для борьбы с инфекциями . (2019) 8:121. doi: 10.1186/s13756-019-0569-4
PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar
11. Европейский комитет по нормализации CEN. ЕН 16615:2015. Химические дезинфицирующие и антисептические средства. Метод количественного испытания для оценки бактерицидной и бактерицидной активности на непористых поверхностях с механическим воздействием с использованием салфеток в медицинской сфере (испытание на 4 полях). Метод испытания и требования (этап 2, этап 2) . (2015) Доступно в Интернете по адресу: https://infostore.saiglobal.com/en-us/Standards/EN-16615-2015-340824_SAIG_CEN_CEN_780961/ (по состоянию на 9 мая 2020 г.).
12. Никифорук А., Каттс Т., Терио С., Кук Б.В. Проблема защитных материалов, подвергающихся воздействию жидкости, и устойчивость вируса Эбола в окружающей среде. Научный представитель . (2017) 7:4388. doi: 10.1038/s41598-017-04137-2
PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar
13. Бибби К., Фишер Р., Кассон Л., де Карвалью Н., Хаас С., Мюнстер В. Дезинфекция вируса Эбола в стерилизованных городских сточных водах. PLoS Negl Trop Dis . (2017) 11:e0005299. doi: 10.1371/journal.pntd.0005299
PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar
14. Salata C, Calistri A, Alvisi G, Celestino M, Parolin Palù G. Запись вируса Эбола: от молекулярной характеристики до открытия лекарства. Вирусы . (2019) 11:274. doi: 10.3390/v11030274
PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar
15. Правительство Канады. Паспорта безопасности патогенов: инфекционные вещества — вирус везикулярного стоматита (VSV) . (2019) Доступно в Интернете по адресу: https://www.canada.ca/en/public-health/services/laboratory-biosafety-biosecurity/pathogen-safety-data-sheets-risk-assessment/vesicular-stomatitis-virus.html. (по состоянию на 9 мая 2020 г.).
16. Лоусон Н., Стиллман Э., Уитт М., Роуз Дж. Рекомбинантные вирусы везикулярного стоматита из ДНК. Proc Natl Acad Sci USA . (1995) 92:4477–81. doi: 10.1073/pnas.92.10.4477
PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar
17. Dalton K, Rose J. Гликопротеин вируса везикулярного стоматита, содержащий весь зеленый флуоресцентный белок в его цитоплазматическом домене, эффективно включается в вирусные частицы. Вирусология . (2001) 279:414–21. doi: 10.1006/viro.2000.0736
PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar
18. Американская коллекция типовых культур (ATCC). Vero C1008 [Vero E6, клон 76, Vero E6] ATCC® CRL-1586™ (2000). Доступно в Интернете по адресу: https://www. atcc.org/Products/All/CRL-1586.aspx#characteristics (по состоянию на 9 мая 2020 г.).
19. Рид Л., Мюнх Х. Простой метод оценки пятидесятипроцентных конечных точек. Am J Гигиена . (1938) 27:493–7. дои: 10.1093/oxfordjournals.aje.a118408
PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar
20. Саттар С., Ансари С. Протокол подушечек пальцев для оценки гигиенических антисептиков для рук против вирусов. J Вирол Мет . (2002) 103:171–81. doi: 10.1016/S0166-0934(02)00025-3
PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar
21. ASTM International. АСТМ Е1052-11. Стандартный метод испытаний для оценки активности микробицидов против вирусов в суспензии . (2011) Доступно в Интернете по адресу: https://www.astm.org/Standards/E1052.htm (по состоянию на 9 мая 2020 г.).
PubMed Abstract
22. Franz D, Jahrling P, Friedlander A, McClain D, Hoover D, Byrne W, et al. Клиническое распознавание и ведение пациентов, подвергшихся воздействию боевых биологических агентов. J Am Med Assoc . (1997) 278:399–411.
Реферат PubMed | Google Scholar
23. Международная конференция по гармонизации. Тема ICH Q5A(R1). Оценка вирусной безопасности продуктов биотехнологии, полученных из клеточных линий человека или животных (1999). Доступно в Интернете по адресу: https://www.ema.europa.eu/en/ich-q5a-r1-quality-biotechnological-products-viral-safety-evaluation-biotechnology-products-derived (по состоянию на 9 мая 2020 г.).
24. Саттар С. «Безхимическая» очистка – необходимо более внимательное изучение. Хосп Эпидемиол инфекционного контроля . (2019) 40:1326–7. doi: 10.1017/ice.2019.239
PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar
Что владельцы скота должны знать о везикулярном стоматите
Поскольку это не является обычным явлением в большинстве районов каждый год, сообщения о везикулярном стоматите (ВС) в средствах массовой информации часто вызывают вопросы у владельцев скота. Вот ответы на некоторые из наиболее распространенных вопросов, которые могут появиться:
Фон
Что VS делает с животными?
Основным признаком ВС у больных животных является образование волдырей (везикул) во рту, на языке, в месте соединения рта с губами, а иногда и на сосках взрослых самок. Волдыри также могут появляться на стыке копыт и кожи (венечная полоса), вызывая хромоту.
Однако к тому времени, когда у пораженных животных проявляются признаки заболевания и их исследуют, волдыри почти всегда вскрываются, оставляя после себя сырые язвы (эрозии и язвы) во рту («стоматит»), на языке и других пораженных участках. части тела. Эти язвы временно делают прием пищи и питье очень болезненным и трудным.
В данном зараженном стаде ВС обычно поражает относительно небольшой процент животных (10-20%).
Какие животные могут получить VS?
ВС чаще всего наблюдается у лошадей. Крупный рогатый скот и свиньи также могут быть поражены; его очень редко можно увидеть у овец, коз и лам.
Как животные заражаются ВС?
Это заболевание вызывается вирусом, который чаще всего передается через укусы насекомых. Мелкие мошки или мошки — это насекомые, внутри которых вирус может выживать и хорошо размножаться, поэтому они являются наиболее распространенными виновниками.
Как только животные заболевают, они становятся очень важными источниками вируса для других. Вирус преобладает во рту и других пораженных частях тела: животные могут заразиться ВС при прямом контакте с инфицированным животным или при непрямом контакте с кормом, водой, вещами или другими предметами, которые были заражены зараженным животным.
Могут ли люди заразиться ВС?
Интересно, да. У людей ВС, как правило, вызывает заболевание, которое имеет тенденцию имитировать грипп (головная боль, лихорадка, мышечные боли, которые проходят через несколько дней), а не волдыри, которые он вызывает у животных. Обычно это поражает только тех людей, которые находятся в очень тесном контакте с микробом (т. Е. Люди, работающие в тесном контакте с больными животными).
Где и когда обычно возникает ВС в США? Это распространено в Южной Дакоте?
Вспышки ВС происходят не каждый год, но когда они случаются, то обычно на западе США (например, в Техасе, Нью-Мексико, Колорадо) и – из-за роли насекомых в его распространении – в летние месяцы. . Болезнь вообще не распространена в Южной Дакоте, хотя в 2015 году было поражено большое количество ферм в западной части Южной Дакоты. В том году особенно крупная вспышка ВС затронула 8 штатов, из которых Южная Дакота находилась на северо-восточной окраине.
Почему VS вызывает такое беспокойство у ветеринаров штата и федерального уровня?
Любое заболевание, вызывающее волдыри во рту скота, является тревожным сигналом для ветеринаров, которые работают над защитой наших животных от чужеродных болезней животных. Наиболее опасным из них является ящур (ящур) — заболевание настолько заразное, что может опустошить животноводческую отрасль США. Волдыри во рту, вызванные ВС, визуально нельзя отличить от волдырей, вызванных ящуром, поэтому ветеринарам штата и федеральным властям требуется время, чтобы убедиться, что это действительно ВС, а не что-то другое, – берут образцы для подтверждения, как только эти признаки отмечаются у животного.
Одна большая подсказка относительно диагноза, однако, заключается в том, что лошади не страдают от ящура. Тем не менее, государственные и федеральные ветеринары работают над карантином животных, пораженных ВС, чтобы ограничить распространение болезни.
Лечение и контроль
Как лечить животных, пораженных ВС?
Поскольку это вирус, для него не существует специального лечения. Хороший уход, в том числе предоставление мягких кормов, лечение язв и наблюдение за вторичными бактериальными инфекциями (с соответствующим применением антибиотиков), может помочь выздоровлению. К счастью, ВС является самоограничивающимся заболеванием, от которого большинство животных полностью выздоравливают в течение 1-2 недель.
Как я могу защитить своих лошадей и крупный рогатый скот от ВС? Есть ли вакцина?
К сожалению, вакцины против ВС не существует. Содержание животных, особенно лошадей, для минимизации контакта с кусающими мухами может помочь в профилактике. Это может включать выгон животных с пастбищ в периоды пиковой активности насекомых, выпас скота вдали от источников воды и надлежащее использование инсектицидов.