Флюс как избавиться от опухоли: Опухла щека, флюс, что делать

Разное

Содержание

Как снять отек после удаления зуба

Удаление зуба считается серьезным хирургическим вмешательством. Это полноценная операция с использованием инструментов и травмирующая мягкие ткани. После подобной процедуры, по окончании действия обезболивающих препаратов, появляется боль и отек. Чем сложнее было удаление, тем сильнее будет отек.

Каждый стоматолог, объясняет своему пациенту, как снять отек после удаления зуба, что можно делать, а чего нельзя.

Первая помощь заключается в прикладывании к месту удаления зуба (лунке) смоченного в перекиси водорода марлевого тампона. Снять отек помогают отвары трав: аптечной ромашки и шалфея. Подобные процедуры окажут антисептическое и противовоспалительное воздействие.

Снять отек и понизить болевые симптомы поможет известное, и, наверное, самое эффективное домашнее средство состоящее из стакана кипяченой воды, трех капель раствора йода и чистой (без примеси) столовой соли.

Что касаемо зуба мудрости, то любой из них, труднодоступен, имеет искривленные корни и при прорезывании, очень часто вызывают сильные боли. Зубы мудрости вызывают много проблем, поэтому их рекомендуют удалять.

Следует отметить и то, что по причине запутанной системы корней удаление зуба мудрости сильно повреждает десна. Это не должно вызывать страх, так как опытный стоматолог выбирает оптимальный вариант, позволяющий быстро снять отек после удаления зуба мудрости.

Чтобы снять отечность, независимо от того, какой зуб был удален, необходимо выполнять некоторые правила:

Первые два-три часа отказаться от пищи и воды.
Первые сутки нельзя есть горячую пищу и проводить полоскание полости рта.
Самое главное не только знать, как снять отек после удаления зуба, но и то, что к больному месту запрещено прикладывать тепло.
При приеме пищи, чтобы не спровоцировать образование зуба пищу необходимо пережевывать на другой стороне.
После удаления зуба, до полного заживления лунки, необходимо отказаться от алкогольных напитков.
Нельзя трогать потревоженное место языком.
Необходимо выполнять рекомендации врача-стоматолога.

Если следовать всем этим простым рекомендациям, то можно будет быстро избавиться от отека. До полного заживления потревоженной десны, рекомендуется полоскать полость рта приготовленным в домашних условиях солевым раствором или прописанным аптечным препаратом.

Как согнать флюс в домашних условиях

Флюс (периостит) – является крайне неприятным воспалением полости рта и одним из наиболее распространенных стоматологических заболеваний.

Причинами появления флюса могут служить разнообразные факторы: кариозный зуб, любая инфекция, механическая травма десны или же воспалительный процесс между десной и зубом. Опухшая щека и десны по различным причинам приносят постоянный дискомфорт и боль.

Иногда флюс протекает с высокой температурой и слабостью, и без своевременного лечения может привести к серьезным осложнениям.

Если обратиться к стоматологу нет возможности или времени, лечить флюс можно в домашних условиях, чтобы избавиться от опухоли и снять температуру.

Такая помощь временная, но ее полезно применять. Это не является поводом для отмены дальнейшего визита к врачу. Применение рецептов народной медицины помогает убрать отечность, снять болезненные ощущения и избавиться от воспаления.

Что использовать в первую очередь

Многие народные средства от флюса существуют десятки и даже сотни лет, что говорит об их эффективности. Они обоснованы с медицинской точки зрения, и допустимы для использования в быту:

Начинать надо с прохладного компресса, который необходимо прикладывать к щеке, где появился отек. Он несколько уменьшает боль.
Быстро избавиться от флюса поможет смесь соли с содой. Это наиболее легкий метод борьбы. Сода смягчает воспаленную десну, а соль снимает отек и обезболивает.
Развести в 1 стакане чуть теплой водички по 1 ч. ложке соли и соды. Добавить 5 капель йода и все хорошо перемешать. Ежечасно тщательно прополаскивать рот теплым раствором, пытаясь по возможности длительнее удерживать его у больной зоны.
Противовоспалительный эффект имеют и примочки из соли и соды. На вату нанести небольшое количество, намочить в теплой воде и приложить к воспаленному месту.
Скорую помощь при лечении оказывают компрессы из соды. Придать вате форму круга и насыпать 1 ч. ложечку пищевой соды. Свернуть вату так, чтобы сода очутилась внутри. Опустить в теплую воду и положить за щеку, на место периостита. Если держать ватку не меньше трех часов, на следующий день флюс пройдет.

Отвары из трав и сборов

Отвары устраняют болезненность и отечность, снимают воспаление, успокаивают зуб, имеют противомикробные и дезодорирующие особенности. Полоскания полости рта дают прекрасный антивоспалительный результат и помогают скорейшему лечению зубного флюса.

Такие травы, как шалфей, мелисса лекарственная и травяные сборы на их основе прекрасно оказывают оздоравливающее действие.

Травы положительно воздействуют на болезнетворные микроорганизмы и укрепляют иммунитет. Для борьбы с флюсом чаще остальных используются такие рецепты:

К 2 ст. ложкам подсушенного шалфея добавить 0,5 л кипятка. Отвар настаивать на водяной бане 50 минут, остудить до комнатной температуры. Прополоскать полость рта 2-3 раза на протяжении часа.
По 2 ст. ложки шалфея и коры дуба перемешать тщательно с 3 ст. ложками зверобоя. Полученный сбор заварить 1 л кипятка. Прикрыть крышкой емкость и оставить на 30 минут настаиваться. Узвар отфильтровать и полоскать рот 6-7 раз в день. Все процессы полоскания полости рта проводят исключительно горячим раствором.
В небольшой емкости перемешать в равных пропорциях (например, по 1 ст. ложке) шалфея, синеголовника и горичника. Заварить 1,5 стаканами очень горячей воды или водки. Плотно закрыть емкость и убрать настаиваться в темное место на 2 часа. Полоскание делать по несколько раз в сутки. Также рекомендуется смачивать в настое вату и прикладывать к больному зубу.
К 0,5 стакану мелиссы прилить 1 л кипятка. Накрыть плотно крышкой и теплым полотенцем на 1 час. Процедуру полоскания рта проводить каждые 2 часа.
В равном количестве смешать мелиссу, кору дуба и шалфей. Покрыть кипятком. После остывания раствора прополоскать рот в течение дня до 10 раз.
Смешать 100 г мяты, по 50 г дудника, березовых почек и барвинка. Влить в емкость 1 л горячей воды. 50 минут настаивать и полоскать до 8 раз в день.
2 ст. ложки травки иссопа настоять в одной чашке кипятка 2 часа. Тщательно процедить и остудить. Добавить 10 капель уксуса и полоскать всю полость рта.

Смешать в емкости зеленый чай с шалфеем. Добавить стакан кипятка и настоять. Настой отфильтровать и добавить 0,5 ч. ложки соли. Все размешать. В течение дня как можно чаще полоскать рот горячим раствором.
Заварить 2 ст. ложки дубовой коры 0,5 л кипятка и отложить настаиваться 30 минут. Делая полоскания каждые 1,5-2 часа, можно снять боль.

Рецепты настоек

При лечении также массово применяются всевозможные настойки на спирту. Приобрести их можно не только в аптеках, но и сделать собственноручно.

90 г прополиса измельчить и влить 1/2 л водки. Полученную смесь 2 недели выдерживать в темном месте, периодически взбалтывая. Настойку процедить и хранить в темной посуде в прохладно месте. Ватный шарик пропитать настойкой и на ночь положить между десной и щекой.

Это позволяет снять опухоль во рту, вызванную флюсом, за один день, боль постепенно пройдет. Боль также уменьшится, если прополис просто жевать в течение дня.

Использование мазей

Часто при лечении флюса применяются лично изготовленные мази, которые помогут уменьшить боль и снять воспаление. Их применение имеет такие положительные стороны, как безопасность, лечебная эффективность, доступность, многостороннее воздействие на организм.

Измельчить сушеные цветы календулы. Смешать с несоленым сливочным маслом в пропорции 1:5. Нанести на ватный шарик и приложить на больное место на всю ночь.
50 гмасла растительного вскипятить на тихом огне. Примешать к нему 20 г прополиса. Подождать, пока вся масса не приобретет однородную консистенцию. Поставить емкость в прохладное место на 3 часа (например, в холодильник). Полученную мазь наносить на место воспаления два раза в день.

Мази на основе меда очень легко и просто приготовить дома. В емкость поместить по 50 г масла льняного и оливкового. Добавить 50 г воска пчелиного и 1 ст. ложку меда. Полученную массу довести до полного расплавления воска, нагревая на водяной бане. Снять смесь с огня. Добавить в нее мед и оставить остывать. Нанести готовую мазь на ватный диск и приложить к флюсу. Оставить на 1,5-2 часа.

При сильной пульсирующей боли необходимо пропитать ватный диск в соке репчатого лука и приложить к больному месту. Лук, являющийся природным антибиотиком, в короткий срок уберет неблагоприятную микрофлору и избавит от воспаления и боли.

Самый невероятный метод лечения – прикладывание чеснока к запястью руки. Способ проверен веками, эффективен, хотя и необъясним. Из чеснока готовят кашицу и распределяют по марлевой повязке. Прикладывают к запястью так, чтобы сам чеснок не контактировал с кожей. Главное, приложить к руке, которая противоположна больной десне.

Итак, имеются много возможностей и довольно простых способов избавиться от флюса, с помощью народной медицины. Однако это заболевание весьма серьезно и в дальнейшем во избежание осложнений необходимо обратиться к дантисту.

Отек после имплантации зубов — сколько держится и как снять отек щеки и лица?

Несмотря на то, что процедура имплантации, выполненная квалифицированным врачом стоматологом-имплантологом с использованием современных материалов — безопасна, могут иметь место незначительные или выраженные побочные явления.

Важно понимать, в каком случае необходимо обратиться к врачу, а каком отек является вариантом нормы.

Когда отек — вариант нормы?

Отек появляется через 2–3 часа после операции, это — естественная реакция иммунитета на оперативное вмешательство. Как правило, он сопровождается умеренно выраженной болью — в это время анестезия перестает действовать. Обычно боль быстро купируется обезболивающим препаратом назначенным лечащим врачом-хирургом (кетанов, нурофен, аркоксия).

Если операция прошла успешно и воспаление тканей отсутствует, отечность может сохраняться до 10 дней. Как долго отек после имплантации зубов сохраняется в каждом конкретном случае — зависит от индивидуальных особенностей организма, выполнения или невыполнения рекомендаций в восстановительный период.

Важнейшим критерием является динамика уменьшения отека — ее оценка позволит сделать выводы о наличии или отсутствии воспалительных процессов. Нормой считается максимальное увеличение отечности на 3 день, после чего отек начинает спадать.

Когда стоит обратиться к врачу?

Основными признаками осложнений являются:

охранение сильного отека более 10 суток после имплантации зубов;
боль — острого или пульсирующего характера в области отека;
сохранение температуры тела более 37 С дольше трех суток;
кровянистые и гнойные выделения в области установки импланта;
гематома, синюшный оттенок отекших тканей.

Врач оценит состояние мягких тканей, проведет диагностику и выяснит, имеет ли место осложнение после имплантации. Опасаться визита не стоит — от того, насколько оперативно будут приняты меры, зависит здоровье пациента и возможность сохранения импланта.

симптомом какого заболевания является, почему возникает отечность

Причинами отека двух или одного глаза могут быть физиологические процессы в организме: слезы, большое количество жидкости выпитой на ночь, прием алкоголя, слишком соленая еда, недосыпание, стресс. Продолжительные и частые опухания указывают на проблемы со здоровьем.Отек – это скопление жидкости на определенном участке тела. С этой проблемой чаще всего сталкиваются люди с 35 летнего возраста.

Отек – это скопление жидкости на определенном участке тела. С этой проблемой чаще всего сталкиваются люди с 35 летнего возраста.

Причины отечности под одним глазом

Причины отека под одним глазом разнообразны. Это состояниевызывают аллергические реакции организма, нарушение работы внутренних органов,травмы головы и лица, инфекционные заболевания, стоматологические проблемы.

Почки

Когда отекает правый или левый глаз, это говорит о почечнойнедостаточности и других заболеваниях почек. Особенно характерным симптомомявляется частое возникновение отека. Они проявляются каждый день, к вечерупостепенно пропадают. В организме задерживается жидкость, почки плохо работаюти не способны выводить ее в нужно объеме.

Аллергия

Защитная реакция организма при контакте с чужероднымаллергеном, сопровождается аллергическими отеками, которые поражаютодну из частей тела. Аллергия сопровождается покраснением и зудом. Отек сходитсамостоятельно за 2-3 дня, а при медикаментозном лечении еще быстрее. Такаяаллергия проявляется время от времени, при контакте с аллергеном.

Такое состояние провоцируют:

косметические средства;
укусы насекомых;
пыльца растений;
химические вещества;
шерсть животных;
пищевые продукты.

Травмы

Отек при травме возникает при нарушении целостности кожныхпокровов и повреждении слизистой оболочки. Происходит в результате полученияудара в глаз, неудачном падении, повреждении инородными телами и предметами, укусах мошек. В таких случаях отекспадает самостоятельно за 7-10 дней.

Также такое состояние проявляется при травме лобной частиголовы. Наблюдается головокружение, боль, тошнота.

При ожогах роговицы и лица ткани отекают, краснеют.Сопровождается чувством жжения и боли.

Инфекции и заболевания

Отек одного или двух глаз вызывают инфекции и болезни глаз ивек:

Ячмень. Воспаление ресничной луковицы. В местепораженного века образуется гнойник, который нарывает, болит и чешется,отекает. Возникает после попадание инфекции, чаще всего бактерий стафилококков.После прорыва гнойного образования состояние улучшается.

Конъюнктивит. Воспаление слизистой оболочкиглаза. Возникает при попадании инфекции. Инфицируется один или два глазаодновременно. Выделяется большое количество гноя, склера краснеет,сопровождается зудом, воспалительным отеком век. Может быть симптомомпростудного заболевания. Самая частая причина отека одного глаза.

Блефарит. Воспаление ресничных краев век.Заболевание вызывает неправильная гигиена глаз и их чрезмерное напряжение.Сопровождается жжением, зудом, отеком покраснением. Эта причина поражаетверхнее или нижнее веко.

Инфекция слезного канала. В канал проникаетинфекция, развивается зуд, покраснение, выделение гноя, повышенноеслезотечение, отек тканей.

Кератит. Воспаление роговицы. Сопровождаетсяпокраснением склеры, отеком, зудом. Особенностью болезни является тонкая пленкана роговице, которая нарушает зрение.

Синдром сухого глаза. Снижает или полностьюпрекращает выделение естественной слезы. Возникает покраснение, жжение, колющаяболь, раздражение слизистой оболочки, отек.

Сон на левом боку

При сне на левом боку передавливаются внутренние сосуды иартерии, нарушается кровообращение. Кровь застаивается отекает левый или правыйглаз после сна. Возникают отеки в утренние часы, рассасываются занесколько часов.

Сердце

При заболевании сердечно-сосудистой является причиной отекалевого или правого глаза, проявляет себя в вечернее время суток. Сердцемедленнее работает, не справляется с венозным оттоком, нарушатся перекачкакрови. Кровь застаивается и образуются отеки на лице.

Внутренние органы

Если опух один или два глаза, это сигнализирует о нарушениизаболеваниях внутренних органов. К ним относятся:

Нарушение работы печени. Происходит нарушение ворганизме циркуляции жидкости, она скапливается в области брюшины,увеличивается живот. Постепенно отеки образуются в области лица.
Межпозвоночная грыжа шейного отдела. Наначальной стадии этого заболевания проявляются отеки в области глаз. Далееразвивается скованность движения головы и постоянные боли.
Заболевание органов дыхательной системы. Припоявлении воспалительных процессов в легких и носовой полости возникает отектолько одного глаза, который ближе расположен к очагу воспаления.

Нарушение гипофиза

При нарушении работы гипофиза сбивается выработка гормонов. Они стимулируют повышенной накапливание жидкости в организме, образуется отек в области лица. Отек проявляется в утренние часы, к вечеру постепенно спадает.

Стоматологические заболевания

Почему отекает левый или правый глаз при стоматологическихзаболеваниях? Обширные воспалительные процессы ротовой полости такие как:гингивит, флюс, воспаление корня зуба, гнойная киста, становятся причинамиотека левого или правого глаза. Гнойный процесс затрагивает большое количествотканей. Сопровождается сдавливанием тканей, болезненностью, бессонницей,затруднением жевания.

Диагностика

Для выяснения точной причины появления данного симптома наодном или двух глазах, следует проконсультироваться у специалиста. Только такимобразом можно устранить отек. Врач назначит грамотное лечение.

Если отеки появляются регулярно, необходимо посетить врача –терапевта. Он соберет подробный анамнез и выдаст направление к более узкомуспециалисту. В зависимости от предполагаемой причины перенаправляют к:

урологу;
нефрологу;
офтальмологу;
эндокринологу;
аллергологу;
кардиологу;
пульмонологу.

Для постановки более точного диагноза необходимо сдатьанализы крови и пройти несколько диагностических процедур.

Назначают следующие анализы:

общий анализ крови;
общий анализ мочи;
анализ на исследование половых гормонов игормонов щитовидной железы;
биохимическое исследование крови;
анализ на определение аллергических антител.

К дополнительным исследованиям относятся:

электрокардиограмма;
УЗИ сердца и органов брюшной полости;
рентген легких;
проверка зрения при помощи таблицы длядиагностики;
компьютерная томограмма;
магнитно-резонансная томография;
Холлтер-исследование.

Что делать для лечения

Что делать для лечения отека одного или двух глаз? Послепроведения обследования и выявления причины врач назначает лечение для отекаглаз и воспаленного века. Терапию проводят медикаментами и народнымисредствами.

Медикаменты

Для лечения отеков глаз назначают следующие средства:

Диуретики – Фуросемид, Ионик, Уродерм,Нитроксолин. Выводят лишнюю жидкость из организма и препятствуют накапливаниюсолей.
Глазные капли – Альбуцид, Визин, Тобрекс,Левомицетин. Снимают воспаление слизистой оболочки и отек.
Противоаллергические препараты – Супрастин,Фенкарол, Лоратадин, Фенистил, Зодак. Борются с аллергическим отеком век.
Мази – Гепариновая, Нигепан. Снимают воспаление,обладают противоотечным действием.

Эти медикаменты используются для снятия отека. В зависимости от причины возникновения проблемы назначают более специфическое лечение.

Снятие отеков в домашних условиях

Для снятия отеков в домашних условиях используют народные способы. Они используютсясовместно с основным лечение или для временного устранения проблемы. Еслипричина отека несерьезная и не несет опасности для здоровья, то такие способыполностью избавляют от проблемы.

Эффективные рецепты:

Клюквенный морс из свежих ягод. Ягоды измельчаюти выдавливают сок при помощи марли. Заливают его кипятком и пьют 2-3 раза вдень.
Почечный травяной сбор. Он свободно продается ваптеках. Его заваривают и принимают по инструкции, указанной на упаковке.
Отвар из плодов шиповника. Измельченные плодызаливают кипятком, настаивают 2-3 часа. Принимают по 100 мл дважды в день.
Сок сельдерея. Из свежих овощей выдавливают 1ч.л. сока и принимают 3 раза в сутки.
Настой из семян петрушки. Семена заливаютгорячей водой и настаивают 8-10 часов. Принимают по 1 ст.л. 6 раз в день.

Для более быстрого эффекта делают компрессы для глаз. Втечение 20-30 минут проблема исчезает, но не решает причину возникновения. Кним относятся:

Компресс из зеленого чая. Ватные диски,смоченные чаем прикладывают к месту отека.
Компресс из холодного свежего молока. Кусочкиткани смачивают в молоке и прикладывают к проблемным местам.
Свежий огурец нарезают толстыми ломтиками иприкладывают на места отеков.
Кусочками льда нужно протирать областьопухлости.

Профилактика отеков

Для профилактики возникновения проблемы отека необходимо проходить регулярное медицинское обследование, следить за питанием, ограничить употребление соли, следить за питьевым режимом.

Важно использовать проверенную косметическую продукцию и не давать ей пользоваться другим людям. Для предотвращения проникновения инфекции, нужно часто мыть руки с мылом, чтобы не занести микробов, а также не оставлять косметику на лице на ночь.

Отекает один глаз, причины опухания и отека одного глаза Ссылка на основную публикацию

Отекает лицо и глаза: причины, симптомы, возможные заболевания, устранение проблемы и советы врачей

20 Октября, 2018
Другие состояния
Натали М

Если отекает лицо и глаза, то причиной этого могут быть как безобидные факторы, например, физиология или неправильное питание, так и более серьезные недуги, которые развиваются в организме. Довольно часто склонность к отечности имеют те пациенты, у которых зона вокруг глаз имеет густо разветвленную сосудистую сетку, небольшое количество эластина и коллагена в кожном покрове и полное отсутствие подкожных жировых клеток.

Причины

Давайте более подробно познакомимся с тем, по каким конкретно причинам отекает лицо и глаза.

Спровоцировать появление отечности могут болезни внутренних органов, аллергическая реакция, ослабленная иммунная система, погрешность в рационе, беременность, а также длительное пребывание на солнце.

Чаще всего, если отекает лицо и глаза, причиной этого является усталость, стресс и недостаток сна.

Проблемы с почками

Довольно часто отечность лица и глаз наблюдается по причине неправильной работы почек, в частности, почечной недостаточности.

При заболеваниях этого органа, помимо отечности, наблюдается уменьшение суточной нормы количества мочи. Параллельно с этим жидкость становится темного цвета, а у пациента появляется гипертония, дизурия.

В качестве препаратов для терапии почечных заболеваний используются следующие медикаментозные средства:

‘Спазган’, ‘Беспа’, ‘Но-Шпа’. Эти препараты оказывают спазмолитическое воздействие.
‘Фитолизин’, ‘Канефрон’. Это уроантисептические препараты.
‘Фуросемид’, ‘Гипотиазид’. Эти медикаменты оказывают мочегонный эффект.
‘Азатиоприн’, ‘Циклофосфамид’. Лекарство воздействует как цветостатики.

Если отекает лицо и глаза, и причиной этого стали почечные недуги, то следует обратить внимание на то, что в данном случае от таких отеков будет избавиться сложнее всего, ведь они довольно плохо поддаются терапии. Все медикаменты должен назначать только лечащий врач после полного обследования, а самолечение заболеваний почек может привести к различному роду осложнениям.

Сахарный диабет

Продолжаем рассматривать причины отека лица и глаз по утрам и вечерам. Отечность при сахарном диабете является осложнением данного недуга. Она связана с патологиями работы почек и зависит от уровня сердечной недостаточности. При этом стоит обратить внимание на то, что отечность может сосредотачиваться не только на лице, но и по всему телу.

Несимметричность отеков будет свидетельствовать о диабетической микроангиопатии.

Чтобы избавиться от такого неприятного симптома, необходимо заниматься лечебной физкультурой, придерживаться рациона с низким содержанием углеводных продуктов, а также принимать медицинские препараты: ‘Каптоприл’ для снижения кровяного давления и предупреждения развития патологии почек, ‘Валсартан’, а также мочегонные средства, например, ‘Верошпирон’ или ‘Фуросемид’.

Если в человеческом организме наблюдается гормональный дисбаланс, то необходимо использовать специальные биологически активные добавки, которые нормализуют гормональный фон. Комплексы минералов и витаминов, которые разработаны специально для людей, страдающих диабетом, оказывают поддерживающие общеукрепляющее действие на организм.

Синусит

Каковы же еще причины отека лица и глаз по утрам и вечерам? Инфекции, которые сосредоточены в придаточных пазухах носа, могут стать причиной отечности в области лица и глаз. Дело в том, что воспаленная перегородка носа становится причиной закупорки носовых пазух, из-за чего секрет не может проходить к носу от пазух и надавливает на зону около глаз.

Для синусита характерна заложенность носа, головные боли, дискомфорт и затрудненное дыхание. Инфекция придаточных пазух часто вызывается вирусами, бактериями, грибками, а также она может выступать в качестве реакции на аллерген.

Чтобы избавиться от отечности по причине синусита, используются лекарственные средства, например, ‘Амоксициллин’ или ‘Цефуроксим’.

Параллельно с этим специалисты рекомендуют принимать достаточное количество витамина C, так как он укрепляет иммунную систему.

Устранить и ослабить симптомы заболевания можно обильным питьем теплой жидкости, например, настойкой, приготовленной на основе шиповника и меда.

Заболевания печени

Говоря о том, почему отекает лицо и глаза, стоит знать, что причиной данного симптома могут быть заболевания печени. Отечность появляется на руках. Если причина сильного отека лица и глаз кроется в этих недугах, то могут появиться и следующие симптомы:

Горечь во рту.
Болезненные ощущения справа под ребрами.
Тошнота, изжога, отрыжка.
Темная моча и светлый кал.
Желтый оттенок белков глаз.

Печень является тем органом, который может регенерироваться, поэтому возникшая патология в работе органа может никак не проявлять себя на протяжении длительного времени. Если причина отека лица под глазами кроется в заболевании печени, то для лечения могут назначаться следующие препараты:

‘Гипофизит’, ‘Фламин’ и ‘Олиметин’, которые оказывают желчегонное действие.
‘Карсил’, ‘Ливолин’, ‘Эссенциале форте’, ‘Хофитол’ — для защиты клеток органа от различного рода повреждений.

Сердечно-сосудистые недуги

Продолжаем рассматривать причины, почему отекает лицо и глаза.

Некоторые болезни сердца могут проявлять себя в виде отечности в зоне глаз, параллельно с этим опухают ноги в зоне лодыжек и голени, особенно в тех случаях, если больному пришлось длительное время стоять.

Во время обследования брюшины диагностируется скопление жидкости. Однако отеки на лице по утрам при заболеваниях сердца и сосудов могут сопровождаться и другими симптомами, например:

Болезненность в сердце.
Общая слабость.
Увеличенная частота сокращений сердечной мышцы.
Мелкая сосудистая сеточка на кожном покрове лица.
Нарушение частоты и глубины дыхания, при котором человек ощущает нехватку воздуха.

Болезни сосудов сопровождаются бледностью кожного покрова, его синеватым оттенком, а также отечностью под глазами. При этом нарушенный отток венозной крови способен сделать отечности односторонними.

Если причина отека лица и глаз кроется в этих недугах, то параллельно может наблюдаться головокружение, резкий перепад артериального давления. Часто также у пациентов наблюдаются холодные конечности.

Лечение отека лица и глаз, причина которого заключается в заболеваниях сосудов и сердца, подразумевает компетентный подход и контролирование состояния пациента.

Препараты будут назначаться в зависимости от конкретного вида патологии: в качестве мочегонных средств используются ‘Бекворин’ или ‘Гипотиазид’, в качестве гипотензивных лечебных препаратов назначается ‘Эналаприл’ или ‘Рамиприл’, в роли сердечных гликозидов специалисты прописывают ‘Строфантин К’.

Обратите внимание на то, что часто отекает лицо и глаза при инсульте. Причина отечности в данном случае является весьма распространенной. А теперь давайте более подробно ознакомимся с тем, что еще, помимо заболеваний, может спровоцировать этот симптом.

Диета

Копченые и соленые блюда, пряности, которые употребляются в избытке, могут нарушить физиологический процесс в человеческом организме выведения жидкости, а также поспособствовать его накоплению в тканях. Причина отека на лице по утрам может заключаться в употреблении следующих продуктов питания:

Копчености, фастфуд, консервы.
Маринады.
Газированные сладкие напитки.
Различные соусы, яйца, сливки, кетчуп и майонез.
Пища, в составе которой присутствует большое количество консервантов.
Сосиски колбаса, так как в них содержится большое количество соли.
Кондитерские изделия и сладости, так как они провоцируют скачок инсулина, способствуя набору лишних килограммов, а сахар и мед способствует задержке жидкости в теле.

Но что же делать, если причиной отека лица и глаз по утрам стало употребление этих продуктов питания? Избавиться от избытка жидкости в организме можно другими продуктами, например:

Сладкий перец, арбуз, тыква, калина, кабачки, огурцы, клубника, так как они оказывают несильное мочегонное воздействие.
Клетчатка улучшает пищеварение, очищает кишечник и способствует нормализации полезной микрофлоры. Для этого в рацион необходимо включить гречку, чернику, бруснику, овес, отруби, авокадо. Норма употребления клетчатки является 30 г в сутки для взрослого человека.
Цитрусовые, абрикосы, свекла, бананы, дыня, так как в их составе содержится большое количество калия, который способствует нормализации калиево-натриевого баланса в человеческом организме, а также устранению отечности.
Зеленые листья салата, белокочанная свежая капуста, имбирь, морковь, спаржа улучшают метаболизм и выводят токсины из организма. В данную группу также следует включить помидоры.

Большое количество выпитой жидкости

Почему отекает лицо и глаза по утрам еще? Если перед сном выпить большое количество жидкости, например, компота, кофе или чая, то утром непременно на лице можно заметить отечность.

Это объясняется тем, что почки просто не в состоянии переработать чрезмерный объем жидкости, в результате чего она начинает распределяться по тканям. По этой причине употреблять напитки или воду разрешается не позднее чем за 2 часа перед сном.

Все что будет выпито позже, способно увеличить нагрузку на органы выделения.

Солнечный ожог

Воздействие прямых солнечных лучей солнца также способствует накоплению воды в человеческом организме. Это объясняется повышенной проницаемостью стенок сосудов и неправильной микроциркуляцией жидкости, которая сосредотачивается в капиллярах и лимфатических сосудах.

В результате всего этого жидкость проникает в пространство между клетками, формируя отечность. Чтобы избежать такого симптома, необходимо придерживаться нескольких простых правил:

Загорать рекомендуется до 11:00 утра, а также после 16:00 дня. При этом следует обратить внимание на то, что лежать лучше всего в тени, а не под прямыми лучами солнца.
Перед тем как выходить на пляж, в обязательном порядке кожный покров следует обработать специальным солнцезащитным кремом, а степень защиты средств должна соответствовать вашему типу кожи.
После купания кожу надо промокнуть полотенцем, так как капельки воды только лишь усиливают воздействие солнечных лучей, по причине чего на теле образуются ожоги.
В жару следует увеличить употребление жидкости по причине повышенного потоотделения организма.
Обязательно на пляже следует носить головной убор.
Противопоказано употреблять алкогольные напитки в жаркую пору.

Аллергическая реакция

В качестве аллергена часто выступает пыльца растений, косметические средства плохого качества, хлорированная вода, шерсть животных, некоторые продукты питания, пыль. К признакам аллергической реакции, помимо отечности, следует отнести:

Зуд и рези в области глаз, слезоточивость.
Покраснение и светобоязнь кожного покрова около глаз.
Насморк, чихание, заложенность носа.

Отек и сопутствующие симптомы аллергической реакции исчезнут, если человек прекратит контактировать с главным аллергеном. Также можно принимать антигистаминные препараты, например, ‘Супрастин’, ‘Лоратадин’, ‘Цетрин’. По необходимости назначается использование деконгестантов, например, ‘Визина’ или ‘Окуметила’.

Период беременности

Прогестерон является главным гормоном, который координирует беременность. Именно он способствует замедлению выведения из человеческого организма натрия, который способствует удержанию жидкости. Сначала опухает лицо, а затем и все тело.

Увеличивающееся количество околоплодных вод объясняется растущей потребностью в жидкости. Чтобы эффективно избавиться от этой напасти, необходимо выявить причину его появления. Прежде всего, для этого необходимо сдать анализы крови и мочи.

В некоторых случаях, чтобы устранить отечность, необходимо уменьшить количество соленой пищи в рационе, а также сократить интенсивность физических нагрузок, время нахождения под солнцем, полноценно отдыхать.

Борьба с отечностью

В целях устранения отечности лица можно использовать натуральные настои и отвары на основе календулы, петрушки, ромашки, сельдерея. Листья брусники и черники способствуют снижению уровня в крови глюкозы.

После пробуждения сразу необходимо выпить один стакан воды, куда добавляется несколько капель лимонного сока. Благодаря этому активизируется работа внутренних органов, а также проходит отечность.

В борьбе с этим симптомом можно сделать массаж. Движения начинаются со лба, легкими постукиваниями массируют кожный покров. На висках и около глаз постукивания подушечками пальцев в обязательном порядке должны быть легкими. После проведения такого массажа отек быстро спадает.

Довольно эффективным средством является картофель. Для этого следует отварить несколько корнеплодов, слить воду, остудить, размять картофель и сразу нанести его на зону отека примерно на 12 минут. Затем кашица смывается холодной водой.

Маски такие делаются один раз в день, а курс должен составлять около 10 процедур. Также можно использовать сырой картофель. Для этого два корнеплода натираются вместе с кожурой на терке, добавляется 20 г овсянки.

Готовая смесь наносится на лицо на зону отека толстым слоем, а сверху прикладывается ткань или марля. Такая маска должна находиться на лице 1,5-2 часа.

Советы докторов

Мы рассмотрели, по каким причинам отекает лицо и глаза. Специалисты говорят, что предотвратить скопление жидкости помогает правильный образ жизни. Необходимо ограничить употребление соленых, жирных, сладких, копченых блюд, а также алкогольных напитков.

Пищу необходимо недосолить, а также придется привыкнуть употреблять кофе и чай без сахара. В рационе должно присутствовать большое количество овощей, фруктов, а также тех продуктов, которые активизируют метаболизм. Параллельно с этим следует больше двигаться, заниматься спортом.

Довольно часто отечность является результатом застойных явлений в человеческом организме по причине малоподвижного образа жизни.

Неправильная работа почек, щитовидной железы, печени, сосудов, сердца проявляются в виде образования отеков. Поэтому стоит своевременно посещать докторов и начинать лечение заболеваний, которые спровоцировали этот симптом. В сутки необходимо употреблять около 2 литров жидкости.

Отеки глаз одутловатость лица причины какого заболевания

Аллергическая реакция

Что вызывает отечность глаз и темные круги под глазами? Припухлость вокруг глаз означает, что у вас чрезмерное накопление жидкости, называемое отечностью.

Поскольку кожа вокруг глаз является самой тонкой кожей в теле, отеки могут быть весьма заметными.

Можно выделить определенные причины появления отеков и синяков под глазами, которые не вредят человеческому здоровью. Если их устранить, можно избавиться от проблемы.

На это влияют такие причины:

Нехватка кислорода. Важно гулять достаточное количество времени на свежем воздухе, проветривать квартиру. Длительное нахождение в помещение негативно сказывается на общем здоровье, вызывает кислородное голодание. Медики советуют прогуливаться перед сном на улице.
Сон на левой стороне. Некоторые люди спят исключительно на одном боку. Это ведет к скапливанию жидкости в этой части лица. Позы во время сна нужно менять.
Патологии сердца. Если начала отекать левая сторона в области глаза рекомендуется отправиться к кардиологу. Возможно, присутствует патология сердца.
Проблемы с пищеварением. Они способны привести к отеканию одного глаза.
Конъюнктивит. В результате человек еще ощущает резь, у него повышается слезоточивость.
Травма, укус насекомого. Можно незначительно травмировать область глаза, но на утро столкнуться с сильным отеком. Также такое может случиться после укуса насекомого.

Нужно следить за своим здоровьем. Даже на первый взгляд безобидные симптомы могут свидетельствовать о серьезных патологиях.

Подобные симптомы появляются вследствие таких причин:

Чрезмерное употребление спиртных напитков. Часто появляется отек с покраснением у людей, которые регулярно посещают клубы, недосыпают и пьют много алкоголя.
Воздействие дыма на глаза.
Отравление. К подобным симптомам приводит длительная рвота.
Плач перед ночным отдыхом.
Коньюктивит. Это заболевание характеризуется воспалительным процессом в области глаз. Болезнь провоцирует отечность и покраснение. В данном случае нужно отправляться к врачу. Это заболевание лечит офтальмолог.

Столкнуться с отеком под глазом может каждый человек. От этого не застрахованы ни женщины, ни мужчины, для устранения проблемы может потребоваться даже лечение.

Важно обнаружить истинную причину появления дефекта. Если нет предположений, лучше обратиться за медицинской помощью.

Даже у самого здорового человека может наблюдаться отек лица.

Причиныего появления могут быть следующие:

недостаточное питание;
соблюдение неправильно подобранной диеты;
недосыпания;
хроническое переутомление.

Но следует помнить, что отек лица может сигнализировать и о серьезном разладе в организме. Так, в частности, причины отека лица могут свидетельствовать о нарушении работы внутренних органов – почек, печени, щитовидной железы, сердца или сосудов. Симптомы схожи с отеком Квинке.

Кроме того отек лица нередко провоцирует нехватка в организме определенных витаминов.

Вообще, причины отека лица множественны и разнообразны. Помимо вышеуказанных отечность может спровоцировать употребление алкоголя, воздействие высоких температур, гайморит, аллергические реакции и еще масса всевозможных факторов.

Аллергическая реакция может вызвать ангионевротический отек лица. Причины, провоцирующие такие отеки – всевозможные аллергены, контактирующие с человеком (продукты, лекарства, яд насекомых и другие).

Аллергические отеки лица, как правило, сопровождаются дополнительными симптомами, в частности, могут появляться:

сыпь и зуд;
затруднение дыхания;
в тяжелых случаях — потеря сознания.

Если отек сопровождается синюшностью, то вполне вероятно, что причина патологии имеет сосудистый характер. В таком случае, вероятная причина отека лица — тромбоз верхней полой вены.

Инфекции, локализующиеся в кариозных зубах, придаточных пазухах носа и миндалинах, способны привести к ухудшению оттока и застою лимфы в лимфоузлах нижней челюсти. Это приводит к одно- или двустороннему отеку лица, исчезающего вместе со стиханием воспалительного процесса.

Более редкие причины отеков лица — склеродермия, дерматомиозит, а также тромбоз кавернозного синуса, который, обычно, наблюдается после воспаления околоносовых пазух или других частей лица. Это заболевание характерно для людей с сахарным диабетом и со сниженным иммунитетом.

Оценивать отечность как симптом необходимо совместно с другими признаками заболевания. Имеется ли одышка, учащенное сердцебиение, тошнота и другие тревожные признаки? От того, насколько точно вы ответите на эти вопросы, зависит постановка правильного диагноза.

Рассмотрим наиболее вероятные проблемы, которые могут вызвать застой жидкости в тканях.

Аллергический отек

Такая неприятность знакома всем аллергикам. Особенно ярко аллергический отек проявляется себя в период цветения (в конце весны).

Признаки аллергического отека:

набухание губ и век;
розоватый оттенок кожи/Повышенная бледность кожного покрова;
зуд;
слезы и жжение в глазах;
мелкие прыщики.

Проявиться такой отек может от контакта с животным, с цветущим растением, из-за несоблюдения аллергиком определенной диеты и употребления запрещенного продукта.

Часто аллерген определяют по расположению отека.

Если припухла область губ – аллерген стоит искать среди продовольственных продуктов.
Также отек губ свидетельствует об аллергии на лекарственные препараты.
Если отекло какое-то одно место (щека, лоб, подбородок), это может являться реакцией на укусы насекомых.
Припухлость всего лица говорит об аллергии на шерсть животных.

Для того чтобы снять припухлость и убрать симптомы аллергии, необходимо немедленно устранить аллерген и принять антигистаминный препарат. Если эти меры не подействовали и отек продолжает держаться, нужно немедленно вызвать «скорую», так как есть вероятность, что это отек Квинке.

Неправильный образ жизни как причина отечности

Наверное, каждый хотя бы раз в жизни просыпался после бурной вечеринки с «мешками» под глазами и гудящей головой. Неудивительно, ведь большое потребление алкоголя в сочетании с далеко не полезной пищей ведет к задержке жидкости в организме.

То же самое можно сказать и о неправильном образе жизни, частом потреблении соли, жареных и копченых блюд. В группе риска находятся люди с избыточной массой тела.

Помните, что соль и углеводы как бы консервируют жидкость в вашем организме, не давая ей выводиться с мочой. Следовательно, вес тела повышается – появляется одышка, учащается сердцебиение – организму становится сложнее работать, жидкость не успевает покидать клетки тела и еще больше увеличивает вес.

Чтобы избавиться от таких отеков, необходимо исключить из рациона все жирное, соленое и копченое, воздержаться от частых приемов алкогольных напитков, отказаться от курения.

Если женщина во время беременности пьет много жидкости, существует риск появления отеков

Отечность во время беременности

Выше приведены самые распространенные причины опухлости лица. Любой из этих случаев требует внимания и лечения – нельзя пускать все на самотек. Кроме описанных выше существуют и другие причины отечности. Среди них:

опухлость лица после удаления зуба;
опухлость после удара;
жаркая погода;
реакция на прием лекарственных препаратов;
гормональная перестройка;
слабый иммунитет;
несоблюдение питьевого режима;
недосыпание и частые стрессовые ситуации;
инфекция;
переливание крови;
излишки соли в организме;
онкологические заболевания;
нехватка витамина В и микроэлементов;
начало месячных или менопаузы;
заболевания эндокринной системы;
болезнь печени;
проблемы с нервной системой;
повышенное давление.

Точную причину сможет назвать только врач. Перед консультацией не рекомендуется заниматься самолечением, это может усугубить ситуацию.

Несмотря на обилие косметики от мешков под глазами, не стоит надеяться вылечить отечность без определения ее истиной причины. Только врач сможет назначить грамотное лечение, которое будет состоять из внутренних и внешних лекарственных препаратов.

Время от времени отечности на веках могут появляться от употребления большого количества соли или жидкости перед сном. Такое явления нельзя назвать патологическим.

Отеки быстро сходят в течение нескольких часов после пробуждения. Большего внимания заслуживает пастозность, которая наблюдается практически постоянно.

Если имеется такая проблема, пациенту необходимо пройти полное обследование организма, исключить опасные заболевания.

В некоторых случаях пастозность может развиваться из-за генетической предрасположенности. У ряда пациентов отечность по утрам – это индивидуальная особенность организма. Специальная терапия не требуется.

Отеки после ночного сна могут развиваться по вполне обычным причинам, не связанным со здоровьем. У женщин одутловатость нередко проявляется в первые дни менструального кровотечения. После 30 лет у представителей обоих полов утренние отеки могут быть связаны со снижением уровня гиалуроновой кислоты в организме. В результате объем свободной воды в тканях постепенно увеличивается.

Причины отека лица можно разделить на два типа: связанные с неправильным образом жизни и с нарушениями в работе внутренних органов. Рассмотрим их подробнее.

Отеки: симптоматика и лечение

Отечность лица может проявляться без других заметных симптомов, но, зависимо от причины, ее могуь сопровождать:

Головная боль
Кожные язвы или гнойные шишки
Слезящиеся, зудящие глаза
Боль при жевании или глотании
Болезненная опухоль у одного или обоих ушей.

Как мы видим, причины отеков на лице крайне разнообразны. Соответственно, и избавляться от них также следует по-разному. В одном случае следует лишь немного скорректировать свой рацион, а в другом будет необходимо комплексное лечение.

Сердечные отеки

Если отек лица наблюдается преимущественно по вечерам, то, скорее всего, речь идет именно об этом типе отека. В этом случае отекают не только глаза и область скул, а все лицо выглядит отечным, обрюзгшим, овал лица словно «плывет», припухлости достаточно плотные на ощупь.

Вторичные симптомы – это увеличение печени, одышка, синюшность кожных покровов. При наблюдении данных симптомов необходимо незамедлительно обратиться к кардиологу, который назначит комплексное лечение.

При устранении проблем в работе сердечной мышцы уйдут и отеки, а ускорить процесс можно народными способами и салонными процедурами.

Почечные отеки

При нарушениях работы почек преимущественно отекают лицо и веки, особенно нижние. В этом случае отечность наблюдается именно сразу после сна.

Отекшие участки достаточно мягкие и водянистые. Кожа приобретает бронзовато-лимонный оттенок.

При почечных отеках отекает не только лицо, но и живот, грудь, руки и ноги, из-за чего происходит общее увеличение массы тела. Может наблюдаться повышение артериального давления.

Если у вас наблюдаются вышеперечисленные симптомы, рекомендуем обратиться к врачу для назначения соответствующего лечения.

Аллергические отеки

Как лечить отек лица?

Чтобы снять отек с лица, нужно ориентироваться на его причине. Например, избегание аллергена через несколько часов или пару дней избавит от симптомов, что были им вызваны. Также прием правильно подобранных доз тиреодных гормонов поможет компенсировать их нехватку при гипотиреозе, чем избавит от отека в дальнейшем. И так далее.

Лечение отеков, вызванных заболеванием почек, и аллергических отеков (отека Квинке) кардинально отличается.

При наличии почечных отеков, вызванных нарушением фильтрации в почках или снижением содержания белка в крови, уменьшить выраженность отеков можно с помощью мочегонных средств (диуретиков). Из них лучше остановиться на верошпироне, трифасе. Эти препараты обладают более мягким действием по сравнению с фуросемидом (лазиксом).

Отеки лица характерны для людей с эндокринными заболеваниями. Так, в частности, больные синдромом Кушинга, имеют отечное лунообразное лицо.

Микседема – еще одно эндокринное заболевание, приводящее к сильному отеканию кожи лица и подкожной клетчатки. Эту тяжелую форму гипотиреоза, связанную с нехваткой гормонов щитовидной железы, лечат посредством гормонотерапии.

После восстановления гормонального баланса, отток лимфы нормализуется и отеки проходят.

Прежде чем начинать терапию, стоит выяснить, почему одутловатое лицо по утрам. Полное обследование организма необходимо выполнить в первую очередь. Если какие-либо нарушения отсутствуют, стоит изменить образ жизни. Если нормализовать сон, свести к минимуму употребление вредных продуктов и отказаться от вредных привычек, вероятность развития утренних отеков будет сведена к минимуму.

Что делать, если с отеком, все-таки, пришлось столкнуться? Существуют методики, которые помогают убрать пастозность за 30-40 минут. Хорошие результаты показывает контрастный душ.

С его помощью удастся активировать кровообращение, что будет способствовать правильному распределению межклеточной жидкости. Если присутствуют отеки на веках, можно сделать холодный компресс на глаза.

Быстро избавиться от неприятности удастся, если использованные пакетики зеленого чая приложить к векам на 15 минут.

Восстановить нормальный баланс жидкости в межклеточном пространстве лица поможет самомассаж. Все манипуляции необходимо проводить нежно, без резких движений.

Действовать необходимо строго по массажным линиям. Отеки на веках можно быстро снять, если нежно похлопывать подушечками пальцев от наружного угла глаза к внутреннему (к слезной точке).

Хороших результатов удастся добиться, если совместить массаж с использованием кубиков льда. Благодаря холоду удастся повысить тонус мягких тканей, улучшить кровоток.

В аптеках можно встретить немало продуктов предназначенных специально для решения проблемы пастозности лица. Это различные маски с вытяжками из лекарственных растений и морских водорослей.

Восстанавливающие средства можно приготовить также и самостоятельно в домашних условиях. Хороший эффект показывает маска из свежего огурца или натертого картофеля.

Готовый продукт необходимо завернуть в марлю и приложить к векам на 15 минут.

Как убрать отеки, если в домашних условиях не удается добиться нужного эффекта? Можно обратиться за помощью к косметологу. Восстановить красоту лица поможет лимфодренажный массаж.

Процедура имеет ярко выраженный косметологический эффект, позволяет не только избавиться от отеков, но и уменьшить возрастные проявления, сделать незаметными первые мимические морщины. В салонах может выполняться ручной и аппаратный лимфодренажный массаж.

Второй вариант больше подходит для людей старше 40 лет с выраженными возрастами изменениями.

От одутловатости лица удастся легко избавиться. Однако, если проблема проявляется на регулярной основе, без помощи терапевта не обойтись.

Как избавиться от отеков, если со здоровьем все в порядке?

Вы ведете здоровый образ жизни, не злоупотребляете алкоголем, у вас нет проблем с сердцем и почками, но отечность по утрам все равно постоянно портит настроение? Попробуйте последовать этим советам:

Спите на спине или на боку, а не лицом в подушку. Кстати, лучше, если она будет твердой и высокой, что будет способствовать оттоку жидкости от головы во время сна.
Откажитесь от поздних ужинов, особенно с преобладанием жареной и соленой пищи.
Ешьте больше продуктов, содержащих клетчатку: злаковые, овощи (особенно баклажаны, брокколи, морковь), фрукты (яблоки, грейпфруты).
В течение дня пейте много воды и травяных чаев, но за три часа до сна постарайтесь не употреблять жидкость.
Устройте себе разгрузочный день, употребляя только полезную растительную пищу. Сократите потребление соли.
Утром примите контрастный душ и протрите лицо кубиками льда. Для их изготовления можно использовать настой ромашки, шалфея, петрушки или просто зеленый чай.

Что такое зубной флюс и как от него избавиться?

Можно ли с флюсом ходить в баню

Друзья зовут в баню но у меня, образовался флюс. Боюсь осложнений но отказатся не реально, так как, у нас давняя традиция. Нужен весомый аргумент почему не иду. Скажите можно ли с флюсом ходить в баню?
Ответ прост: любое воспаление и нарыв — это противопоказание для посещения бани. Поэтому, если у вас раздута флюсом щека, о том, чтобы пойти попариться, даже речи не может быть. Причина опухлости бывает достаточно безобидная: у вас растет новый зуб— зуб мудрости. Но чаще всего образование нарыва спровоцировано очень серьезными проблемами. Через поврежденную кариесом эмаль в пульпу попадает инфекция, и тогда у корня зуба начинает скапливаться гной. Следом за этим, если вовремя не начать лечение, воспаляется кость челюсти. А это уже грозит очень опасными последствиями. Поэтому флюс нельзя запускать, тем более и ни в коем случае греть. Воспаление и так очень быстро распространяется, а при термальном воздействии этот процесс значительно ускоряется. Кроме того, что в бане очень высокая температура воздуха, раскаленные камни распространяют значительное тепловое излучение. Оно также усугубляет протекание воспалительного процесса. Чтобы представить действие тепловых лучей на опухлость десны, вспомните, что происходит с яйцом, которое поместили в микроволновую печь, — оно там взрывается. Помните, что париться нельзя, если у вас только начал ныть или болеть зуб. Разогрев тело, вы рискуете усложнить проблему, заработав тот же флюс. Даже незначительное перегревание очень опасно в таком случае. Поэтому при флюсе категорически запрещено купание в воде с высокой температурой, прием горячей пищи, напитков. Не рекомендуется даже спать на стороне возникновения флюса, так как щека греется от подушки.

Не стоит относиться к флюсу легкомысленно, ведь игнорировать воспалительный процесс в области головы крайне опасно. Откажитесь от бани и обратитесь за помощью к врачу. Если такой возможности нет, то попробуйте хоть немного снять воспаление. Пополощите рот соляным раствором, отваром из ромашки, фурацилином, задерживайте жидкость на несколько секунд во рту, чтобы усилить ее исцеляющее действие. При первой возможности поспешите к стоматологу. Что касается бани, то специалисты утверждают: она полезна при стабильном состоянии организма, а при любых обострениях, наоборот, вредна.

Не всем полезно париться в бане, но есть и такие случаи, когда нельзя париться никому. Но с другой строны, в бане можно активно лечить некоторые болезни, важно знать какие и как именно.

Первый — прогревание через кожу горячим паром, проходящим сквозь поры.

Второй — волновой — тепловое излучение камней в каменке.

Третий — активное направленное воздействие на поверхность тела и непосредственно на проблемные зоны при помощи веника. Поэтому именно парилка в разы эффективнее, чем горячая ванна.

Но есть и четвертый способ!

Каждый знает выражение «обжигающий холод». Даже если облиться холодной водой, сосудистая система отвечает расширением капилляров — тончайших кровеносных сосудов. А чередование жара и холода усиливает этот эффект в несколько раз.

Это прекрасная тренировка сердечно-сосудистой системы. Но давайте помнить, что это тренировка, а не забег на рекорд! Как теперь говорится, без фанатизма!

Кому стоит отложить поход в баню?

Баня всегда категорически противопоказана при любых воспалительных процессах. Если у вас болит зуб — после бани получите флюс, наружный отит запросто обернется воспалением среднего уха, нарыв на пальце тоже добром не кончится. Даже простое нагревание воспалениям и нарывам противопоказано.

Баня нежелательна при тяжелых заболеваниях печени, почек и мочекаменной болезни в острой стадии, при всех кровотечениях, при обострении язвы желудка и двенадцатиперстной кишки, при повышенном давлении, тахикардии. В общем, при всех обострениях вредно, при всех стабильных состояниях — полезно и можно.

Кстати: если вы в парилке чувствуете холод, или даже озноб, и вас «потряхивает», — у вас очень высокая температура, в баню вам категорически нельзя. Немедленно в постель и вызывайте врача! У вас уже не «банные» проблемы.

Баня и иммунитет.

В чем профилактическая польза бани после переохлаждения? Холод затормаживает иммунную систему человека. Именно поэтому мы «простужаемся»: само это слово означает «переохлаждаемся». Чем быстрее, активнее и агрессивнее антимикробные клетки — лимфоциты и лейкоциты, — тем меньше шансов у бактерий и вирусов.

Придать нашим «солдатам иммунитета» бодрости и скорости — вот задача, с которой баня прекрасно справляется. Механизм воздействия бани на иммунную систему таков: с повышением температуры тела скорость наших клеток-защитников увеличивается.

Это достигается с помощью глубинного прогрева организма. Так мы на ранней стадии перехватим большинство простудных заболеваний и инфекций ВДП (верхних дыхательных путей) и можем предупредить неприятности, вызванные радикулитом.

Чем брызгать на камни: дегтярный раствор, квас, пиво (разбавленные 1:25!).

Что пить в бане: гранатовый сок вместе с горячим чаем — одно запить другим, малину, горячий чай с лимоном и медом. Чай с яблоками и корицей, чай с апельсиновыми корками и мятой.

Техника работы веником: большой веник — березовый или дубовый, малый веник — можжевеловый или только что срезанный еловый. Нагнав пар, несколько раз «подгоните» его к тому, кого парите, обработайте от шеи до пяток вениками крест-накрест, особое внимание уделяя пяткам и ногам ниже колен. Нужно активизировать иммунные клетки повсюду, ускорить их движение по всему организму!

Все мы прекрасно знаем, что посещать стоматолога необходимо не менее двух раз в год. Однако, как часто этим золотым правилом стоматологии мы просто-напросто пренебрегаем. Зубную боль пытаемся лечить народными средствами и всегда надеемся на авось

Почему мы не задумываемся при этом о возможных последствиях? Наверное, потому что не знаем: любое осложнение может привести к большим неприятностям, а некоторые из них — даже к смерти.

— как раз одно из таких осложнений. Что делать, если развился флюс? Об этом мы и поговорим.

При отсутствии лечения кариес прогрессирует, в результате чего образуются полости. Если лечение не происходит и на данном этапе, воспаляется пульпа. Далее она может развиваться по двум сценариям.

По первому — образуется

. Воспаляется нерв, человек испытывает невыносимые болевые ощущения. Обычно именно на этом этапе обладатель больного зуба и идёт к стоматологу. Если он оказывается везучим, его зуб даже получается спасти.

По второму — больной зуб воспаляется медленно, и постепенно этот процесс приобретает хронический характер. Инфекция получает широкое распространение и накапливается в своеобразном мешочке. Накопленные в корне зуба микроорганизмы называются гранулемой.

В зависимости от крепкости иммунитета, рано или поздно, инфекции начинают вызывать обострение различных заболеваний. Бактерии проникают внутрь организма и развиваются ещё больше.

Всё это выглядит, да и звучит, согласитесь, очень нелицеприятно. А что касается опасности для здоровья, то тем более всё очень серьёзно. Грубо говоря, флюс — это скопление гноя под мыщцами. Он требует срочной помощи стоматолога.

В случае, если флюс находится на первой стадии развития, его можно быстро излечить.

Можно идти в баню после лечения зуба

после лечения зуба эта статья ответила на многие мои вопросы.

надеюсь пригодиться еще кому-то.

Памятка для пациентов после лечения пульпита.

1.Возможен дискомфорт после анестезии:

— на верхней челюсти онемение может длиться в течении 1-2 часов, на нижней челюсти значительно дольше в течение 2 -4 часов, в зависимости от ваших анатомических особенностей. Постарайтесь в это время не принимать пищу, чтобы не повредить (прикусить) мягкие ткани щеки, языка, губ.

-после анестезии возможен: отёк мягких тканей, кровоизлияние в месте вкола. В данной ситуации рекомендуем приложить холод на 15 мин.

-снижение внимания. Мы рекомендуем: не садиться за руль или быть внимательным к ситуации на дороге.

-могут возникнуть отсроченные аллергические реакции на анестетик в виде отёка лица, языка, сыпи. Мы рекомендуем: выпить таблетку супрастина и обязательно позвонить лечащему доктору, при нарастающем отёке — вызвать скорую помощь.

Если после анестезии не полностью восстановилась чувствительность какой-либо области, то вы должны обязательно обратиться за помощью к врачу.

2. После того, как действие анестезии закончилось, вы можете ощущать небольшую ноющую боль в зубе и дискомфорт при накусывании – это нормально, так как каналы зуба обрабатывались механическими инструментами и антисептическими растворами. Мы рекомендуем выпить 1 таблетку анальгетика ( нимесил — 1 пакетик).

3. Временная пломба твердеет в течении 2 часов, пожалуйста, не принимайте пищу в этот период. Она может крошиться, но не должна выпасть полностью. Внимательно посмотрите, если пломбы нет, то нужно как можно быстрее её поставить, так как от этого зависит прогноз и результат лечения этого зуба.

4. Возможна травматизация десны, так как для лечения пульпита используется специальная изоляция, которая одевается на больной зуб и защищает полость рта от агрессивного воздействия применяемых антисептиков. При восстановлении правильной анатомической формы зуба используются матрицы и специальные нити, которые вводятся под десну. После постановки пломбы, её обязательно полируют, что также может травмировать десневой край. Если десна травмирована, то мы рекомендуем: почистить зубы, прополаскать рот водой и смазывать десну возле зуба гелем «актовегин» для слизистых оболочек в течении 3-7 дней после каждого приёма пищи.

5. После пломбировки каналов горячим методом возможны болезненные ощущения при накусывании на зуб в течении 7 дней, чтобы дискомфорт прошёл быстрее мы рекомендуем принимать: нимесил по 1 пакетику 2 раза в день после еды.

6. Возможен дискомфорт после постановки пломбы:

— пломба может мешать по прикусу, так как во время подгонки по прикусу вы были под действием анестезии и не могли до конца её чувствовать. Мы рекомендуем: записаться на подпиливание пломбы- это займёт не более 10 минут.

НЕ должно быть: отёка, повышения температуры, сильной боли. В данных случаях мы рекомендуем обратиться сразу к врачу. Нельзя греть щеку в области больного зуба, полоскать спиртосодержащими растворами полость рта и принимать их внутрь, выковыривать временную пломбу.

Лечение флюса в стоматологическом кресле

происходит следующим образом:

На первом этапе из больного зуба удаляется гной. Делается это за счёт разреза рядом с зубом под местным обезболивающим. Чтобы удаление гноя и дальше продолжалось, в полость вставляется кусочек стерильной резинки. А так же назначается антибактериальная терапия.

Количество употребляемых лекарств и вариант их потребления назначается только стоматологом в зависимости от каждой конкретной ситуации. После терапии, как правило, исчезает боль, отеки, припухлость, заживает разрез. В некоторых случаях флюс не заканчивает своё развитие, — тогда стоматолог продолжает лечение.

что делать с флюсом?

Лечить. Не в домашних условиях, когда возможно заработать дополнительные осложнения. А в стоматологии — у компетентного специалиста, который назначит Вам индивидуальное лечение и избавит Вас от мучений. Не терпите образование флюса, знайте, что с ним делать, и будьте здоровы.

Важно рассмотреть еще один аспект: это диагностика флюса. Не стоит пытаться самостоятельно поставить себе диагноз. «Мудрые» статьи, как в электронных, так и в печатных средствах массовой информации, помимо советов на тему:

флюс после удаления зуба,

если при проведении данной процедуры нарушены какие-либо правила или технологии. Чтобы не развился флюс, удаление зуба должен проводить стоматолог, в проверенной и надежной клинике. Использовать народные средства от флюса или средства облегчения состояния после удаления флюса, можно только с разрешения лечащего врача.

Почему нельзя в баню

Стоит еще раз подробно пояснить причину, по которой так важно отказаться от перегрева организма в период после экстракции зуба. Любые мероприятия, связанные с прогреванием, могут стать причиной того, что у пациента повысится артериальное давление. Под запретом также длительное нахождение под открытыми солнечными лучами в летнее время года.

Нарушение данных условий чаще всего приводит к тому, что у человека начинается повторное кровотечение. В результате заживление лунки затягивается, требуется повторная помощь лечащего врача.

Оптимальный срок воздержания от нагрузок и жары – не менее 5 суток с момента операции. Это необходимо для того, чтобы избежать множества неприятных последствий, сэкономить свои денежные средства и время на повторное лечение. Как только ранка затянется и болевые ощущения уменьшатся, можно постепенно возвращаться к привычному образу жизни.

Отвары из трав и сборов

Рецепты настоек

Спиртовые настойки для полоскания

Настойки на спиртовой основе помогут устранить воспаление и снять болевой синдром. Обязательно перед применением следует разводить средство с кипяченой водой, иначе можно получить ожог десны. Проводить лечение флюса на десне народными средствами нужно с особой осторожностью, особенно если на деснах есть повреждения, царапины или язвочки.

Настойка календулы

Этот способ можно применять в тех случаях, когда патология образовалась из-за неправильного удаления больного зуба или раны на десне. Итак, как убрать флюс в домашних условиях используя лечебную настойку календулы? Чтобы ее приготовить следует залить 15 г сухих цветков растения 150 мл спирта. Настоять 2 недели.

Перед применением развести с кипяченой водой (1 ч.л. настоя на 200 мл воды) и прикладывать к флюсу на 10-20 секунд трижды в день. Лечение проводить до того момента, когда пройдет нагноение.

Настой прополиса

Как известно, прополис славился своими целебными свойствами еще с древних времен. Он обеззараживает, снимает боль и воспаление. Кроме этого, метод поспособствует заживлению ран. Купить настойку можно в любой аптеке или же приготовить своими руками.

Для домашнего приготовления 10 г прополиса измельчается удобным способом и заливается 50 мл спирта крепостью не менее 70%. После дать настояться 14 дней в темном прохладном месте, а перед полосканием обязательно разбавлять с водой (10 мл настоя на 50 мл воды).

Настой полыни

Этот народный метод негативно влияет на патогенные микроорганизмы в ротовой полости. Для приготовления нужно залить стаканом спирта 25 г сухой травы. Дать настояться 14-15 дней. Перед полосканием разводить с водой (15 мл настоя разводят в 70 мл кипяченой воды).

Если процедуру сопровождает ощущение жжения или наблюдается усиленное воспаление, значит необходимо подобрать другое лекарство. Кроме того, проводя лечение, не стоит забывать о регулярности процедур, которые необходимо проводить до полного исчезновения симптомов недуга.

Существует множество вариантов, как лечить флюс дома. Народные средства могут облегчить боль и даже остановить воспалительный процесс. Но, ни один из способов не гарантирует полного выздоровления. Если лечение флюса в домашних условиях не приносит видимого результата, нужно обратиться к стоматологу за профессиональной помощью.

Как быстро убрать флюс в домашних условиях

Распухшая и покрасневшая щека, острая боль, иногда температура – вот основные симптомы флюса, гнойного воспаления надкостницы. Его основной причиной являются различные заболевания зубов. Но иногда флюс – следствие инфекционных заболеваний полости рта или механических травм.

Обнаружив у себя все вышеназванные признаки, самым благоразумным будет – немедленно обратиться к врачу (самолечение в данном случае может иметь самые неприятные последствия). Ну, а если флюс «осчастливил» вас поздно вечером, в выходные, в праздники, на помощь придут домашние средства. Хоть и не в силах полностью убрать флюс в домашних условиях, но быстро избавят от неприятных симптомов на некоторое время. В их числе:

Растворы для полоскания на основе антисептиков

– Фурацилин. Растворите в одном стакане кипяченой воды две таблетки. Благодаря антисептическому и обезболивающему действию, боль вскоре утихнет, а чуть позже спадет отек;

– Ротокан. Эта спиртовая настойка на основе календулы, ромашки и тысячелистника быстро снимет воспаление, если чайную ложечку средства растворить в стакане воды и полученный раствор использовать для полоскания;

– Малавит. Этот препарат имеет ярко выраженный антибактериальный эффект, замедляет развитие инфекции, эффективно борется с отеками. Чтобы приготовить раствор для полоскания, достаточно в стакан воды добавить 10 капель средства.

– Сода пищевая. Приготовьте содовый раствор (чайная ложечка на стакан чуть теплой воды), и полощите им рот.

Процедуры выполняются каждые 2 часа после еды. Желательно, после полоскания, в течение 30 минут не есть и не пить. Когда боль утихнет, а отек спадет, полоскание можно выполнять трижды в день (но не прекращать до визита к врачу!)

Таблетки, обладающие противовоспалительным действием

Эта группа препаратов не только на время избавит от воспаления и боли, но и уберет жар:

Нимесил – обезболивающее, противовоспалительное средство;
Диазолин – мощное антигистаминное средство. Поскольку именно вырабатываемый нашим организмом гистамин является причиной развития воспаления, прием диазолина позволяет быстро избавиться от абсцесса;
Диклофенак – утихомирит зубную боль и снимет воспаление.

Таблетки принимаются в соответствии с рекомендациями на листке вкладыше.

Компрессы

С димексидом. Димексид угнетает патогенную флору и повышает ее чувствительность к антибактериальным препаратам. Но следует помнить, что это вещество в неразбавленном виде способно вызвать сильный ожог, поэтому для приготовления компресса его разводят в воде (1 к 4). Далее необходимо смочить марлевую салфетку и прикладывать дважды в день на 2 часа к опухшей щеке.

С солью. Это вещество, имеющееся на любой кухне – прекрасное противовоспалительное и обезболивающее средство. Для приготовления компресса необходимо растворить две чайные ложечки в стакане воды (эффект будет заметнее, если использовать морскую соль). Получившимся раствором намочить марлю и проложить ее между щекой и больной десной.

Помните, что при флюсе нельзя греть больную щеку или завязывать ее. Ни в коем случае не пейте самостоятельно никаких антибиотиков. Желательно также, отправляясь к врачу, не принимать обезболивающих препаратов. И самое главное: не откладывайте «на потом» визит в стоматологическую клинику!

Перечисленные советы носят информационный характер, не являются призывом к действию и не заменяют рекомендаций врача. Перед применением, пожалуйста, проконсультируйтесь со специалистом.

Чтобы зубы не болели | Республика Татарстан

Опубликовано: 29.03.2001 0:00

Зубная боль большинством признается одной из самых мучительных и унизительных: вроде сам по себе человек не болен, способен работать, общаться с людьми, но, по сути, ничего этого делать он не может. То ноющая, то дергающая боль постоянно напоминает о себе. Если же забивать ее анальгетиками и другими болеутоляющими лекарствами, человек начинает ощущать вялость, заторможенность, не может сосредоточиться.

Конечно, самое правильное при зубной боли — идти к стоматологу. Но не всегда это можно сделать сразу. Положим, человек на даче, или боль наступила ночью, а до дежурной клиники трудно добраться. Зубную боль в таких случаях можно притупить, а то и совсем избавиться от нее, используя опыт народной медицины.

Испытанное средство — крепкий настой зверобоя. Такой же настой можно сделать из травы шалфей. Помогают усмирить зубную боль также настои из листьев малины или мяты. Все эти травы можно смешивать в равных пропорциях. Настой, которым вы полощете ротовую полость, должен быть как можно более теплым, по мере остывания его следует менять: от трех до пяти раз в течение получаса.

Удивительно, но от ноющей зубной боли хорошо помогает свиное сало. Если сало соленое, его надо отмыть от соли и положить ломтик между десной и больным зубом. Сало держат во рту 15-20 минут, за которые боль волшебным способом утихает и даже вовсе проходит.

Помогает при зубной боли также полоскание рта святой водой, которую освящают в церкви. Такая вода содержит ионы серебра, которые помогают в лечении любых воспалительных процессов. Для верующих людей, кроме чисто физиологического воздействия, святая вода еще и выступает в роли «плацебо» — психологического лекарства, ибо известно, что чем больше веришь в выздоровление, тем оно вероятнее.

Есть более экзотические способы избавления от зубной боли. Например, в некоторых деревнях при возникновении проблем с зубами в ухо со стороны больного зуба кладут корешок подорожника. Боль уходит через полчаса. Листик подорожника можно при этом приложить и к больной десне.

В сибирских краях зубную боль лечат так: запястье руки, противоположной больному зубу, натирают чесноком. Потом обвязывают руку чистой тряпицей. Затем чеснок мелко крошат и привязывают на запястье к месту, где бьется пульс.

При зубной боли воспаляются десны, появляются опухоли и нарывы, имеющие общее название — флюс. При подзубном флюсе и вообще при любых опухолях и нарывах в ротовой полости народная медицина советует следующее средство: на дно небольшой кастрюльки наливается два-три сантиметра жидкого липового меда. В мед кладут раскаленный докрасна ржавый гвоздь. Вступая с медом в химическую реакцию, ржавчина образует густое черное вещество, похожее на деготь. Этим веществом смазывают на ночь десну. Нарыв быстро прорывается, и боль исчезает. Прорвать нарыв поможет и половинка печеной луковицы, приложенная к больному месту.

Не меньшие неприятности, чем зубная боль, доставляет нам пародонтоз — слабые, кровоточащие десны. Этот недуг происходит от недостатка витаминов и настигает людей, как правило, в конце зимы. Есть много средств для укрепления десен. Одно из них, наиболее проверенное, — употребление живого чеснока в больших количествах. Чесночные таблетки, которые сейчас предлагают в аптеках, конечно, тоже помогают, но они не соприкасаются непосредственно с воспаленными местами и тем самым оказывают меньшее антибактериологическое действие. Тем, кто не любит есть чеснок просто так или чувствует жжение при его приеме, советуем взять горбушку черного хлеба и натереть ее чесноком до состояния, когда она станет как лакированная. Запах черного хлеба смягчает запах и остроту чеснока, а вкус — преотменный. От пародонтоза помогает также картофель, который надо есть в сыром виде.

От заболеваний десен помогает и сода с квасцами. Утром, до того, как чистить зубы, надо полоскать рот содовым раствором из расчета одна чайная ложка соды на стакан воды. При чистке зубов на зубную щетку следует нанести немного сухих жженных квасцов, которые можно приобрести в аптеке. Этими квасцами следует почистить зубы и затем энергично помассировать десны.

От рыхлости, кровоточивости и боли в деснах помогает и обыкновенная квашеная капуста. При пародонтозе ее надо долго жевать, задерживая во рту сок, этим соком полоскать десны и массировать их квашеной капустой. Кстати, такие ежедневные «упражнения» с капустой помогают не только от болезней десен. Они благотворно действуют на желудок и печень, помогают тем, кто хочет похудеть.

Ну и напоследок хочется дать несколько проверенных народных советов о том, как дольше сохранять зубы крепкими и здоровыми. Знаете ли вы, что процедуру чистки зубов можно заменить потреблением морковки или яблока? Эти продукты и зубы чистят, и десны укрепляют. Только яблоко при этом должно быть кислое. И, конечно же, после такой чистки зубов нельзя, чтобы между зубами или в дуплах (если таковые есть) оставались остатки пищи. Удалите их зубочисткой. А вот пастой чистить зубы уже не надо: яблоко и морковка сделали это за нее.

Эмилия КОЖУХОВА.

[uptolike]

Добавить комментарий

Изучение адаптации метаболического потока при раке с помощью интегрированных экспериментально-вычислительных подходов | BMC Biology

Павлова Н.Н., Томпсон ЦБ. Новые признаки метаболизма рака. Cell Metab. 2016; 23 (1): 27–47.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

ДеБерардини Р.Дж., Чандель Н.С. Основы метаболизма рака. Sci Adv. 2016; 2 (5): e1600200.

PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

Thiele I, Swainston N, Fleming RMT, Hoppe A, Sahoo S, Aurich MK и др. Глобальная реконструкция метаболизма человека по инициативе сообщества. Nat Biotechnol. 2013. 31 (5): 419–25.

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

Бранк Э., Саху С., Зелински Д.К., Алтункая А., Дрегер А., Мих Н. и др. Recon3D позволяет получить трехмерное изображение вариаций генов в метаболизме человека. Nat Biotechnol. 2018; 36 (3): 272–81.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

Metallo CM, Vander Heiden MG. Понимание регуляции метаболизма и ее влияния на физиологию клетки. Mol Cell. 2013; 49 (3): 388–98.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

Vander Heiden MG, DeBerardinis RJ. Понимание взаимосвязей между метаболизмом и биологией рака.Клетка. 2017; 168 (4): 657–69.

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

Галлуцци Л., Кепп О., Вандер Х.М.Г., Кремер Г. Метаболические цели для лечения рака. Nat Rev Drug Discov. 2013; 12: 829–46.

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

Бюшер Дж. М., Антоневич М. Р., Борос Л. Г., Берджесс С. К., Бруненграбер Х., Клиш С. Б. и др.Дорожная карта для интерпретации паттернов мечения метаболитов 13C из клеток. Curr Opin Biotechnol. 2015; 34: 189–201.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

Замбони Н., Зауэр У. Новые биологические открытия с помощью метаболомики и анализа 13C-потока. Curr Opin Microbiol. 2009. 12 (5): 553–8.

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

10.

Донг В., Кейблер М.А., Стефанопулос Г. Обзор метаболических путей, активируемых в раковых клетках, как определено с помощью изотопного мечения и сетевого анализа. Metab Eng. 2017; 43 (сентябрь 2016): 113–24.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

11.

Ким И.Ю., Сух Ш., Ли И.К., Вулф Р.Р. Применение стабильных нерадиоактивных изотопных индикаторов в исследованиях метаболизма человека in vivo. Exp Mol Med. 2016; 48 (1): e203–10.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

12.

Hui S, Ghergurovich JM, Morscher RJ, Jang C, Teng X, Lu W, et al. Глюкоза питает цикл TCA через циркулирующий лактат. Природа. 2017; 551 (7678): 115–8.

PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

13.

Патил К.Р., Окессон М., Нильсен Дж. Использование микробных моделей в масштабе генома для метаболической инженерии.Curr Opin Biotechnol. 2004. 15 (1): 64–9.

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

14.

Прайс Н.Д., Рид Дж. Л., Палссон Б. Модели микробных клеток в масштабе генома: оценка последствий ограничений. Nat Rev Microbiol. 2004. 2 (11): 886–97.

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

15.

Файст А.М., Палссон Б.Растущая сфера применения метаболических реконструкций в масштабе генома с использованием Escherichia coli. Nat Biotechnol. 2008. 26 (6): 659–67.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

16.

Дуарте, Северная Каролина, Беккер С.А., Джамшиди Н., Тиле И., Мо М.Л., Во Т.Д. и др. Глобальная реконструкция метаболической сети человека на основе геномных и библиомических данных. Proc Natl Acad Sci U S. A. 2007; 104 (6): 1777–82.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

17.

млн лет назад, Сорокин А., Мазеин А., Сельков А., Сельков Е., Демин О. и др. Реконструкция метаболической сети человека в Эдинбурге и ее функциональный анализ. Mol Syst Biol. 2007. 3 (135): 1–8.

Google ученый

18.

Мардиноглу А., Гатто Ф., Нильсен Дж. Моделирование метаболизма человека в масштабе генома — подход системной биологии. Biotechnol J. 2013; 8 (9): 985–96.

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

19.

Yizhak K, Chaneton B, Gottlieb E, Ruppin E. Моделирование метаболизма рака в масштабе генома. Mol Syst Biol. 2015; 11 (6): 817.

PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

20.

Tomczak K, Czerwińska P, Wiznerowicz M. Атлас генома рака (TCGA): неизмеримый источник знаний. Wspolczesna Onkol. 2015; 1A: A68–77.

Артикул Google ученый

21.

Shoemaker RH. Скрининг противоопухолевых препаратов линии опухолевых клеток человека NCI60. Nat Rev Рак. 2006; 6: 813.

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

22.

Барретина Дж., Капонигро Дж., Странски Н., Венкатесан К., Марголин А.А., Ким С. и др. Энциклопедия линии раковых клеток позволяет прогнозировать чувствительность к противоопухолевым препаратам. Природа. 2012. 483 (7391): 603–7.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

23.

Ганди М., Хуанг Ф.В., Джане-Вальбуэна Дж., Крюков Г.В., Ло С.К., Макдональд Э.Р. и др. Характеристика следующего поколения энциклопедии линии раковых клеток. Природа. 2019; 569 (7757): 503–8.

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

24.

Ли Х, Нинг С., Ганди М., Крюков Г.В., Гопал С., Дейк А. и др. Пейзаж метаболизма линии раковых клеток. Nat Med. 2019; 25 (май): 1–11.

Google ученый

25.

Субраманиан А., Нараян Р., Корселло С.М., Пек Д.Д., Натоли Т.Э., Лу Х и др. Карта связи нового поколения: платформа L1000 и первые 1000000 профилей. Клетка. 2017; 171 (6): 1437–52 e17.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

26.

Бордбар А., Монах Дж. М., Кинг З. А., Палссон Б. О.. Модели на основе ограничений предсказывают метаболические и связанные с ними клеточные функции. Nat Rev Genet. 2014; 15 (2): 107–20.

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

27.

Антоневич MR. Руководство по анализу метаболического потока 13C для биолога-онколога. Exp Mol Med. 2018; 50 (4): 19.

PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

28.

Lewis NE, Nagarajan H, Palsson BO. Ограничение метаболических отношений генотип-фенотип с использованием филогении in silico методов. Nat Rev Microbiol. 2012; 10 (4): 291–305.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

29.

Dai Z, Locasale JW. Понимание метаболизма с помощью анализа потоков: от теории к применению. Metab Eng. 2017; 43 (сентябрь 2016): 94–102.

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

30.

Антоневич М.Р., Келлехер Дж. К., Стефанопулос Г. Элементарные метаболиты (EMU): новая структура для моделирования изотопных распределений. Metab Eng. 2007. 9 (1): 68–86.

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

31.

Wiechert W, Möllney M, Isermann N, Wurzel M, De Graaf AA. Этапы двунаправленной реакции в метаболических сетях: III. Явное решение и анализ систем мечения изотопомеров. Biotechnol Bioeng. 1999. 66 (2): 69–85.

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

32.

Young JD. INCA: вычислительная платформа для анализа изотопно нестационарных метаболических потоков. Биоинформатика. 2014; 30 (9): 1333–5.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

33.

Ю Х, Антоневич М.Р., Стефанопулос Г., Келлехер Дж. Количественная оценка потока восстановительного карбоксилирования глутамина в липид в линии клеток коричневых адипоцитов. J Biol Chem. 2008. 283 (30): 20621–7.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

34.

Weitzel M, Nöh K, Dalman T, Niedenführ S, Stute B, Wiechert W.13CFLUX2 — высокопроизводительный программный комплекс для анализа 13C-метаболического потока. Биоинформатика. 2013. 29 (1): 143–5.

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

35.

Антоневич М.Р., Келлехер Дж. К., Стефанопулос Г. Определение доверительных интервалов метаболических потоков, оцененных на основе измерений стабильных изотопов. Metab Eng. 2006. 8 (4): 324–37.

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

36.

Theorell A, Leweke S, Wiechert W, Nöh K. Чтобы быть уверенным в неопределенности: байесовская статистика для анализа метаболического потока 13C. Biotechnol Bioeng. 2017; 114 (11): 2668–84.

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

37.

Crown SB, Long CP, Антоневич MR. Оптимальные индикаторы для параллельных экспериментов по маркировке и анализа метаболического потока 13C: новая система оценки точности и синергии. Metab Eng.2016; 38: 10–8.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

38.

Quek LE, Лю М., Джоши С., Тернер Н. Быстрые обменные потоки вокруг пируватного узла: модель протекающих клеток для объяснения увеличения и уменьшения немеченых и меченых метаболитов в эксперименте с индикатором. Cancer Metab. 2016; 4 (1): 1–14.

Артикул Google ученый

39.

Wiechert W, Nöh K.Изотопно нестационарный анализ метаболических потоков: комплексный, но очень информативный. Curr Opin Biotechnol. 2013. 24 (6): 979–86.

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

40.

Noack S, Nöh K, Moch M, Oldiges M, Wiechert W. Стационарный и нестационарный 13C-MFA: сравнение с использованием согласованного набора данных. J Biotechnol. 2011. 154 (2–3): 179–90.

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

41.

Yuan J, Bennett BD, Rabinowitz JD. Профилирование кинетических потоков для количественного определения метаболических потоков в клетках. Nat Protoc. 2008; 3: 1328.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

42.

Шломи Т., Фан Дж., Тан Б., Крюгер В.Д., Рабиновиц Дж. Количественное определение клеточных метаболических потоков метионина. Anal Chem. 2014; 86 (3): 1583–91.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

43.

Gaglio D, Metallo CM, Gameiro PA, Hiller K, Danna LS, Balestrieri C и др. Онкогенный K-Ras разделяет метаболизм глюкозы и глутамина, поддерживая рост раковых клеток. Mol Syst Biol. 2011; 7 (523): 1–15.

Google ученый

44.

Fan J, Kamphorst JJ, Mathew R, Chung MK, White E, Shlomi T, et al. Окислительное фосфорилирование под действием глутамина является основным источником АТФ в трансформированных клетках млекопитающих как при нормоксии, так и при гипоксии. Mol Syst Biol.2013; 9 (712): 1–11.

Google ученый

45.

Мерфи Т.А., Данг К.В., Янг ДжейДи. Изотопно нестационарный анализ потока 13C для индуцированного Myc метаболического репрограммирования в B-клетках. Metab Eng. 2013; 15 (1): 206–17.

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

46.

Чжао Д., Бадур М.Г., Любек Дж., Маганья Дж. Х., Бирмингем А., Сасик Р. и др. Комбинаторные метаболические скрины CRISPR-Cas9 выявляют критические контрольные точки окислительно-восстановительного потенциала, зависящие от регуляторной оси KEAP1-NRF2.Mol Cell. 2018; 69 (4): 648–63 e7.

Артикул CAS Google ученый

47.

Мейзер Дж., Шустер А., Пицке М., Ванде В. Дж., Афинеос Д., Ойзель К. и др. Повышенное перетекание формиата — признак окислительного рака. Nat Commun. 2018; 9 (1): 1368.

PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

48.

DeWaal D, Nogueira V, Terry AR, Patra KC, Jeon SM, Guzman G, et al.Истощение гексокиназы-2 ингибирует гликолиз и индуцирует окислительное фосфорилирование в гепатоцеллюлярной карциноме и повышает чувствительность к метформину. Nat Commun. 2018; 9 (1): 1–14.

Артикул CAS Google ученый

49.

Rajagopalan KN, Egnatchik RA, Calvaruso MA, Wasti AT, Padanad MS, Boroughs LK, et al. Метаболическая пластичность поддерживает пролиферацию клеток с дефицитом пируватдегидрогеназы. Cancer Metab. 2015; 3 (1): 7.

PubMed PubMed Central Статья Google ученый

50.

Vacanti NM, Divakaruni AS, Green CR, Parker SJ, Henry RR, Ciaraldi TP и др. Регуляция утилизации субстрата митохондриальным переносчиком пирувата. Mol Cell. 2014. 56 (3): 425–35.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

51.

Jiang L, Boufersaoui A, Yang C, Ko B, Rakheja D, Guevara G, et al. Количественный анализ метаболического потока показывает нетрадиционный путь синтеза жирных кислот в раковых клетках, дефицитных по транспортному белку цитрата митохондрий.Metab Eng. 2017; 43: 198–207.

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

52.

Metallo CM, Gameiro PA, Bell EL, Mattaini KR, Yang J, Hiller K, et al. Редукционный метаболизм глутамина с помощью IDh2 опосредует липогенез при гипоксии. Природа. 2012. 481 (7381): 380–4.

CAS Статья Google ученый

53.

Fendt SM, Bell EL, Keibler MA, Olenchock BA, Mayers JR, Wasylenko TM, et al.Восстановительный метаболизм глутамина является функцией соотношения α-кетоглутарата и цитрата в клетках. Nat Commun. 2013; 4: 1–11.

Артикул CAS Google ученый

54.

Лю Л., Шах С., Фан Дж., Пак Дж. О., Веллен К. Э., Рабиновиц Дж. Д.. Индикаторы яблочного фермента выявляют индуцированное гипоксией переключение в использовании пути НАДФН адипоцитами. Nat Chem Biol. 2016; 12 (5): 345–52.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

55.

Jiang L, Shestov AA, Swain P, Yang C, Parker SJ, Wang QA, et al. Восстановительное карбоксилирование поддерживает окислительно-восстановительный гомеостаз во время независимого от закрепления роста. Природа. 2016; 532 (7598): 255–8.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

56.

Фауберт Б., Ли К.Й., Цай Л., Хенсли К.Т., Ким Дж., Захариас Л.Г. и др. Метаболизм лактата при опухолях легких человека. Клетка. 2017; 171 (2): 358–71 e9.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

57.

Дэвидсон С.М., Папагианнакопулос Т., Оленчок Б.А., Хейман Дж. Э., Кейблер М.А., Луенго А. и др. Окружающая среда влияет на метаболические зависимости немелкоклеточного рака легкого, вызванного ras. Cell Metab. 2016; 23 (3): 517–28.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

58.

Possemato R, Marks KM, Shaul YD, Pacold ME, Kim D, Birsoy K и др. Функциональная геномика показывает, что путь синтеза серина важен при раке груди.Природа. 2011. 476 (7360): 346–50.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

59.

Grassian AR, Parker SJ, Davidson SM, Divakaruni AS, Green CR, Zhang X, et al. Мутации IDh2 изменяют метаболизм цикла лимонной кислоты и увеличивают зависимость от окислительного метаболизма митохондрий. Cancer Res. 2014; 74 (12): 3317–31.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

60.

Kelleher JK, Masterson TM. Модельные уравнения конденсационного биосинтеза с использованием стабильных изотопов и радиоизотопов. Am J Phys. 1992; 262 (1 Pt 1): E118–25.

CAS Google ученый

61.

Николае А., Вархейт Дж., Банеман Дж., Зенг А.П., Хайнцле Е. Анализ нестационарного метаболического потока 13С клеток яичника китайского хомячка в периодической культуре с использованием внеклеточного мечения подчеркивает метаболическую обратимость и компартментацию. BMC Syst Biol.2014; 8 (1): 1–15.

Артикул CAS Google ученый

62.

Льюис Калифорния, Паркер С.Дж., Фиск Б.П., Макклоски Д., Гуй Д.Й., Грин CR и др. Отслеживание компартментализованного метаболизма НАДФН в цитозоле и митохондриях клеток млекопитающих. Mol Cell. 2014; 55 (2): 253–63.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

63.

Кристен С., Лорендо Д., Шмидер Р., Брокерт Д., Мецгер К., Вейс К. и др.Метастазы в легкие, вызванные раком груди, показывают усиление анаплероза, зависимого от пируваткарбоксилазы. Cell Rep., 2016; 17 (3): 837–48.

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

64.

Gravel S-P, Andrzejewski S, Avizonis D, St-Pierre J. Анализ стабильных изотопных индикаторов в изолированных митохондриях из систем млекопитающих. Метаболиты. 2014. 4 (2): 166–83.

PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

65.

Николае А., Вархейт Дж., Нонненмахер Ю., Вейлер С., Хайнцле Э. Идентификация режимов активного элементарного потока в митохондриях с использованием селективно проницаемых клеток СНО. Metab Eng. 2015; 32: 95–105.

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

66.

Lee WD, Mukha D, Aizenshtein E, Shlomi T. Пространственная флуксомика обеспечивает субклеточно-компартментальный взгляд на восстановительный метаболизм глутамина в раковых клетках.Nat Commun. 2019; 10 (1): 1351.

PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

67.

Ан Э, Кумар П., Муха Д., Цур А., Шломи Т. Временная флюксомика выявляет колебания в потоке цикла TCA на протяжении клеточного цикла млекопитающих. Mol Syst Biol. 2017; 13 (11): 953.

PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

68.

Джайн М., Нильссон Р., Шарма С., Мадхусудхан Н., Китами Т., Соуза А.Л. и др.Профилирование метаболитов определяет ключевую роль глицина в быстрой пролиферации раковых клеток. Наука. 2012. 336 (6084): 1040–4.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

69.

Feist AM, Palsson BO. Целевая функция биомассы. Curr Opin Microbiol. 2010. 13 (3): 344–349.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

70.

Mahadevan R, Schilling CH. Эффекты альтернативных оптимальных решений в основанных на ограничениях моделях метаболизма в масштабе генома. Metab Eng. 2003. 5 (4): 264–76.

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

71.

Gudmundsson S, Thiele I. Вычислительный эффективный анализ изменчивости потока. BMC Bioinformatics. 2010; 11 (2): 2–4.

Google ученый

72.

Бургард А.П., Николаев Е.В., Шиллинг СН, Маранас CD. Анализ сцепления потоков реконструкций метаболической сети в масштабе генома. Genome Res. 2004. 14 (2): 301–12.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

73.

Барретт К.Л., Херргард М.Дж., Палссон Б. Разложение сложных реакционных сетей с использованием случайной выборки, анализа главных компонентов и ротации базиса. BMC Syst Biol. 2009; 3: 1–8.

Артикул CAS Google ученый

74.

Orth JD, Thiele I, Palsson BO. Что такое анализ баланса потоков? Nat Biotechnol. 2010. 28 (3): 245–8.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

75.

Льюис Н.Е., Хиксон К.К., Конрад Т.М., Лерман Дж. А., Чарусанти П., Полпития А.Д. и др. Данные об омике от эволюционировавших E. coli согласуются с расчетами оптимального роста на моделях в масштабе генома. Mol Syst Biol. 2010; 6: 390.

PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

76.

Schellenberger J, Que R, Fleming RMT, Thiele I, Orth JD, Feist AM и др. Количественное прогнозирование клеточного метаболизма с помощью моделей на основе ограничений: набор инструментов COBRA v2.0. Nat Protoc. 2011; 6: 1290.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

77.

Aurich MK, Fleming RMT, Thiele I. Системный подход выявляет различные метаболические стратегии среди линий раковых клеток NCI-60. PLoS Comput Biol.2017; 13 (8): e1005698.

PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

78.

Tedeschi PM, Markert EK, Gounder M, Lin H, Dvorzhinski D, Dolfi SC, et al. Вклад метаболизма серина, фолиевой кислоты и глицина в потребности раковых клеток в АТФ, НАДФН и пурине. Cell Death Dis. 2013; 4 (10): e877–12.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

79.

Dolfi SC, Chan LL-Y, Qiu J, Tedeschi PM, Bertino JR, Hirshfield KM, et al. Метаболические потребности раковых клеток связаны с их размером и скоростью синтеза белка. Cancer Metab. 2013; 1 (1): 20.

PubMed PubMed Central Статья Google ученый

80.

Fan J, Ye J, Kamphorst JJ, Shlomi T, Thompson CB, Rabinowitz JD. Количественный анализ потока показывает, что производство НАДФН зависит от фолиевой кислоты. Природа. 2014. 510 (7504): 298–302.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

81.

Liberti MV, Locasale JW. Эффект Варбурга: как он полезен для раковых клеток? Trends Biochem Sci. 2016; 41 (3): 211–8.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

82.

DeBerardinis RJ, Mancuso A, Daikhin E, Nissim I., Yudkoff M, Wehrli S, et al. Помимо аэробного гликолиза: трансформированные клетки могут участвовать в метаболизме глутамина, который превышает потребность в синтезе белков и нуклеотидов.Proc Natl Acad Sci U S. A. 2007; 104 (49): 19345–50.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

83.

Варбург О. О происхождении раковых клеток. Наука. 1956; 123 (3191): 309–14.

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

84.

Vander HMG, Cantley LC, Thompson CB, Mammalian P, Exhibit C, Metabolism A. Понимание эффекта Варбурга: пролиферация клеток.Наука. 2009; 324: 1029.

Артикул CAS Google ученый

85.

Шломи Т., Беньямини Т., Готтлиб Э., Шаран Р., Руппин Э. Метаболическое моделирование в масштабе генома проясняет роль пролиферативной адаптации в возникновении эффекта Варбурга. PLoS Comput Biol. 2011; 7 (3): 1–8.

Артикул CAS Google ученый

86.

Vazquez A, Oltvai ZN. Молекулярное скопление определяет общее происхождение эффекта Варбурга в пролиферирующих клетках и порог лактата в физиологии мышц.PLoS One. 2011; 6 (4): 1–9.

Артикул CAS Google ученый

87.

Зелински, округ Колумбия, Джамшиди Н, Корбетт А.Дж., Бордбар А., Томас А., Палссон Б.О. Системно-биологический анализ факторов, лежащих в основе признаков метаболизма раковых клеток. Научный доклад 2017; 7: 1–14.

CAS Статья Google ученый

88.

Becker SA, Palsson BO. Метаболические сети, зависящие от контекста, согласуются с экспериментами.PLoS Comput Biol. 2008; 4 (5): e1000082.

PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

89.

Цур Х., Руппин Э., Шломи Т. iMAT: инструмент интегративного метаболического анализа. Биоинформатика. 2010. 26 (24): 3140–2.

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

90.

Шломи Т., Кабили М.Н., Херргорд М.Дж., Палссон Б., Руппин Э.Сетевое прогнозирование тканеспецифического метаболизма человека. Nat Biotechnol. 2008. 26 (9): 1003–10.

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

91.

Джерби Л., Шломи Т., Руппин Э. Вычислительная реконструкция тканеспецифичных метаболических моделей: приложение к метаболизму печени человека. Mol Syst Biol. 2010; 6 (401): 1–9.

Google ученый

92.

Ван И, Эдди Дж. А., Цена без даты. Реконструкция метаболических моделей в масштабе генома для 126 тканей человека с использованием mCADRE. BMC Syst Biol. 2012; 6: 153.

PubMed PubMed Central Статья Google ученый

93. Агрен R, S Bordel, Mardinoglu А, Pornputtapong Н, Nookaew я, Нильсен Дж Реконструкция генома масштаб активных метаболических сетей для 69 типов клеток человека и 16 типов рака с использованием INIT. PLoS Comput Biol. 2012; 8 (5): e1002518.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

94.

Yizhak K, Gaude E, Le Dévédec S, Waldman YY, Stein GY, van de Water B, et al. Клеточно-специфическое метаболическое моделирование на основе фенотипа выявляет метаболические нарушения рака. Элиф. 2014; 3: 1–23.

Артикул Google ученый

95.

Влассис Н., Пачеко М.П., Заутер Т. Быстрая реконструкция компактных контекстно-зависимых моделей метаболической сети.PLoS Comput Biol. 2014; 10 (1): e1003424.

PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

96.

Blazier AS, Papin JA. Интеграция данных экспрессии в реконструкции метаболической сети в масштабе генома. Front Physiol. 2012; 3: 299.

PubMed PubMed Central Статья Google ученый

97.

Опдам С., Ришель А., Келлман Б., Ли С., Зелински, округ Колумбия, Льюис, NE.Систематическая оценка методов настройки метаболических моделей в масштабе генома. Cell Syst. 2017; 4 (3): 318–29 e6.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

98.

Чжан С., Бидхори Дж., Бенфейтас Р., Ли С., Ариф М., Улен М. и др. ESS: инструмент для количественной оценки уровня существенности реакции / генов в масштабах генома в моделировании на основе ограничений. Front Physiol. 2018; 9: 1–6.

Google ученый

99.

Folger O, Jerby L, Frezza C, Gottlieb E, Ruppin E, Shlomi T. Прогнозирование селективных мишеней лекарств при раке через метаболические сети. Mol Syst Biol. 2011; 7 (501): 1–10.

Google ученый

100.

Bordel S. Моделирование метаболизма на основе ограничений позволяет находить признаки метаболического рака и определять индивидуальные терапевтические окна. Oncotarget. 2018; 9 (28): 19716–29.

PubMed PubMed Central Статья Google ученый

101.

Ижак К., Габай О., Коэн Х., Руппин Э. Идентификация на основе моделей лекарств-мишеней, которые возвращают нарушенный метаболизм, и его применение к старению. Nat Commun. 2013; 4: 1–11.

Артикул CAS Google ученый

102.

Auslander N, Cunningham CE, Toosi BM, McEwen EJ, Yizhak K, Vizeacoumar FS, et al. Комплексное вычислительное и экспериментальное исследование раскрывает FUT9 как метаболический драйвер колоректального рака. Mol Syst Biol.2017; 13 (12): 956.

PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

103.

О’Нил, штат Нью-Джерси, Бейли М.Л., Хитер П. Синтетическая летальность и рак. Nat Rev Genet. 2017; 18 (10): 613–23.

PubMed Статья CAS PubMed Central Google ученый

104.

Frezza C, Zheng L, Folger O, Rajagopalan KN, MacKenzie ED, Jerby L, et al. Гемоксигеназа является синтетически смертельной для опухолевого супрессора фумаратгидратазы.Природа. 2011. 477 (7363): 225–8.

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

105.

Сместад Дж., Хамиди О, Ван Л., Нельсон Холте М., Аль-Хазал Ф., Эрбер Л. и др. Характеристика и метаболическое синтетическое летальное тестирование на новой модели семейной феохромоцитомы и параганглиомы с потерей SDH. Oncotarget. 2017; 9 (5): 6109–27.

PubMed PubMed Central Google ученый

106.

Apaolaza I, San José-Eneriz E, Tobalina L, Miranda E, Garate L, Agirre X и др. Подход in-silico для прогнозирования и использования синтетической летальности в метаболизме рака. Nat Commun. 2017; 8 (1): 1–9.

CAS Статья Google ученый

107.

Мегчеленбринк В., Кацир Р., Лу Х, Руппин Е., Нотебаарт Р.А. Летальность синтетических доз в метаболической сети человека позволяет прогнозировать рост опухоли и выживаемость больных раком.Proc Natl Acad Sci U S. A. 2015; 112 (39): 12217–22.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

108.

Park JO, Rubin SA, Xu YF, Amador-Noguez D, Fan J, Shlomi T, et al. Концентрации, потоки и свободная энергия метаболитов предполагают эффективное использование ферментов. Nat Chem Biol. 2016; 12 (7): 482–9.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

109.

Fan J, Kamphorst JJ, Rabinowitz JD, Shlomi T. Мечение глутамина жирными кислотами при гипоксии можно объяснить изотопным обменом без чистого восстановительного потока изоцитратдегидрогеназы (IDH). J Biol Chem. 2013. 288 (43): 31363–9.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

110.

Гопалакришнан С., Маранас CD. Анализ метаболического потока 13C в масштабе генома. Metab Eng. 2015; 32: 12–22.

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

111.

Гарсия Мартин Х., Кумар В.С., Уивер Д., Гош А., Чубуков В., Мухопадхьяй А. и др. Метод ограничения моделей в масштабе генома данными мечения 13C. PLoS Comput Biol. 2015; 11 (9): 1–34.

Артикул CAS Google ученый

112.

Mardinoglu A, Bjornson E, Zhang C, Klevstig M, Söderlund S, Ståhlman M, et al. Идентификация метаболизма НАД + и глутатиона на основе персональной модели в качестве мишени вмешательства при НАЖБП. Mol Syst Biol.2017; 13 (3): 916.

PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

113.

Hyötyläinen T, Jerby L, Petäjä EM, Mattila I, Jäntti S, Auvinen P, et al. Исследование в масштабе генома показывает снижение метаболической адаптивности у пациентов с неалкогольной жировой болезнью печени. Nat Commun. 2016; 7: 1–9.

Артикул CAS Google ученый

Неинвазивное обнаружение небольшого количества биолюминесцентных раковых клеток in vivo

Abstract

Раннее обнаружение опухолей может значительно улучшить результат лечения опухолей.Один из наиболее часто задаваемых вопросов при визуализации рака — сколько клеток можно обнаружить неинвазивным способом у живого животного. Хотя многие факторы ограничивают такое обнаружение, увеличение светового излучения от ячеек является одним из наиболее эффективных способов преодоления этих ограничений. Здесь мы описываем разработку и использование лентивирусного вектора, содержащего усиленный ген люциферазы светлячка ( luc2 ). Полученные одноклеточные клоны опухоли молочной железы мыши (4T1-luc2) показали стабильное световое излучение в диапазоне 10000 фотонов / сек / клетка.В некоторых случаях отдельные клетки 4T1-luc2, вставленные под кожу мыши nu / nu , в некоторых случаях могут быть обнаружены неинвазивно с использованием охлаждаемой камеры CCD. Кроме того, мы показали, что для развития опухолей у этих мышей необходимо всего несколько клеток, а прогрессирование опухоли можно отслеживать сразу после имплантации клеток. Значительно более высокая активность люциферазы в этих клетках позволила нам обнаружить микрометастазы как у сингенных мышей Balb / c, так и у мышей nu / nu .

Образец цитирования: Kim J-B, Urban K, Cochran E, Lee S, Ang A, Rice B, et al.(2010) Неинвазивное обнаружение небольшого количества биолюминесцентных раковых клеток In vivo . PLoS ONE 5 (2): e9364. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0009364

Редактор: Александр Сворбрик, Институт медицинских исследований Гарвана, Австралия

Поступила: 12 мая 2009 г .; Принята к печати: 2 января 2010 г .; Опубликовано: 23 февраля 2010 г.

Авторские права: © 2010 Kim et al. Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Финансирование: Эта работа финансировалась из внутренних источников в Caliper Life Sciences и Momenta Pharmaceuticals. Спонсоры предоставили реагенты, пространство для исследований и ресурсы для этого исследования. Однако авторы принимают участие исключительно в дизайне исследования, сборе и анализе данных или подготовке рукописи. Caliper Life Sciences и Momenta Biopharma согласились опубликовать эти данные в научном журнале. Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Дже-Бом Ким, Конни Урбан, Стив Ли, Брэдли Райс, Адам Бата, Кеннет Кэмпбелл, Ричард Кофе, Алекс Городинский, Жан Лу и Питер Лассота — сотрудники Caliper Life Sciences. Хэ Чжоу, Эдвард Кокран и Такаши Кей Кишимото — сотрудники Momenta Pharmaceuticals Inc. Авторы соглашаются с политикой обмена данными с политикой PLoS One. На основании данных этого исследования не было подано заявки на патент.

Введение

Обнаружение опухолей на ранних стадиях имеет решающее значение для эффективного лечения опухолей и для изучения туморогенеза [1], [2], [3].Традиционно рост опухоли оценивался с помощью механических или электронных штангенциркулей для физических измерений подкожных опухолей человека, растущих у мышей с ослабленным иммунитетом [4]. Однако этот метод подходит только для пальпируемых опухолей, растущих под кожей животных. Более глубокие опухолевые образования, такие как остеосаркомы, инкапсулированные костью, не поддаются прямым физическим измерениям. Даже в подкожных моделях объем опухоли не может быть точно определен количественно с помощью физических измерений, потому что отеки и некротические центры будут способствовать увеличению размера опухоли [5].Модели ортотопических солидных опухолей позволяют обойти эти препятствия и позволяют достаточно точно оценить опухолевую нагрузку путем взвешивания иссеченных, «очищенных» опухолей после умерщвления животных. Классические ортотопические модели непрактичны для оценки эффективности соединений, поскольку они требуют умерщвления большого количества животных в каждый момент времени. Точно так же идентификация опухолей и количественная оценка опухолевой нагрузки в моделях метастазов требуют исчерпывающих и утомительных гистологических анализов [6], [7], [8].

Неинвазивная биолюминесцентная визуализация всего тела (BLI) позволяет повторять в реальном времени in vivo мониторинг роста опухоли у экспериментальных животных, независимо от локализации опухоли. В отличие от флуоресценции, BLI демонстрирует минимальные фоновые сигналы от тканей животных [9]. Следовательно, BLI может обнаруживать относительно слабые сигналы с высоким отношением сигнал / фон. Благодаря своей универсальности, BLI был принят для изучения доклинической эффективности кандидатов в лекарства [10], [11], [12], [13], а также различных аспектов биологии млекопитающих с помощью репортерных анализов [14], [15].

Недавно люцифераза светлячка ( Photinus pyralis ) была модернизирована для дальнейшей оптимизации ее экспрессии в клетках млекопитающих. По сравнению с предыдущими поколениями люциферазы, новая версия ( luc2 ) обеспечивает более чем четырехкратное увеличение светового излучения, которое было достигнуто за счет оптимизации кодонов и удаления потенциальных сайтов связывания факторов транскрипции [16]. Мы постулировали, что отдельные раковые клетки могут быть обнаружены in vivo , используя повышенную биолюминесценцию luc2 .С этой целью мы сконструировали лентивирусный вектор, в котором экспрессия luc2 осуществляется через промотор убиквитина С человека [17]. Затем конструкцию стабильно трансфицировали в линию опухолевых клеток молочной железы мыши 4T1 [18], [19]. Несколько стабильных одноклеточных клонов (4T1-luc2) были впоследствии выделены со световой эмиссией в диапазоне 10 000 фотонов / сек / клетка. Здесь мы сообщаем, что по крайней мере в некоторых случаях было достигнуто обнаружение одной раковой клетки in vivo с использованием одного из этих клонов, меченных luc-2.Мы также показываем развитие опухолей только из нескольких клеток, имплантированных мышам nu / nu , и обнаружение метастазов у сингенных мышей Balb / c. Насколько нам известно, это первый отчет об обнаружении одной биолюминесцентной клетки in vivo с использованием неинвазивного метода визуализации. Такие яркие клетки можно эффективно использовать для мониторинга эффективности кандидатов в лекарства в моделях метастазов и ортотопических опухолей, для отслеживания метастатической миграции раковых клеток, а также для точного определения того, сохраняется ли какое-либо остаточное заболевание после лечения.

Результаты

Создание лентивирусной векторной системы и стабильных клеточных линий 4T1-luc2

Лентивирусный вектор, содержащий ген светлячка luc2 , конъюгированный с промотором убиквитина С человека, был сконструирован для создания стабильных биолюминесцентных линий раковых клеток [16], [17], [18]. Затем клетки 4T1 опухоли молочной железы мыши трансфицировали лентивирусным вектором и отбирали стабильные клоны с использованием пуромицина (4T1-luc2). Восемь клонов были выбраны для дальнейшего анализа, и их люциферазная активность отслеживалась в течение четырех недель без маркера отбора.Хотя среди клонов были различия, большинство из них излучали более 3000 фотонов в секунду на клетку света. Учитывая, что большинство клеточных линий, меченных люциферазой предыдущих поколений, излучает менее 250 фотонов / сек / клетку, наши клоны luc2 показали значительно более высокий уровень светового излучения [20]. Удивительно, но один клон (C26) первоначально излучал до 52 000 фотонов / сек / клетку, но его световое излучение снизилось до 6400 фотонов / сек / клетка через четыре недели (рис. S1A). Чтобы подтвердить, что никаких изменений клеточной физиологии во время процесса мечения / клонирования не произошло, мы сравнили клоны с исходными родительскими клетками 4T1 на нескольких различных уровнях.Сначала мы изучили модели роста. Из восьми первоначально отобранных клонов мы выбрали две линии (C27 и C38) и сравнили их характер роста с родительскими клетками 4T1. Обе линии имели одинаковое время удвоения с родительскими клетками (время удвоения 12,6 часа для обоих клонов по сравнению с 12,0 часа для исходных клеток 4T1).

Мы также исследовали другие критические параметры клеточной физиологии, включая эффекты потребления АТФ. Поскольку люцифераза использует одну молекулу АТФ для производства каждого фотона света, высокий уровень излучения света может быть вредным для метаболизма клетки из-за истощения ее пула АТФ.Чтобы проверить, влияет ли высокая светопродукция на физиологию клеток, мы наблюдали рост клеток в течение четырех дней в присутствии высоких концентраций субстрата люциферазы, D-люциферина (150 и 300 мкг / мл / день). Результаты показали, что в присутствии D-люциферина клоны 4T1-luc2 демонстрировали характер роста, аналогичный таковым для клеток, культивированных без D-люциферина, и родительских клеток 4T1 (фиг. S1B, C, D). Это говорит о том, что клетки 4T1-luc2 могут выдерживать потребление АТФ, необходимого для высокого светового излучения, без значительного влияния на пул АТФ клетки.

Поскольку клон C26 показал снижение активности люциферазы с течением времени, мы предприняли второй раунд клонирования единичных клеток с ограниченным разведением из исходной смешанной популяции. Были отобраны четыре ярких клона, и их люциферазная активность (световое излучение) отслеживалась в течение шести недель без давления отбора (рис. 1A, B). Все клоны первоначально производили более 40 000 фотонов в секунду на клетку; затем световое излучение снизилось до 10 000 фотонов / сек на ячейку и стабилизировалось на этом уровне. Он оставался стабильным в течение четырех недель в отсутствие пуромицина (рис. 1В).Из этих клонов был выбран клон 1A4 (4T1-luc2-1A4) для дальнейших исследований. Характер роста 4T1-luc2-1A4 был сравним с таковым из родительских клеток 4T1 в присутствии или в отсутствие D-люциферина (рис. 1C, D, E). Чтобы устранить причину начального снижения эмиссии света в клоне 4T1-luc2-1A4, мы выполнили культивирование с ограниченным разведением в 96-луночных планшетах. Когда клетки выросли до примерно 25% конфлюэнтности, мы исследовали экспрессию люциферазы с помощью биолюминесцентной визуализации. Каждая лунка, содержащая клетки, проявляла люциферазную активность.Эти результаты показывают, что первоначальное снижение активности люциферазы не было связано с потерей экспрессии люциферазы в некоторых клетках клона (фигура S2).

Рисунок 1. Генерация клеток 4T1-luc2-1A4 и характер их роста в присутствии или в отсутствие D-люциферина.

(A) Генерация клеток 4T1-luc2-1A4. Клетки 4T1 опухоли молочной железы мыши трансфицировали лентивирусным вектором, содержащим усиленную люциферазу 2 под контролем промотора убиквитина С человека [16], [18].Выделяли клоны, устойчивые к пуромицину, и их экспрессию люциферазы проверяли с помощью биолюминесценции. За два раунда клонирования было получено 4 одноклеточных клона 4T1-luc2. Активность люциферазы измеряли с использованием IVIS Spectrum (биннинг: med, f stop: 1, время экспозиции: 1 секунда). Показано типичное изображение биолюминесценции для тестирования стабильности экспрессии люциферазы. Общий поток (фотоны / сек) определяли количественно с использованием программного обеспечения Living Image 3.0. Клон 4T1-luc2-1A4 был выбран и использован для дальнейших исследований.(B) Стабильность люциферазной активности четырех клонов 4T1-luc2. Клетки выращивали в течение 6 недель в обычных средах без пуромицина, и их световое излучение контролировали еженедельно. Все клоны показали более 7000 фотонов / сек / ячейку светового излучения в течение всего периода тестирования. (C) Кривые роста клона 4T1-luc2-1A4 и родительских клеток 4T1. Клетки выращивали в течение 4 дней в обычной питательной среде без пуромицина. Общее количество клеток с течением времени наносили на график в логарифмической шкале. Обе клеточные линии показали похожие модели роста и время удвоения.(D, E) Рост клона 4T1-luc2-1A4 и родительских клеток 4T1 в присутствии D-люциферина. Клетки кормили D-люциферином один раз в день (150 мкг / мл / день, D) или два раза в день (300 мкг / мл / день, E), соответственно, собирали в каждый момент времени и подсчитывали. Присутствие избытка D-люциферина не влияло на общий характер роста клеток 4T1-luc2.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0009364.g001

Неинвазивное обнаружение небольшого количества клеток у

nu / nu мышей

Поскольку клетки 4T1-luc2 показали чрезвычайно высокое световое излучение, мы затем попытались обнаружить небольшое количество этих клеток in vivo .Первоначально клетки 4T1-luc2-1A4 получали с использованием метода серийных разведений и имплантировали в оба бока самок мышей nu / nu (рис. 2). В каждое место имплантации имплантировали разное количество клеток. Было выполнено шесть имплантаций для каждого количества клеток (3, 5, 10 и 50 клеток). Снимки биолюминесценции были получены сразу после имплантации. Используя высокочувствительную охлаждаемую CCD-камеру, мы смогли обнаружить всего 3 клетки в этом эксперименте (рис. 2A-D, красные пунктирные круги).В некоторых случаях, однако, мы не обнаружили никаких значимых сигналов от мест имплантации (рис. 2A-D, желтые пунктирные круги). Это может быть связано с гибелью клеток сразу после имплантации или с присущей вариабельностью метода серийного разведения, когда предполагаемое количество клеток очень мало (рис. 2A-D, желтые кружки). Отдельно мы взяли PC3M-luc-C6, который был одной из самых ярких клеточных линий (~ 250 фотонов / сек / клетку), созданных нами до сих пор (с использованием нескольких раундов трансфекций с помощью pGL3), и сравнили его с клетками 4T1-luc2-1A4. , имплантировав их мышам SCID-bg (рис. S3).Результаты показывают, что биолюминесцентные сигналы от 10 ² клеток 4T1-luc2-1A4 у пушистых мышей были легко обнаружены, в то время как сигнал не был обнаружен от того же количества клеток PC3M-luc-C6.

Рисунок 2. Обнаружение небольшого количества клеток 4T1-luc2-1A4 in vivo .

(A-D) Определенное количество клеток имплантировали подкожно в задние боковые области самок мышей nu / nu [1]. Каждой мыши сделали две имплантации. На вставках указано количество имплантированных клеток.D-люциферин вводили мышам сразу после имплантации и получали биолюминесцентные изображения (t = 0) с использованием IVIS Spectrum (FOV; A, биннинг; малый, f стоп; 1, время экспозиции; 5 мин). (E-H) После 6 часов имплантации все мыши были повторно визуализированы с использованием тех же настроек IVIS Spectrum (t = 6 часов). Красные кружки представляют места имплантации, у которых биолюминесцентные сигналы были выше, чем автолюминесценция. Желтые кружки указывают места имплантации, которые не генерировали каких-либо значимых сигналов, возможно, из-за немедленной гибели клеток.(I) Корреляция между количеством имплантированных клеток и общим потоком из мест имплантации. Биолюминесцентные сигналы были количественно определены с использованием программного обеспечения Living Image 3.0 и нанесены на график в зависимости от количества клеток. Измеренная интенсивность биолюминесценции прямо пропорциональна количеству имплантированных клеток. Звездочки (*) указывают на автолюминесценцию тканей.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0009364.g002

Через шесть часов после имплантации мы повторно визуализировали ту же группу животных (рис. 2E-H).Как и ожидалось, исходя из враждебной постимплантационной среды, 4 участка из 10 и 50 участков имплантации клеток потеряли свои первоначальные биолюминесцентные сигналы (рис. 2G, H). Однако удивительно, что мы смогли обнаружить сигналы от сайтов имплантации 3- и 5-клеток (рис. 2E, F). Наш анализ изображений, полученных сразу после имплантации (t = 0), показывает, что общий поток от мест имплантации был прямо пропорционален количеству имплантированных клеток (рис. 2I). Это согласуется с другими данными (не показаны), демонстрирующими линейную зависимость между световым излучением и количеством клеток, посеянных in vitro .Основываясь на этих результатах, мы продемонстрировали, что измерение биолюминесценции является правдоподобным методом для выполнения неинвазивного мониторинга раннего роста опухоли in vivo .

Обнаружение одиночной биолюминесцентной клетки 4T1-luc2

In vivo

После подтверждения неинвазивного обнаружения трех клеток in vivo , мы поставили перед собой задачу обнаружить одну клетку 4T1-luc2-1A4 после подкожной имплантации. Чтобы исключить экспериментальную ошибку и повысить точность определения количества имплантированных клеток, мы использовали микропипетку для имплантации одной клетки 4T1-luc-2-1A4.Сначала клетки 4T1-luc2-1A4 обрабатывали трипсином и высевали на чашку для культивирования клеток. Затем отдельные клетки собирали и имплантировали с помощью микропипетчика в подкожные щели, сделанные в боковых областях мышей. Мышей разделили на две группы: четырем мышам имплантировали одиночные клетки, а четырем другим мышам имплантировали по 10 клеток каждой (рис. S4C, D). Затем животных подвергали биолюминесцентной визуализации сразу после имплантации. В некоторых случаях нам удалось обнаружить одну клетку 4T1-luc2-1A4 (рис. 3A-C и рис. S4A, B).На каждом из трех независимых последовательных изображений одной и той же клетки мы зарегистрировали общий поток от 460 до 528 фотонов / сек. Анализ профиля линии зарегистрированного потока от одной клетки выявил отношение сигнала к фону 6: 1, причем сигнал явно исходит из места имплантации (рис. 3D, E). Таким образом, мы пришли к выводу, что биолюминесцентный сигнал действительно исходит от одной клетки 4T1-luc2-1A4. Отсутствие сигнала от трех других сайтов в каждой группе можно объяснить быстрой гибелью клеток.

Рисунок 3. Обнаружение одной клетки 4T1-luc2-1A4 in vivo .

(A-C) Биолюминесцентный сигнал одиночной клетки 4T1-luc2-1A4 in vivo . Одиночная клетка была имплантирована в спину мыши nu / nu . D-люциферин вводили мыши внутрибрюшинно, и биолюминесцентные изображения получали с использованием IVIS Spectrum (FOV; C, биннинг; маленький, f стоп; 1, время экспозиции; 5 мин). Изображения для пре- и пост-инъекции люциферина показаны на панелях (A) и (B), соответственно.Увеличенное изображение пунктирной области с панели (B) показано на панели (C). Пунктирный кружок представляет сигнал отдельной ячейки. Звездочка (*) указывает фоновый сигнал от кишечника. (D, E) Анализ профиля линии одиночного сигнала клетки. Эмиссия света была нанесена вдоль линии, показанной на панели (D). Пиковый сигнал на панели (E) представляет собой излучение света от одной ячейки 4T1-luc2-1A4. (F) Развитие опухоли из пяти клеток 4T1-luc2-1A4. Клетки имплантировали подкожно (с использованием микропипетки) в задний фланг мыши nu / nu .Биолюминесцентные изображения сначала были получены перед инъекцией D-люциферина (пре-люциферина). Затем животное визуализировали с 0 по 42 день. (G) Мониторинг роста опухоли из 5 клеток 4T1-luc2-1A4. Биолюминесцентные сигналы количественно оценивали с помощью программного обеспечения Living Image и наносили на график в сравнении с измерениями физического объема опухоли штангенциркулем. Опухоль не пальпировалась до 27-го дня после имплантации, в то время как биолюминесцентные сигналы регистрировались с 0-го дня. Обратите внимание, что общий поток был нанесен на график в логарифмической шкале.(H) Развитие опухоли из 10 клеток 4T1-luc2-1A4. Клетки имплантировали подкожно (с помощью микропипетки) в спину мыши nu / nu . Фоновый сигнал показан на изображении до инъекции D-люциферина (Pre-luciferin). Рост опухоли контролировали в течение 40 дней с помощью IVIS Spectrum и штангенциркуля. (I) Мониторинг роста опухоли из 10 клеток 4T1-luc2-1A4. Объемы опухолей измеряли с помощью штангенциркуля и наносили на график относительно сигналов биолюминесценции, которые количественно определяли с помощью программного обеспечения Living Image.Опухоль не пальпировалась до 29 суток после имплантации. Напротив, биолюминесцентные сигналы отличались от дня 0 имплантации.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0009364.g003

Развитие опухоли из небольших популяций клеток 4T1-luc2

После обнаружения одной клетки in vivo , мышей, которым имплантировали 1–50 клеток, наблюдали в течение длительного периода времени для обнаружения возможного роста опухоли. Мы предположили, что имплантация большего количества клеток позволит обойти проблему, которую враждебная постимплантационная среда представляет меньшему количеству клеток.Учитывая, что обычные процедуры имплантации опухолей используют от 0,5 до 10 миллионов клеток в моделях подкожных опухолей, мы не ожидали, что опухоли возникнут из такого небольшого количества клеток. К нашему удивлению, у двух мышей, которым были имплантированы 5 и 10 клеток, развились солидные опухоли. Мы продолжали снимать этих мышей, и как только опухоли стали прощупываться, мы также физически измерили их размеры с помощью стандартных штангенциркулей. Опухоли, возникшие в результате имплантации 5 и 10 клеток, не могли быть обнаружены штангенциркулем до 27 и 29 дня соответственно (рис. 3G, I).Однако неинвазивная визуализация в видимом свете позволила нам выявлять и количественно определять опухолевую нагрузку непрерывно с момента имплантации (рис. 3F, H). Эти данные ясно показывают, что рост опухоли можно контролировать с помощью неинвазивной биолюминесцентной визуализации, как только клетки имплантируются животному, даже если имплантировано всего пять клеток.

Метастазы клеток 4T1-luc2-1A4 у сингенных мышей Balb / c после ортотопической имплантации в жировую подушечку молочных желез

Чтобы проверить метастатические свойства клеток 4T1-luc2-1A4, мы ортотопически имплантировали эти клетки в жировые подушечки молочной железы самок мышей nu / nu (5 × 10 ⁵ клеток на мышь, n = 9).Первичные опухоли быстро росли и развивались метастатические поражения, которые можно было обнаружить с помощью биолюминесцентной визуализации к 27 дню (рис. 4). Чтобы подтвердить метастазирование опухолевых клеток в легкие, мы изолировали легкие ткани на 27 день после имплантации и взяли изображений ex vivo (рис. 4В). Кроме того, мы выполнили гистологические анализы консервированных в формалине, парафиновых срезов. Результаты показали, что плевра и субплевральные области легких были инфильтрированы слоями плохо дифференцированных неопластических клеток, демонстрируя, что биолюминесцентная визуализация может эффективно обнаруживать микрометастазы у мышей (рис. 4C, D).Однако трудно предположить, сколько клеток находилось в метастазированных опухолевых массах, основываясь на зарегистрированном излучении света in vivo , поскольку излучаемый свет ослабляется и рассеивается в зависимости от пути, который он проходит через ткани, и их точного местоположения. опухоли не выяснены.

Рисунок 4. Неинвазивное обнаружение микрометастазов и гистологический анализ.

(A) Самкам мышей nu / nu прививали 5 × 10 ⁵ клеток 4T1-luc2-1A4 ортотопически в жировые подушечки брюшной молочной железы [1].Биолюминесцентные изображения были сделаны продольно. На 27 день после имплантации микрометастазы были обнаружены в легких (стрелки) (B). Легкие были изолированы на 27 день после имплантации, и было получено изображений ex vivo . (C, D) Ткани легких фиксировали в формалине и заливали парафином. Окрашивание H&E было выполнено и проанализировано. Панель D представляет собой пунктирную область на панели C.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0009364.g004

Затем мы подтвердили обнаружение метастазов с помощью биолюминесценции с помощью физического вскрытия.Мы создали вторую группу мышей Balb / c, в жировые подушечки молочной железы которых мы имплантировали 5,0 × 10 ⁴ клеток 4T1-luc2-1A4 (n = 16). Затем первичные опухоли были резецированы на 10-й день после имплантации, чтобы остановить рост опухолей в жировых подушках, и биолюминесцентные изображения были сделаны в различные временные точки после резекции (PR) (PR-дни 5, 8, 12, 15, 19, 22). Наши данные показали, что опухоли метастазировали во вторичные участки тела и продолжали там расти (рис. 5А). Рост опухоли отслеживали в долгосрочном плане путем количественной оценки сигналов биолюминесценции от всего тела (рис. 5В).Результаты продемонстрировали непрерывное увеличение светового излучения до и после резекции первичных опухолей, подтверждая, что мониторинг сигналов биолюминесценции является идеальным способом отслеживания метастазов опухоли.

Фигура 5. Метастазы опухоли 4T1-luc2-1A4 у сингенных мышей Balb / c.

(A) Метастазы опухолей 4T1-luc2-1A4 у мышей Balb / c. 5,0 × 10 ^{4 клетки} ортотопически имплантировали в жировые подушечки молочной железы мышей (n = 16) [1]. Вентральные изображения были получены в трех временных точках после имплантации (PI-дни: 4, 7, 8).Первичные опухоли были резецированы на 10-й день после операции, и изображения были сделаны снова в различные моменты времени после резекции (дни ПР: 5, 8, 12, 15, 19, 22). Показаны две репрезентативные мыши (C1M2 и C4M4). Очевидное уменьшение сигналов биолюминесценции на PR-день 12 было связано с регулировкой шкалы цветных полос (см. Панель B). Момент времени первичной резекции опухоли обозначен красной линией, разделяющей изображения до и после горшечной резекции. (B) Графики сигналов биолюминесценции от времени для мышей C1M2 и C4M4.Сигналы биолюминесценции всего тела мышей C1M2 (синие линии) и C4M4 (оранжевые линии) были количественно определены и нанесены на график в логарифмической шкале. Показаны количественные характеристики сигналов биолюминесценции до и после резекции первичных опухолей.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0009364.g005

Обсуждение

Ксенотрансплантация меченных люциферазой раковых клеток широко применяется в моделях метастазов и ортотопических моделях. Как обсуждалось выше, биолюминесцентная визуализация меченных люциферазой раковых клеток имеет дополнительное преимущество по сравнению с традиционными методами оценки опухолевой нагрузки в том, что она позволяет неинвазивно обнаруживать и количественно определять опухоли у живых животных как средство оценки эффективности лекарств [21], [22]. ], [23].Несмотря на то, что ткани обычно вносят небольшой фон в визуализацию биолюминесценции, всегда желательно увеличение светового излучения от интересующих клеток, поскольку это улучшает чувствительность обнаружения опухолевых клеток. Повышенная чувствительность позволяет обнаруживать меньшее количество опухолевых клеток, присутствующих на ранних стадиях прогрессирования опухоли. Это, вероятно, имеет важное клиническое значение, учитывая, что раннее выявление в сочетании с ранним лечением коррелирует с лучшими прогнозами.Описанные здесь инструменты позволяют сравнивать эффективность данного фармакологического вмешательства на ранних стадиях первичных опухолей, на поздних стадиях первичных опухолей и метастазах.

Здесь мы сообщаем о разработке яркой клеточной линии 4T1-luc2 с использованием усиленной люциферазы ( luc2 ) и лентивирусной технологии. В наших попытках обнаружить небольшое количество клеток мы первоначально использовали метод серийных разведений и смогли обнаружить до 3 клеток in vivo . Воодушевленные этими результатами, мы поставили перед собой задачу обнаружить одну клетку 4T1-luc2-1A4 после подкожной имплантации с помощью микроинъекции.Поскольку сигнал от клетки был расположен в непосредственной близости от кишечника, который демонстрирует внутреннюю, хотя и непостоянную автобиолюминесценцию, наши изображения отдельных клеток содержат как сигналы от клетки, так и фон от кишечника (рис. 3B). Однако, как показано на изображениях 5- и 10-клеток, когда количество клеток увеличивалось, сигналы от клеток быстро превосходили фоновые сигналы от кишечника. В ходе подготовки этой рукописи Рабинович и др. .продемонстрировали обнаружение трех сконструированных мышиных Т-лимфоцитов in vivo при подкожной трансплантации [24]. Хотя применение элегантной системы, описанной Rabinovich et al . был разработан для достижения эффективной трансдукции для определенного подтипа клеток, мы сконструировали простой универсальный вектор для трансдукции различных типов пролиферирующих и непролиферирующих клеток. Более того, насколько нам известно, наш отчет является первым, в котором показано обнаружение одной биолюминесцентной раковой клетки in vivo .

Поскольку высокий уровень экспрессии люциферазы увеличивает чувствительность обнаружения клеток у живых животных, эту технологию можно напрямую применять для обнаружения первичных и стволовых клеток in vivo , включая раковые стволовые клетки [25], [26], [27] . Вероятно, лентивирусная технология может оказаться полезной для мечения стволовых клеток, поскольку она может значительно минимизировать обработку и культивирование этих клеток. Наши результаты показали, что от 5 до 10 клеток могут расти и образовывать опухоли у животных.Эти опухоли можно контролировать с помощью биолюминесцентной визуализации со дня имплантации. Ранее клетки 4T1 трансформировали люциферазой, и их метастазы в опухоли визуализировали с помощью оптической визуализации [28]. Хотя это исследование продемонстрировало неинвазивный мониторинг метастазов опухоли, настоящее исследование позволяет раньше обнаруживать метастазы опухоли и позволяет отслеживать процесс образования опухоли прямо с момента имплантации клеток (день 0 по сравнению с 6 неделями). Кроме того, наши результаты предполагают, что маркировка и отслеживание раковых образований, растущих из одной раковой стволовой клетки, осуществимы.Кроме того, эту технологию можно также применять в более общем плане для отслеживания судьбы отдельной стволовой клетки, имплантированной животному. Кроме того, можно значительно ускорить процесс скрининга лекарственных средств на предмет наличия малых молекул или биопрепаратов, нацеленных на раковые стволовые клетки, поскольку биолюминесценция позволяет проследить рост опухолей in vivo за недель до того, как они станут пальпируемыми.

Ярко люминесцентные клетки также обеспечивают лучшие средства обнаружения микрометастазов у животных, тем самым делая модели метастазов более точными и позволяя использовать прогностические модели для оценки кандидатов в лекарства, которые направлены на борьбу с метастазами.Когда клетки 4T1-luc2-1A4 были имплантированы сингенным мышам Balb / c, мы смогли обнаружить множественные микрометастазы во вторичных участках. Когда первичные опухоли были удалены хирургическим путем через 27 дней после имплантации, мы могли проследить рост небольших метастатических опухолей в отсутствие доминирующего сигнала от первичной опухоли. Более яркие клетки могут сократить время и усилия, необходимые для выявления опухолевых масс у животного, а также могут быть полезны при изучении микросреды опухоли, особенно в сочетании с другими неинвазивными считываниями на основе флуоресценции.

На сегодняшний день мы пометили более дюжины линий опухолевых клеток человека и мышей, используя описанную лентивирусную систему (данные не показаны). Все меченые клеточные линии показали значительно более высокую экспрессию люциферазы по сравнению с клеточными линиями, меченными люциферазой предыдущего поколения и традиционными методами трансфекции (данные не показаны). Еще одно преимущество этих недавно созданных клеточных линий состоит в том, что не требуется выбора антибиотиков для поддержания стабильной экспрессии люциферазы. В отличие от популярных вирусных промоторов, таких как SV40 или CMV, промотор убиквитина С человека более устойчив к подавлению генов в клетках млекопитающих [29].Мы использовали нашу технологию для успешной маркировки адгезивных и суспензионных клеточных линий, и мы считаем, что это универсальный инструмент для эффективного введения люциферазы практически в любую клетку. Поскольку лентивирусные векторы могут вводить интересующие гены как в делящиеся, так и в неделящиеся клетки, нашу технологию можно легко применить для маркировки не только стволовых клеток, но и практически любых клеток, полученных от пациентов, которые затем можно использовать для исследований или для диагностики. целей.

Материалы и методы

Поколение лентивирусного вектора

кДНК усиленной люциферазы 2 ( luc2 ) происходила из pGL4.20 вектор (Promega, WI) [16]. КДНК люциферазы 2 вырезали с помощью Hind III и Xba I и лигировали в вектор pUB6-V5-HisB (Invitrogen, CA). Фрагмент, образованный перевариванием pUB6-luc2 Bgl II и BstB I, лигировали в модифицированный вектор pLPCX (Clontech, CA). Лентивирусный вектор, несущий промотор убиквитина С человека и кДНК luc2, был получен путем вставки фрагмента Bgl II и EcoR I из вышеуказанной конструкции в Bcl I и EcoR I модифицированного вектора pLKO.1 (Sigma-Aldrich, Миссури) [18], [18], [18] [ 19].

Культура клеток

Линия опухолевых клеток молочной железы мыши 4Т1 была получена из АТСС (Манассас, Вирджиния).Клетки выращивали в среде RPMI 1640 с высоким содержанием глюкозы (ATCC). Клетки PC-3M-luc-C6 выращивали в минимальной необходимой среде (ATCC) (для дополнительных данных) [30]. Во все среды добавляли 10% фетальную бычью сыворотку (Hyclone, UT) без антибиотиков. Кривые роста получали путем посева 50 000 клеток в колбы Т25. В каждый момент времени клетки обрабатывали трипсином и подсчитывали с помощью автоматического счетчика клеток (Nexcelom, MA). Общее количество клеток наносили на график в логарифмической шкале.

Трансфекция и создание стабильной клеточной линии

Лентивирусный вектор трансфицировали липидным методом в клетки 4T1.Трансфицированные клетки отбирали с использованием пуромицина (2 мкг / мл). Выделенные клоны проверяли на их люциферазную активность с использованием IVIS Spectrum (Caliper Life Sciences, MA). Для выделения клонов единичных клеток клетки подвергали ограниченному разведению. Индивидуальные клоны проверяли на активность люциферазы с использованием IVIS® Spectrum. Отобранные клоны поддерживали без пуромицина в течение 4 недель, и их световое излучение контролировали каждую неделю.

Имплантация мышей и опухолевых клеток

Все процедуры по уходу за животными и имплантации опухолевых клеток следовали утвержденным протоколам и руководствам для животных Институционального комитета по уходу и использованию животных в Caliper Life Sciences и Momenta Pharmaceuticals.Перед имплантацией все опухолевые клетки дали отрицательный результат на присутствие микоплазм и мышиных патогенов. Ортотопическую имплантацию клеток 4T1-luc2-1A4 в жировые подушечки молочной железы мышей nu / nu или Balb / c проводили, когда животные находились под изофлурановой анестезией [1]. Подкожные имплантации выполнялись путем инъекции клеток под кожу в задних боковых областях. Имплантация одной и десяти клеток выполнялась с использованием специальной стеклянной капиллярной пипетки с ручной аспирацией. После имплантации пипетки исследовали под микроскопом, чтобы убедиться, что все клетки были имплантированы.Для каждой было выполнено четыре имплантации, одна и десять имплантаций. Для данных, показанных на рисунке 2, было выполнено шесть имплантаций, по три мыши в каждой из двух групп.

In Vitro и In Vivo Биолюминесцентная визуализация

Для анализа люциферазы in vitro клетки высевали на 24-луночные планшеты с черными стенками при начальной концентрации 50 000 клеток / лунку. Клетки выращивали в течение ночи на обычной питательной среде. Через 24 часа обычную среду заменяли средой, содержащей D-люциферин (150 мкг / мл).Изображения биолюминесценции получали сразу после добавления субстрата в клетки с использованием IVIS Spectrum. Световые потоки были количественно определены с использованием Living Image 3.0 (Caliper Life Sciences, Аламеда, Калифорния). Перед визуализацией in vivo мышей анестезировали изофлураном. Затем внутрибрюшинно вводили раствор D-люциферина (150 мг / кг). Изображение мышей получали с помощью IVIS Spectrum. Биолюминесцентные сигналы количественно оценивали с помощью Living Image 3.0 (Caliper Life Sciences, Аламеда, Калифорния).

Гистологические анализы

Самок мышей nu / nu инокулировали 5 × 10 ⁵ клеток 4T1-luc2-1A4 ортотопически в жировую подушку брюшной молочной железы (n = 9). На 27 день после имплантации ткани легких были изолированы и проанализированы гистопатологически. Ткани фиксировали и заливали парафином. Было проведено окрашивание H&E. Препараты исследовал сертифицированный патолог.

Вспомогательная информация

Рисунок S1.

(A) Получение клеток 4T1-luc2.Клетки 4T1 опухоли молочной железы мыши трансфицировали лентивирусным вектором, содержащим усиленную люциферазу 2 [18], [31]. Выделяли клоны, устойчивые к пуромицину, и их экспрессию люциферазы проверяли с помощью биолюминесценции. Первоначальное клонирование дало 8 клонов 4T1-luc2. Активность люциферазы измеряли с использованием IVIS Spectrum (биннинг: med, f stop: 1, время экспозиции: 1 секунда). Общий поток (фотоны / сек) определяли количественно с использованием программного обеспечения Living Image 3.0. Стабильность люциферазной активности клонов 4T1-luc2 контролировали в течение 4 недель, и их световое излучение измеряли еженедельно.Все клоны показали световое излучение более 3000 фотонов / сек / ячейку в течение всего периода тестирования. (B) Кривые роста клонов 4T1-luc2-C27 и 4T1-luc2-C38 по сравнению с родительскими клетками 4T1. Клетки выращивали в течение 4 дней в обычной ростовой среде без пуромицина. Общее количество ячеек с течением времени отображается в логарифмической шкале. Обе клеточные линии показали похожие модели роста и время удвоения. (C, D) Рост клонов 4T1-luc2-C26 и 4T1-luc2-C36 по сравнению с родительскими клетками 4T1 в присутствии D-люциферина.Клетки получали D-люциферин один раз в день (150 мкг / мл / день, C) или два раза в день (300 мкг / мл / день, D), соответственно. Клетки собирали в каждый момент времени и подсчитывали. Присутствие избытка D-люциферина не влияло на общий характер роста клеток 4T1-luc2.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0009364.s001

(1,59 МБ TIF)

Рисунок S2.

(A) Культуру с ограниченным разведением проводили с клетками 4T1-luc2-1A4 в четырех 96-луночных планшетах. Клетки выращивали в течение 10 дней и исследовали их экспрессию люциферазы, добавляя D-люциферин в культуральную среду.Биолюминесцентные изображения были сделаны немедленно. Лунки, которые не проявляли люциферазной активности, не содержали живых клеток.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0009364.s002

(5,36 МБ TIF)

Рисунок S3.

(A-D) Клетки 4T1-luc2-C26 и PC3M-luc-C6 подкожно имплантировали в боковые области мышей SCID-bg. Было имплантировано равное количество клеток для каждой клеточной линии. Биолюминесцентные изображения были получены через 20 часов после имплантации с использованием IVIS Spectrum.На вкладышах указано количество имплантированных клеток. Условия визуализации (A, B; FOV: B, биннинг: малый, диафрагма: 1, время экспозиции: 30 секунд; C, D; FOV: B, биннинг: малое, диафрагма: 1, время экспозиции: 5 мин).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0009364.s003

(2,72 МБ TIF)

Рисунок S4.

(A, B) Биолюминесцентный сигнал одиночной клетки 4T1-luc2-1A4 in vivo . Самке мыши nu / nu имплантировали одну клетку 4T1-luc2 подкожно в дорсальную область.Мыши получали изображение перед инъекцией D-люциферина (A). Через десять минут после инъекции D-люциферина было сделано полное изображение мыши (FOV; C, биннинг; маленький, f стоп; 1, время экспозиции; 5 мин) (B). Пунктирный кружок показывает сигнал от имплантированной клетки. (C) Изображение всей мыши ( nu / nu ) с имплантированными десятью клетками 4T1-luc2-1A4. Точное количество клеток собирали пипеткой из стеклянных капилляров и вводили в спину мыши подкожно через разрез кожи. (D) Увеличенное изображение пунктирной области с панели C.Пунктирный кружок показывает сигнал от 10 ячеек. Звездочка (*) указывает место разреза кожи.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0009364.s004

(3,57 МБ TIF)

Благодарности

Авторы благодарят докторов наук. Нин Чжан, Виктор Нинов, Тамара Трой, Джей Уэлен и Чейнси Куо за полезные обсуждения. Авторы также благодарят Кшитиджа Моди и Минал Тападиа за вычитку рукописи.

Вклад авторов

Задумал и спроектировал эксперименты: JBK.Проведены эксперименты: JBK KU AA SL EC AB RC AG ZL HZ TKK. Проанализированы данные: JBK EC BR HZ TKK PL. Предоставленные реагенты / материалы / инструменты анализа: BR KC RC AG. Написал статью: JBK PL.

Ссылки

1. Jenkins DE, Oei Y, Hornig YS, Yu SF, Dusich J, et al. (2003) Биолюминесцентная визуализация (BLI) для улучшения и уточнения традиционных мышиных моделей роста и метастазирования опухолей. Clin Exp Metastasis 20: 733–744.
2. Hirsch FR, Franklin WA, Gazdar AF, Bunn PA Jr (2001) Раннее обнаружение рака легких: клинические перспективы последних достижений в биологии и радиологии.Clin Cancer Res 7: 5–22.
3. Holmgren L, O’Reilly MS, Folkman J (1995) Покой микрометастазов: сбалансированная пролиферация и апоптоз в присутствии подавления ангиогенеза. Nat Med 1: 149–153.
4. Killion JJ, Radinsky R, Fidler IJ (1998) Ортотопические модели необходимы для прогнозирования терапии трансплантируемых опухолей у мышей. Раковые метастазы Rev 17: 279–284.
5. Vaupel P, Kallinowski F, Okunieff P (1989) Кровоток, снабжение кислородом и питательными веществами, а также метаболическая микросреда опухолей человека: обзор.Cancer Res 49: 6449–6465.
6. Соммер Дж., Агости В., Элерс И., Росси Ф., Корбачоглу С. и др. (2003) Опухоли стромы желудочно-кишечного тракта на модели мышей путем направленной мутации тирозинкиназы рецептора Kit. Proc Natl Acad Sci U S A 100: 6706–6711.
7. Zheng M, Lu R, Che X, Li J, Zhou C и др. (2006) Тиросерватидная терапия роста опухоли, инвазии и метастазирования карциномы легкого Льюиса и карциномы легкого человека A549. Онкология 70: 418–426.
8.Адам М., Байер С., Хенке Дж., Гросу А., Моллс М. и др. (2008) Тирапазамин плюс цисплатин и облучение на мышиной модели: улучшенный контроль опухоли за счет повышенной токсичности. J Cancer Res Clin Oncol 134: 137–146.
9. Troy T, Jekic-McMullen D, Sambucetti L, Rice B (2004) Количественное сравнение чувствительности обнаружения флуоресцентных и биолюминесцентных репортеров в моделях на животных. Mol Imaging 3: 9–23.
10. Song H, Shahverdi K, Huso DL, Wang Y, Fox JJ и др.(2008) Модель метастатического рака груди у трансгенных мышей с иммунотолерантностью HER-2 / neu. Clin Cancer Res 14: 6116–6124.
11. Рода А., Гвардигли М., Пасини П., Мирасоли М. (2003) Биолюминесценция и хемилюминесценция в скрининге лекарств. Anal Bioanal Chem 377: 826–833.
12. Фомичева Е.В., Тернер, Эдвардс Т.Г., Хофф Дж., Арден Э. и др. (2008) Двойная кислородно-чувствительная векторная система для надежной индукции регулируемых гипоксией / ишемией генов в сердечной мышце in vitro и in vivo.Mol Ther 16: 1594–1601.
13. Цао Ю.А., Уэйджерс А.Дж., Бейлхак А., Душич Дж., Бахманн М.Х. и др. (2004) Сдвиг очагов кроветворения при восстановлении из единичных стволовых клеток. Proc Natl Acad Sci U S A 101: 221–226.
14. Ray S, Paulmurugan R, Patel MR, Ahn BC, Wu L, et al. (2008) Неинвазивная визуализация экспрессии терапевтических генов с использованием стратегии двунаправленной транскрипционной амплификации. Мол Тер 16: 1848–1856.
15. Айер М., Салазар Ф. Б., Льюис Х, Чжан Л., Кэри М. и др.(2004) Неинвазивная визуализация повышенной экспрессии генов, специфичных для простаты, с использованием двухэтапного лентивирусного вектора на основе транскрипционной амплификации. Mol Ther 10: 545–552.
16. Promega (2007) репортерные векторы люциферазы pGL4. Техническое руководство Promega. TM259.
17. Шорпп М., Ягер Р., Шелландер К., Шенкель Дж., Вагнер Э. Ф. и др. (1996) Промотор убиквитина С человека управляет повсеместной высокой экспрессией трансгенов у мышей. Nucleic Acids Res 24: 1787–1788.
18. Zufferey R, Nagy D, Mandel RJ, Naldini L, Trono D (1997) Множественно ослабленный лентивирусный вектор обеспечивает эффективную доставку генов in vivo. Nat Biotechnol 15: 871–875.
19. Пфейфер А., Кесслер Т., Силлетти С., Череш Д.А., Верма И.М. (2000) Подавление ангиогенеза лентивирусной доставкой PEX, некаталитического фрагмента матриксной металлопротеиназы 2. Proc Natl Acad Sci U S. A 97: 12227–12232.
20. Scatena CD, Hepner MA, Oei YA, Dusich JM, Yu SF, et al.(2004) Визуализация биолюминесцентных опухолей LNCaP-luc-M6: новая модель на животных для исследования метастатического рака простаты человека. Простата 59: 292–303.
21. Uhrbom L, Nerio E, Holland EC (2004) Рассмотрение требований к поддержанию опухоли с использованием биолюминесцентной визуализации пролиферации клеток на модели глиомы мыши. Нат Мед 10: 1257–1260.
22. Чжан Г.Дж., Сафран М., Вэй В., Соренсен Э., Лассота П. и др. (2004) Биолюминесцентная визуализация ингибирования Cdk2 in vivo.Нат Мед 10: 643–648.
23. Бракенхилм Э., Бертон Дж. Б., Джонсон М., Чаваррия Н., Моризоно К. и др. (2007) Модуляция метастазов с помощью лимфангиогенного переключателя при раке простаты. Int J Cancer 121: 2153–2161.
24. Рабинович Б.А., ЕЙ, Этто Т., Чен Дж.К., Левицкий Н.И. и др. (2008) Визуализация менее 10 мышиных Т-клеток с усиленной люциферазой светлячка на иммунокомпетентных мышиных моделях рака. Proc Natl Acad Sci U S A 105: 14342–14346.
25.Кондо Т., Сетогучи Т., Тага Т. (2004) Сохранение небольшой субпопуляции раковых стволовых клеток в клеточной линии глиомы C6. Proc Natl Acad Sci U S A 101: 781–786.
26. Дилла С.Дж., Бевилья Л., Парк И.К., Шартье С., Раваль Дж. И др. (2008) Стволовые клетки колоректального рака обогащаются ксеногенными опухолями после химиотерапии. PLoS ONE 3: e2428.
27. Далерба П., Дилла С.Дж., Парк И.К., Лю Р., Ван Х и др. (2007) Фенотипическая характеристика стволовых клеток колоректального рака человека.Proc Natl Acad Sci U S A 104: 10158–10163.
28. Tao K, Fang M, Alroy J, Sahagian GG (2008) Вообразимая модель 4T1 для исследования рака груди на поздней стадии. BMC Cancer 8: 228.
29. Джилл Д.Р., Смит С.Е., Годдард К.А., Прингл И.А., Хиггинс С.Ф. и др. (2001) Повышение устойчивости экспрессии гена легких с использованием плазмид, содержащих промотор убиквитина С или фактора элонгации 1альфа. Джин Тер 8: 1539–1546.
30. Kuo C, Coquoz O, Troy TL, Xu H, Rice BW (2007) Трехмерная реконструкция биолюминесцентных источников in vivo на основе мультиспектральных изображений.J Biomed Opt 12: 024007.
31. Пфейфер А., Кесслер Т., Ян М., Баранов Е., Кутстра Н. и др. (2001) Трансдукция клеток печени лентивирусными векторами: анализ на живых животных с помощью флуоресцентной визуализации. Мол Тер 3: 319–322.

Метаболизм глутатиона в развитии рака и устойчивости к лечению | Журнал клеточной биологии

Активные формы кислорода (ROS; H ₂ O ₂, O ₂ -, OH- и т. Д.) продуцируются аэробными клетками в физиологических условиях. Эти соединения, когда они производятся в больших количествах при стрессе, могут привести к обширному повреждению ДНК, белков и мембран плазмы / органелл в клетке (Olinski et al., 1992; Ames et al., 1993; Shigenaga et al., 1994. ). Множественные механизмы репарации удаляют повреждения ДНК и в конечном итоге разрушают неправильно свернутые белки (Ames et al., 1993; Shigenaga et al., 1994). Однако продукция ROS значительно увеличивается в раковых клетках из-за митохондриальной дисфункции, измененного метаболизма и частых генетических мутаций, приводящих к накоплению большого количества окисленных белков, ДНК и липидов (Demple and Harrison, 1994).Следовательно, в качестве адаптивного ответа раковые клетки содержат повышенные уровни молекул, поглощающих АФК. Антиоксидантные механизмы включают усиленную экспрессию молекул, которые могут модулировать накопление ROS как ферментативными, так и неферментативными способами (Toyokuni et al., 1995; Gupta et al., 2014). Ферментативные антиоксидантные реакции включают повышенное содержание супероксиддисмутазы или каталазы (Sies, 1993; Ighodaro and Akinloye, 2017; Wang et al., 2018). Кроме того, также стимулируются другие небольшие гены, кодирующие редокс-белок, которые генерируют тиоредоксины, гемоксигеназы и пероксиредоксины (Sies, 1993).

Глутатион (GSH) — это антиоксидант, который действует как поглотитель свободных радикалов и детоксифицирующий агент в клетках. Он полезен во множестве процессов, клеточной пролиферации, делении и дифференцировке клеток и является наиболее часто повышенным метаболитом, обнаруживаемым во время окислительного стресса. В физиологических условиях восстановленный GSH является основной формой, присутствующей в концентрации от 10 до 100 раз выше, чем окисленные разновидности (GSH дисульфид [GSSG]).При окислительном стрессе GSH превращается GSH-зависимыми пероксидазами в GSSG после реакции с ROS. GSH синтезируется в цитозоле и затем распределяется по различным органеллам. Помимо классической антиоксидантной роли, GSH также выполняет несколько органеллоспецифичных функций, подробно обсуждаемых Lushchak (2012). Более 10% синтезированного GSH находится в митохондриях, где он реагирует с АФК и предотвращает апоптоз. В субклеточных компартментах поддерживается высоко восстановительная среда, например.g., цитозоль, ядро, митохондриальный матрикс и пероксисома, чтобы способствовать правильному сворачиванию и активности белка. Напротив, ER поддерживает сильно окисленную среду и повышенные уровни GSSG. Это поддерживает функциональную конформацию пептидов, особенно для добавления дисульфидных связей к возникающим секреторным и мембранным белкам. Кроме того, высокое соотношение GSH / GSSG в ядре обеспечивает синтез дезоксирибонуклеотидов из рибонуклеотидов и поддержание сульфгидрильных групп в белках для правильного биосинтеза нуклеиновых кислот и репарации ДНК.Это соотношение в каждой органелле также отражает метаболические пути и возникающие в результате окислительные нагрузки, с которыми они сталкиваются на протяжении фаз роста клеток. Кроме того, GSH участвует в (а) детоксикации ксенобиотиков, (б) поддержании пулов цистеина, (в) созревании железо-серных кластеров различных белков и (г) регуляции факторов транскрипции, связанных с передачей сигналов окислительно-восстановительного потенциала (Estrela et al. ., 2006; Traverso et al., 2013). GSH помогает поддерживать белковые сульфгидрильные группы в восстановленной форме, поддерживая баланс окислительно-восстановительного потенциала тиола в клетках.В результате нарушения гомеостаза GSH часто обнаруживаются при множественных патологиях, например, нейродегенеративных расстройствах, раке, муковисцидозе, заболеваниях печени и диабете (Forman et al., 2009).

Что касается рака, GSH играет двоякую роль в его прогрессировании. Это имеет решающее значение для удаления и детоксикации канцерогенов, и изменения в этом пути могут иметь огромное влияние на выживаемость клеток. Однако повышенные уровни GSH в опухолевых клетках способны защищать такие клетки при раке костного мозга, молочной железы, толстой кишки, гортани и легких, придавая устойчивость к нескольким химиотерапевтическим препаратам (Wu et al., 2004; Лу, 2009). Влияние GSH на окислительный стресс и начало и прогрессирование рака также усложняется из-за двойной роли ROS в этих процессах. Умеренные уровни АФК могут поддерживать выживание и пролиферацию за счет активации сигнальных путей, которые могут способствовать росту опухоли в стрессовых микросредах опухоли (рис. 1). Однако чрезмерное накопление АФК, отказ надлежащих механизмов очистки или дефицит антиоксидантов приводят к серьезному повреждению биомолекул, вызывая гибель клеток.Следовательно, раковые клетки должны поддерживать сложный баланс уровней антиоксидантов, чтобы выжить. Кроме того, ROS способны регулировать способность раковых клеток метастазировать в отдаленные места. Данные, подтверждающие это, показали, что повышенный уровень GSH способствует метастазированию как при меланоме, так и при раке печени (Carretero et al., 1999; Huang et al., 2001). В дополнение к GSH, другие распространенные антиоксиданты, N, -ацетилцистеин (NAC) и аналог витамина E тролокс, способствуют отдаленным метастазам (Carretero et al., 1999; Хуанг и др., 2001; Сайин и др., 2014). Эти данные подчеркивают двойную роль ROS и GSH в инициации и прогрессировании рака (Galadari et al., 2017).

Сварка | Онкологический совет

Сварка и рак

Есть много разных способов сварки; но большинство из них относятся к категории электродуговой сварки или газокислородной сварки.

Сварочные работы создают множество опасностей из-за образования загрязняющих веществ в сварочном дыме и ультрафиолетового (УФ) излучения сварочной дуги.Оба они являются канцерогенами группы 1, что означает, что они могут вызывать рак у человека. Воздействие этих паров или УФ-излучения может увеличить риск развития меланомы глаза, легких и других видов рака.

Риск рака от сварки зависит от:

тип используемого сварочного процесса
свариваемый материал (включая любые покрытия поверхности или обработку металла)
Загрязняющие вещества в воздухе (например, пары очистителей или обезжиривателей на основе растворителей)
расходные материалы используемые
защитный флюс или газ
настройки мощности
в месте проведения сварочных работ (вне помещения или в закрытом помещении)
отрезок времени сварки.

Загрязняющие вещества в воздухе

Сварочный дым образуется, когда металл нагревается выше точки кипения. Металл охлаждается, а затем конденсируется с образованием дыма и мелких частиц, которые можно вдыхать.

Некоторые сварочные пары легко увидеть, но многие из них невидимы. В 2017 году все виды сварочного дыма были отнесены к канцерогенам группы 1. Сварочный дым содержит потенциальные канцерогенные вещества (канцерогены), в том числе оксиды металлов, силикаты и фториды.

Таблица 1.Обычные канцерогенные сварочные пары

910 910 910 Оксиды

ТИП ДЫМА	ИСТОЧНИК	КАНЦЕРОГЕН
Бериллий	Отвердитель Бериллий	Отвердитель, содержащийся в сплавах меди, магния и алюминия	Нержавеющая сталь, содержащая кадмий или гальванические материалы, цинковый сплав	Предполагаемый канцероген
Хром	Большинство нержавеющих сталей и высоколегированных материалов, сварочные стержни.Также используется в качестве материала покрытия	Некоторые формы являются канцерогенными веществами (шестивалентный хром)
Никель	Нержавеющая сталь, никель-хром, никель-медь и другие высоколегированные материалы, сварочные стержни и гальваническая сталь	Повышенный уровень рака риск отмечен в профессиях, отличных от сварщика

Рис. 1. При разных типах сварки выделяется разное количество сварочного дыма

Ультрафиолетовое (УФ) излучение

УФ-излучение также является известным канцерогеном.Электрическая дуга и лазерная сварка испускают УФ-излучение. Во время сварки вы подвергаетесь прямому воздействию ультрафиолетового излучения дуги и ультрафиолетового излучения, которое отражается от твердых и гладких поверхностей вокруг вас. Воздействие может вызвать меланому глаза, «вспышку сварщика» или «дугу глаза» (болезненное воспаление роговицы), катаракту (помутнение хрусталика глаза) и ожоги открытых участков кожи.

Эффект УФ-излучения зависит от:

вид сварки (электродуговая или лазерная сварка)
интенсивность излучения
как долго вы подвергаетесь радиации
расстояние от места сварочного процесса.

Эффективное управление

Все рабочие места в Австралии должны соблюдать законы об охране труда и технике безопасности. Они незначительно различаются между штатами и территориями, но обязанности заботиться о работодателях и обязанности работников по всей Австралии схожи:

работодатели обязаны обеспечивать здоровье и безопасность своих работников на рабочем месте
работник должен заботиться о своем здоровье и безопасности
работники не должны отрицательно влиять на здоровье и безопасность других людей
работник должен соблюдать все разумные инструкции и политику в области охраны труда и здоровья.

Безопасная работа Свод правил по сварочным процессам Австралии и Пределы воздействия загрязняющих веществ в воздухе объясняют, как работодатели и работники могут контролировать риски при сварке, чтобы минимизировать воздействие загрязняющих веществ в воздухе. Руководство по минимизации выбросов паров от Weld Australia также содержит дополнительную информацию о контроле за загрязнителями, переносимыми по воздуху. Сводка рекомендуемых элементов управления приведена в таблице 2. Для получения полной информации см. Вышеупомянутые документы.

При отсутствии адекватных мер контроля сварщики и люди, работающие вблизи сварочных работ, подвергаются повышенному риску воздействия канцерогенов.

Устранение или снижение подверженности выявленным опасностям с помощью иерархии контроля (рис. 2) и внедрение процесса управления рисками. Рабочие всегда должны быть вовлечены в процесс управления рисками для выявления опасностей и выполнения мер контроля, подходящих для рабочего места. Обучение рабочих опасностям, а также действующим политикам и процедурам управления ими также является требованием охраны труда и техники безопасности.

Рисунок 2. Иерархия управления рисками

Мониторинг воздуха в зоне дыхания сварщика можно использовать для проверки уменьшения количества загрязнений при сварке с помощью органов управления. Профессиональный гигиенист может помочь с мониторингом воздуха.

Таблица 2. Краткое изложение средств контроля опасностей при сварке

ДЕЯТЕЛЬНОСТЬ	CONTROL
Подготовка поверхности	Удалите с поверхностей всю краску или покрытия перед сваркой.Не используйте для очистки хлорированные растворители.
Сварочный процесс и расходные материалы	По возможности выбирайте сварочный процесс и расходные материалы, которые производят меньше дыма и / или УФ-излучения. Измените настройки мощности, чтобы уменьшить количество дыма.
Сварочный дым и газы	Лучшей практикой является сочетание местной вытяжной и принудительной вентиляции с разрежением. Естественная вентиляция не должна использоваться в качестве меры контроля.
Средства индивидуальной защиты (СИЗ)	Используйте средства защиты органов дыхания с подачей воздуха или очисткой воздуха, которые фильтруют твердые частицы и озон.Их следует подбирать индивидуально для каждого работника. Используйте маску, закрывающую все лицо, с линзой с УФ-фильтром. Носите длинные брюки и рубашки с длинными рукавами без манжет из негорючего материала, закрывая все открытые участки кожи; рекомендуется сварочная кожа. Надевайте изолированные огнестойкие сварочные перчатки и кожаные ботинки со стальным носком.
Изоляция	Сварочные работы отделены от других работ. Многие рабочие, выполняющие сварку в одном помещении, могут увеличить количество сварочного дыма.Используйте сварочные экраны, чтобы защитить других рабочих от сварочной дуги. По возможности автоматизируйте сварочные работы.
Совместное использование операций	Ротация рабочих задач между работниками. Это поможет сократить продолжительность воздействия дыма, газов и УФ-излучения.

Мониторинг здоровья используется для выявления работников, которые имеют повышенный риск развития заболеваний в результате работы. Если методы контроля отсутствуют, мониторинг состояния здоровья может потребоваться в соответствии с законодательством по охране труда и технике безопасности.

По любым вопросам, связанным с адекватностью мер контроля на вашем рабочем месте, обращайтесь:

руководитель вашего рабочего места или руководство (если вы являетесь сотрудником)
ваш представитель по охране труда и технике безопасности на рабочем месте или представитель профсоюза
Регуляторы по охране труда и технике безопасности на штатах и территориях
Safe Work Australia

Как мне обнаружить рак на ранней стадии и снизить риск рака?

Если вы беспокоитесь о своем здоровье или думаете, что могли подвергнуться воздействию вызывающего рак агента, важно поговорить со своим врачом или медицинским работником.Чтобы узнать, что вы можете сделать для создания рабочего места, которое поддерживает выбор здорового образа жизни и помогает снизить риск рака, обратитесь в Cancer Council 13 11 20.

Другие полезные сайты

UK Health and Safety Executive: Руководство COSHH для конкретных задач по сварке, резке и смежным работам

Сварочный дым — защита ваших рабочих

Сварочный дым — вам нужна вытяжка или RPE?

Источники

Международное агентство по изучению рака.Хром, никель и сварка, в монографиях МАИР по оценке канцерогенных рисков для человека. 1990 г., МАИР, Всемирная организация здравоохранения: Лион, Франция.
Международное агентство по изучению рака. Радиация в монографиях МАИР по оценке канцерогенных рисков для людей. 2012 г., IARC Всемирная организация здравоохранения: Лион, Франция.
Holly, E.A., et al. Внутриглазная меланома, связанная с профессией и химическим воздействием. Эпидемиология. 1996. 7 (1): p.55-61.
Gunnel, P., et al. Факторы профессионального риска, ультрафиолетовое излучение и меланома глаза: исследование случай-контроль во Франции. Причины рака и борьба с ними. 12 (5): с. 451-459.
Vajdic, C.M., et al. Воздействие солнца предсказывает риск развития меланомы глаза в Австралии. Международный журнал рака, 2002. 101 (2): стр. 175-182.
Тенкате Т. Оптическая радиационная опасность сварочной дуги. Rev Environ Health, 1998. 13 (3): p. 131-146.
Kendzia, B., et al. Сварка и рак легких в объединенном анализе исследований случай-контроль. Американский журнал эпидемиологии, 2013. 178 (10): с. 1513-1525.
Международное агентство по изучению рака. Кадмий и соединения кадмия в монографиях МАИР по оценке канцерогенных рисков для людей. 2012 г., IARC Всемирная организация здравоохранения: Лион, Франция.
Международное агентство по изучению рака. Соединения хрома (VI) в монографиях МАИР по оценке канцерогенных рисков для людей.2012 г., IARC Всемирная организация здравоохранения: Лион, Франция.
Международное агентство по изучению рака. Никель и соединения никеля в монографиях МАИР по оценке канцерогенных рисков для людей. 2012, IARC Всемирная организация здравоохранения: Лион: Франция.
Канадский центр гигиены и безопасности труда. OSH отвечает на информационные бюллетени: Сварка — дымы и газы. 2014 г., Канадский центр гигиены и безопасности труда: Онтарио, Канада.
Safe Work Australia.Сварочные процессы — Свод правил 2012 г. Безопасная работа Австралия: Канберра, АКТ.
Руководство по охране труда и технике безопасности. Сварочный дым — снижение риска. Мерсисайд. 2015 г., руководитель отдела здравоохранения и безопасности: Мерсисайд, Великобритания.
Энтони Дж. Диксон, Брайан Ф. Диксон. Ультрафиолетовое излучение от сварки и возможный риск злокачественных новообразований кожи и глаз. Медицинский журнал Австралии, 2004. 181 (3): стр. 155-7.
Австралийское агентство по радиационной защите и ядерной безопасности.Стандарт радиационной защиты от профессионального воздействия ультрафиолетового излучения. 2006, ARPANSA: Canberra, ACT.
Типовой закон о безопасности и гигиене труда 2011 г., № 137. 2011 г .: Канберра, АКТ.
Safe Work Australia. Как управлять рисками для здоровья и безопасности труда — Свод правил. 2011 г., Безопасная работа в Австралии: Канберра, АКТ.

Значение герметичности кровеносных сосудов при раке

Реферат

Несмотря на значительные достижения в области ангиогенеза опухолей, относительно мало внимания уделяется проницаемости кровеносных сосудов в опухолях.Неплотность сосудов опухоли хорошо задокументирована на экспериментальных моделях опухолей и при раке человека, но механизм плохо изучен, как и влияние на скорость роста рака, предрасположенность к метастазированию и доставку макромолекулярных терапевтических средств к опухолевым клеткам. Шестнадцать экспертов в области биологии рака и биологии сосудов собрались на конференции Уильяма Гая Форбека «Фокус на будущее», чтобы обсудить эту тему. Встреча была первой в своем роде, посвященной значению герметичности кровеносных сосудов при опухолях.Участники обсудили клеточную основу герметичности сосудов опухоли, эндотелиальную барьерную функцию кровеносных сосудов, мониторинг герметичности сосудов опухоли, медиаторы эндотелиальной проницаемости, последствия герметичности сосудов опухоли, геномный анализ сосудистых мишеней, нацеливание лекарств на сосуды опухоли и терапевтические манипуляции сосуды опухоли. Группа пришла к выводу, что необходимо более полное понимание базовой биологии сосудов опухоли, чтобы полностью оценить последствия утечки сосудов при раке.Этому пониманию будут способствовать новые исследовательские инструменты, такие как прижизненные измерения кровотока в опухоли и герметичности сосудов, фаговый дисплей in vivo, , магнитно-резонансная томография и использование селективных ингибиторов ангиогенеза.

Введение

Существует общее мнение, что кровеносные сосуды в опухолях ненормальны. Одним из проявлений этой аномалии является дефектный и негерметичный эндотелий. Герметичность кровеносных сосудов не только влияет на внутреннюю среду опухолей и, возможно, на скорость ангиогенеза, но также регулирует доступ терапевтических антител, векторов генной терапии и липосомальных систем доставки лекарств к опухолевым клеткам.Целью конференции Уильяма Гая Форбека «Фокус на будущее» было предоставить возможность ученым, изучающим барьерную функцию кровеносных сосудов, объединить усилия с учеными, работающими над ангиогенезом опухолей и другими областями биологии рака, чтобы определить современное состояние и значение герметичности кровеносных сосудов при раке и наметить направления будущих исследований в этой области.

В начале конференции д-р Дональд М. Макдональд (Калифорнийский университет, Сан-Франциско, Калифорния) предложил участникам рассмотреть пять вопросов: ( a ) Почему кровеносные сосуды в опухолях протекают и каковы последствия негерметичности? ( b ) Как можно оценить герметичность кровеносных сосудов при экспериментальных опухолях и раке человека? ( c ) Какие существуют стратегии для нацеливания терапевтических средств на сосуды опухоли с целью нормализации или разрушения сосудов? ( d ) Было бы терапевтически выгодно уменьшить утечку, и если да, то как этого можно было бы достичь? ( e ) Может ли «нормализация» структуры и функции сосудов опухоли быть полезной при лечении рака, и если да, то как этого можно достичь?

Клеточная основа герметичности опухолевого сосуда

Большинство сосудов опухоли имеют неправильный диаметр и паттерн ветвления и не вписываются в обычную классификацию артериол, капилляров или венул.Даже у крупнокалиберных сосудов тонкие дырявые стенки. Доктор Питер Балук (Калифорнийский университет, Сан-Франциско, Калифорния), изучающий морфологические аномалии сосудов опухоли, изобразил структурную неоднородность, неоднородность и неплотность сосудов опухоли как причудливые признаки склонности к нарушению всех норм нормального поведения. строительство кровеносных сосудов. Хотя в некоторых сообщениях предполагается, что в сосудах опухоли отсутствуют эндотелиальные клетки, перициты (настенные клетки) или базальная мембрана, недавние исследования показывают, что все эти компоненты присутствуют, но ненормальны. (1 , 2) .Эндотелиальные клетки, хотя и присутствуют на большинстве, если не на всех сосудах опухоли, не образуют нормальный монослой и, следовательно, не имеют нормальной барьерной функции. (1 , 3) . Клетки неорганизованы и имеют неправильную форму. Эндотелиальные клетки некоторых сосудов опухоли перекрывают друг друга, имеют просветные выступы и дают начало аблюминальным отросткам. Клетки также имеют неплотные межклеточные связи и очаговые межклеточные отверстия, которые, вероятно, ответственны за большую часть неплотности сосудов. Размер отверстий (<2 мкм в диаметре) между эндотелиальными клетками, исследованный с помощью сканирующей электронной микроскопии, соответствует функциональным измерениям порового размера сосудов опухоли.Перициты с α-гладкомышечным актином и / или иммунореактивностью десмина присутствуют в большинстве сосудов опухоли, но они имеют ненормально слабую связь с эндотелиальными клетками, и у многих есть цитоплазматические процессы, которые проникают глубоко в ткань опухоли. (2) . Базальная мембрана сосудов, визуализируемая коллагеном IV типа, ламинином, фибронектином или иммунореактивностью нидогена, покрывает большую часть поверхности сосудов опухоли. Тем не менее базальная мембрана имеет ненормально слабую ассоциацию с эндотелиальными клетками и перицитами и состоит из нескольких слоев.Избыточные слои базальной мембраны представляют собой историческую запись непрерывного ремоделирования сосудов.

Доктор Рагху Каллури (Гарвардская медицинская школа, больница Бет Исраэль, Гарвардская медицинская школа, Бостон, Массачусетс) подробно остановился на аномальной структуре и составе базальной мембраны сосудов опухоли. Базальная мембрана сосудов, которая образована эндотелиальными клетками, перицитами и гладкомышечными клетками кровеносных сосудов и окружает их, отличается от других компонентов внеклеточного матрикса. (4 , 5) .Базальная мембрана сосудов состоит на 50% из коллагена IV типа и на 30% из ламинина, плюс значительные количества нидогена (энтактина), фибронектина и других белков и протеогликанов гепарансульфата. Аналитические методы выявили различия между базальной мембраной сосудов и другими базальными мембранами. Кроме того, состав базальной мембраны сосудов не одинаков во всех кровеносных сосудах. В настоящее время признано, что базальная мембрана сосудов претерпевает важные изменения при заболевании и может отличаться от сосудов опухоли.Например, делеция гена цепи ламинина α4 приводит к кровотечению у мышей с нокаутом, а также к кровотечению и нарушению роста сосудов в анализах ангиогенеза. Некоторые ламинины, содержащие цепь α4 (, например, , ламинин-8), связаны с опухолевыми сосудами.

Базальная мембрана также является потенциальным источником про- и антиангиогенных молекул. Некоторые структурные белки базальной мембраны могут быть расщеплены ферментами с образованием более мелких молекул с сильным действием. Одним из примеров является эндостатин, который представляет собой COOH-концевой фрагмент коллагена XVIII.Другой, тумстатин, представляет собой неколлагеновый-1 домен цепи α3 коллагена IV типа. Третий пример, arresten, представляет собой неколлагеновый-1 домен цепи α1 коллагена IV типа. (4 , 5) . Эти молекулы демонстрируют большой потенциал в замедлении роста рака на доклинических моделях и уже проходят или скоро будут проходить клинические испытания. Доктор Каллури пришел к выводу, что ( a ) аномалии сосудов опухоли включают изменения в составе, сборке и архитектуре базальной мембраны сосудов и ( b ) изменения базальной мембраны сосудов, вероятно, будут важны для избирательной проницаемости сосудов опухоли и, наряду с аномалиями в эндотелии, может влиять на экстравазацию плазмы и ограничивать приток иммунных клеток в опухоли.

Какова причина этих аномалий в сосудах опухоли? Здесь больше вопросов, чем ответов. Считается, что растворимые и связанные с матриксом факторы, продуцируемые опухолевыми клетками и гипоксической средой, имеют важное значение. Стромальные клетки, вероятно, также вовлечены, возможно, участвуя в дисбалансе факторов роста в опухолях. VEGF, 3 который может вызвать образование очень причудливых сосудов в экспериментальных моделях, является вероятным фактором сосудистых аномалий.Ang1, который может быть произведен перицитами, Ang2, который может быть сверхэкспрессирован эндотелиальными клетками в опухолях, и PDGF, который необходим для нормального развития перицитов, являются другими участниками, но об их роли в герметичности сосудов опухоли известно меньше.

Барьерная функция эндотелия кровеносных сосудов

На утечку веществ из кровеносных сосудов влияет множество факторов. Доктор Фитц-Рой Карри (Калифорнийский университет, Дэвис, Калифорния) описал физиологические механизмы, регулирующие перемещение веществ из нормальных кровеносных сосудов.Основными факторами являются площадь поверхности просвета и проницаемость стенки сосуда, концентрация и движущие силы (гидростатические и осмотические градиенты) через эндотелий и кровоток. (6 , 7) . Важной целью будет понимание относительного вклада каждого из этих факторов в экстравазацию макромолекул, таких как белки плазмы, терапевтические антитела или вирусные векторы из сосудов опухоли, но в настоящее время нет четкого понимания. Одна из причин заключается в том, что переменные, управляющие утечкой, которые можно легко измерить в экспериментальных моделях, таких как брыжеечные кровеносные сосуды лягушки или крысы, трудно оценить в опухолях.Доктор Карри описал, как в нормальных условиях проницаемость одного микрососудистого слоя для водорастворимых веществ может варьироваться по крайней мере в 10 000 раз, при этом электролиты находятся на одном конце спектра, а макромолекулы — на другом. (6 , 7) . Проницаемость различных сосудов варьируется от самых низких значений в головном мозге, скелетных и сердечных мышцах до брыжейки, кишечника, слюнных желез и почечных клубочков. Вода и небольшие водорастворимые растворенные вещества имеют самые большие вариации.Различия между сосудистыми ложами основаны на нескольких факторах, включая количество плотных соединительных тяжей и пор в эндотелии, а также проницаемость гликокаликса, выстилающего просветную поверхность эндотелия.

Мелкие растворенные вещества выходят из сосудов в основном за счет диффузии, но крупные растворенные вещества могут перемещаться за счет диффузии и конвекции, когда экстравазация сочетается с потоком воды, особенно если сосуды очень негерметичны. Доктор Карри подчеркнул важность различения проницаемости или неплотности стенки сосуда от потока и накопления экстравазированной жидкости и растворенных веществ вне сосудов, которые зависят от множества факторов, включая проницаемость, площадь поверхности и силы, которые перемещают воду и растворенные вещества через сосуд. стены.

Основываясь на принципах, извлеченных из нормальных кровеносных сосудов, где поток через стенки сосудов является продуктом проводимости и движущей силы, д-р Карри оценивает, что единичное отверстие> 0,5 мкм в диаметре в эндотелии сосуда опухоли может сделать проницаемость этого сосуда. сосуд достаточно большой, чтобы экстравазация растворенного вещества была ограничена кровотоком. Таким образом, кровоток ограничит утечку макромолекул, а усиленный кровоток должен улучшить доставку макромолекулярных терапевтических средств к периваскулярным раковым клеткам.Доставка в раковые клетки, расположенные на некотором расстоянии от кровеносных сосудов, будет ограничиваться межуточным транспортом, а также кровотоком.

Зависимость доставки макромолекулярных препаратов от кровотока поднимает вопрос «нормализации» сосудов опухоли в ответ на определенные виды лечения. По словам доктора Ракеша Джайна (Массачусетская больница общего профиля, Гарвардская медицинская школа, Бостон, Массачусетс), ингибиторы VEGF, ингибиторы ангиогенеза и даже герцептин могут нормализовать сосуды опухоли. (8 , 9) .Это могло бы быть результатом уменьшения извилистости сосуда; уменьшение вариабельности размеров, формы и разветвленности сосудов; исправление аномалий сосудистой стенки; и, возможно, даже уменьшилась неплотность. Доктор Джайн высказал предположение, которое на первый взгляд кажется нелогичным, что нормализация сосудов опухоли может улучшить доставку лекарства к опухолевым клеткам. Теоретически процесс нормализации увеличивал бы кровоток за счет уменьшения сопротивления из-за извилистости сосудов и неправильного диаметра. Повышенный кровоток может улучшить доставку лекарственного средства, даже если протечка сосудов в некоторой степени уменьшилась во время нормализации.Однако усиленный кровоток также может стимулировать рост опухоли. Чтобы проверить эти возможности, д-р Джейн подчеркнул необходимость дополнительных исследований в нескольких областях, включая: ( a ) молекулярные, клеточные и физиологические механизмы нормализации сосудов в опухолях во время терапии; ( b ) методы визуализации, включая использование суррогатных маркеров, для определения условий нормализации сосудов опухоли и для улучшения комбинированной терапии; и ( c ) динамические исследования взаимодействия эндотелиальных клеток / перицитов / базальной мембраны / стромальных клеток для лучшего понимания последствий манипулирования функцией сосудов опухоли.Д-р Карри добавил, что, если это технически возможно, эффект увеличения кровотока должен быть протестирован на единичных сосудах опухоли до и после нормализации в условиях, когда измеряются кровоток и проницаемость.

Сосуды опухоли на порядок более негерметичны, чем нормальные сосуды. Размер отсечки пор (указывающий на самые большие частицы, которые могут пересекать стенки сосуда) измеряется в сотнях нанометров, а не в десятках нанометров. (8 , 10) . Однако экстравазация белков из сосудов опухоли происходит медленнее, чем можно было бы предсказать по размеру пор, если бы в остальном сосуды были нормальными.Аномально малый гидростатический градиент изнутри сосудов наружу, возникающий из-за высокого интерстициального гидростатического давления внутри опухолей, снижает движущую силу конвективного движения. В отсутствие конвекции движение макромолекул из сосудов опухоли происходит в основном за счет диффузии — медленного процесса для больших молекул. Высокое интерстициальное давление в опухолях является следствием утечки из кровеносных сосудов в сочетании с нарушением клиренса жидкости через лимфатические сосуды и, возможно, жесткими или сократительными стромальными клетками, которые снижают эластичность тканей.Необходимы дополнительные эксперименты, чтобы определить судьбу веществ, которые выделяются из сосудов опухоли, и почему функциональные лимфатические сосуды не могут развиваться в опухолях даже в присутствии лимфангиогенного фактора роста VEGF-C. Это признано очень плодородной областью для экспериментов из-за недавней доступности реагентов, которые могут локализовать и стимулировать или блокировать образование лимфатических сосудов.

Мало что известно о судьбе растворенных веществ, которые выводятся из протекающих сосудов опухоли.Из-за отсутствия функциональных лимфатических сосудов экстравазированные растворенные вещества могут медленно покидать опухоль путем диффузии, возвращаться в кровь, удерживаться путем связывания с опухолевыми или стромальными клетками или метаболизироваться. Связь между плохой проницаемостью макромолекул в опухоли и отсутствием лимфатических сосудов повышает вероятность того, что доставка лекарств может быть улучшена за счет нормализации лимфодренажа из опухолей. Однако рост функциональных лимфатических сосудов в опухоли может предрасполагать опухоль к метастазированию.

Мониторинг герметичности сосудов опухоли

Разрабатываются методы контроля проницаемости сосудов в опухолях.Это было достигнуто в экспериментальных моделях, где сосуды опухоли видны in vivo через прозрачное окно. Неинвазивные подходы к использованию при раке человека более сложны. Введенные в кровоток макромолекулярные индикаторы могут быть обнаружены в опухолях с помощью МРТ, а математические модели используются для количественной оценки экстравазации.

Доктор Роберт Браш (Калифорнийский университет, Сан-Франциско, Калифорния) разработал методы МРТ для измерения герметичности сосудов опухоли у грызунов и людей, а также для тестирования лекарств, которые могут изменить утечку.Он был пионером в использовании комплексов альбумин-гадолиний и частиц оксида железа, покрытых декстраном, в качестве макромолекулярных индикаторов для визуализации сосудов опухоли и оценки их утечки с помощью МРТ. (11 , 12) . Одной из причин визуализации протекающих сосудов опухоли является оценка серьезности или степени опухоли, которая коррелирует с объемом утечки. Визуализация также предоставляет средства для идентификации опухолей, чувствительных к лекарствам, и мониторинга реакции опухолей на лечение. Доктор Браш показал, что облучение увеличивает утечку макромолекулярных контрастных агентов для МРТ из сосудов опухоли и что антитела против VEGF уменьшают утечку.Доктор Браш приходит к выводу, что неплотность сосудов опухоли — это постоянное и полезное физиологическое свойство, которое можно измерить у животных и людей и которым можно манипулировать для получения клинических преимуществ, и оно отражает биологический статус опухолей. Он рекомендовал дополнительные исследования с целью определения морфологических детерминант и способов управления утечкой.

Несмотря на то, что все еще остаются вопросы об интерпретации и количественной оценке сигнала при МРТ-исследованиях сосудистой проницаемости, этот подход важен, поскольку он предлагает потенциальные средства неинвазивной оценки герметичности сосудов опухоли у людей и может быть полезен при оценке эффективности ингибиторов ангиогенеза. .

Медиаторы утечки эндотелия

Д-р Нил Грейнджер (Университет штата Луизиана, Шривпорт, Луизиана) рассмотрел, как медиаторы воспаления увеличивают проницаемость кровеносных сосудов и как при некоторых условиях утечка может быть связана с миграцией лейкоцитов через стенки сосудов. (13) . Многие медиаторы, включая гистамин, брадикинин, серотонин, вещество P и некоторые цитокины, увеличивают проницаемость эндотелия, но некоторые (например, оксид азота) могут увеличивать или уменьшать проницаемость сосудов при различных обстоятельствах.Лейкоциты являются ключом к утечке кровеносных сосудов при некоторых воспалительных реакциях и в условиях ишемии с последующей реперфузией, но не участвуют во многих других типах утечки. Функциональный размер пор в эндотелиальных клетках кишечника может увеличиваться просто за счет воздействия определенных пищевых компонентов. Что касается механизмов негерметичности сосудов опухоли, доктор Грейнджер рекомендовал провести дополнительную работу над ( a ) структурной основой неплотности сосудов опухоли, ( b ) ролью делящихся и растущих или мигрирующих эндотелиальных клеток в опухоли. герметичность сосудов и ( c ) относительный вклад измененной проницаемости сосудов и нарушения лимфатического дренажа в накопление экстравазированных макромолекул в опухолях.

Последствия герметичности сосудов опухоли

Какая связь между утечкой кровеносных сосудов и ростом опухоли? Доктор Гарольд Дворак (больница Бет Исраэль, Гарвардская медицинская школа) представил модельную систему с использованием фокальной трансфекции кожи аденовирусным вектором для изучения эффектов факторов роста сосудов у мышей. (14 , 15) . Высокая экспрессия VEGF в этой модели стимулирует пролиферацию крупных «материнских сосудов» и извилистых «гломерулоидных тел», которые имеют структурные и функциональные особенности, общие с некоторыми опухолевыми сосудами.Эта модельная система дает возможность создать «виртуальную опухоль», состоящую из кровеносных сосудов без опухолевых клеток, которую проще изучать, чем настоящие опухоли. Доктор Дворак также рассмотрел роль экстравазации фибриногена из протекающих сосудов опухоли и последующего отложения фибрина в создании среды внутри опухолей, которая способствует ангиогенезу и росту опухоли. Соответствующие вопросы включают: ( a ) Важен ли фибрин для ангиогенеза в опухолях? Растут ли опухоли медленнее у мышей с нокаутом фибриногена? ( b ) Каковы аномалии эндотелиального гликокаликса в сосудах опухоли? ( c ) Почему из сосудов опухоли выходит больше эритроцитов, чем тромбоцитов или лейкоцитов? ( d ) Почему VEGF-C вызывает образование новых лимфатических сосудов в нормальных тканях, но не в опухолях?

Геномный анализ сосудистых мишеней

Заметный прогресс был достигнут в профилировании экспрессии генов в эндотелиальных и опухолевых клетках.Доктор Ричард Мюррей (Eos Biotechnology, Inc., Южный Сан-Франциско, Калифорния) описал высокопроизводительные исследования экспрессии генов как инструменты для обнаружения новых мишеней для противоопухолевых препаратов. Eos Biotechnology, Inc. собрала базу данных значений экспрессии для 40 000 генов человека в сотнях опухолей и нормальных тканях. Данные этих образцов, проанализированные с использованием мощных инструментов биоинформатики, позволили ученым Eos Biotechnology, Inc. выявить уникальные генетические различия между покоящимися и растущими эндотелиальными клетками, а также между опухолями и нормальными тканями, с особым акцентом на выявлении потенциальных мишеней для лекарств на поверхности клеток. .Антитела, вырабатываемые к этим молекулам, в некоторых случаях в сочетании с токсичными лекарствами, могут нацеливаться на опухоли. Что касается будущего, доктор Мюррей сосредоточился на скорейшем переводе открытий фундаментальной науки в кандидаты на лекарства, что является ключом к быстрому доставке новых лекарств в клинику. Доказательства принципиальных исследований наиболее полезны, когда они предоставляют данные, относящиеся к последующим клиническим исследованиям. В связи с этим эксперименты по герметичности сосудов опухоли должны учитывать практические аспекты доставки лекарств преимущественно в сосуды опухоли.

Направление лекарственных средств на сосуды опухоли

Существует общее мнение о полезности обнаружения молекул на опухолевых сосудах и раковых клетках, которые можно использовать в качестве мишеней для диагностики и лечения. Идентификация молекул, которые предпочтительно экспрессируются или однозначно доступны на сосудах опухоли, перемещает область нацеливания лекарств от теории к реальности, но лучшие цели и лучшие методы их поиска все еще не определены. Молекулы, идентифицированные исследованиями экспрессии генов, фаговым дисплеем in vivo, и другими подходами, открывают большие перспективы для концентрации системно вводимых терапевтических средств в опухолях при одновременном снижении побочных эффектов.

Доктор Филип Торп (Юго-западный медицинский центр Техасского университета, Даллас, Техас) описал несколько потенциальных мишеней для сосудов опухоли. Среди них были α _v β ₃ и α ₅ β ₁ интегрин, комплекс VEGF-VEGFR-2, эндоглин (CD105), простатоспецифический мембранный антиген, ED-B-домен фибронектина, эндосиалин, матрикс. металлопротеиназа-9 и фосфатидилсерин (16 , 17) . По словам доктора Торпа, фосфатидилсерин, который обычно экспрессируется на цитоплазматической поверхности клеточных мембран, переходит на внешнюю поверхность сосудов опухоли и попадает в кровоток.Переворот может быть вызван активацией эндотелиальных клеток или повреждением, вызванным гипоксией, воспалительными цитокинами или реактивными формами кислорода, генерируемыми в опухоли. Антитела к фосфатидилсерину нетоксичны и обладают противоопухолевым действием у мышей. Другая стратегия нацелена на факторы свертывания крови в сосудах опухоли с целью вызвать внутрисосудистый тромбоз внутри опухоли. (16 , 17) . Эти подходы могут разрушать сосуды опухоли и вызывать регресс солидных опухолей в экспериментальных моделях. Исследования показывают, что нацеленные на сосуды агенты могут быстро закрывать сосудистую сеть опухолей, эффективны при низких дозах и уменьшают маленькие и большие солидные опухоли у мышей.Их свойства отличаются от свойств ингибиторов ангиогенеза, которые блокируют рост опухоли путем подавления образования кровеносных сосудов, и дополняют их.

Drs. Рената Паскуалини и Вадих Арап (оба из Онкологического центра М. Д. Андерсона Университета Техаса, Хьюстон, Техас) используют фаговый дисплей in vivo для идентификации белков, которые преимущественно экспрессируются на сосудах опухоли и могут служить мишенями для доставки лекарств. (18, 19, 20, 21) . Эксперименты на мышах показывают, что целевые химиотерапевтические препараты эффективны при гораздо более низких дозах, чем нецелевые препараты.Используя библиотеки бактериофагов, которые экспрессируют случайные пептиды, лаборатория Drs. Паскуалини и Арап определили специфические молекулярные мишени (почтовые индексы) в сосудах опухолей, а также в нормальном мозге, легких, поджелудочной железе, жировой ткани и простате. (18 , 19) . Большинство мишеней находятся на эндотелиальных клетках, но некоторые в опухолях могут находиться на перицитах, которые доступны через дефекты эндотелия. (20) . Эффективные мишени используют молекулярную гетерогенность сосудистой сети и сайт-специфические нарушения функции эндотелиального барьера.Из-за природы технологии мишени, идентифицированные фаговым дисплеем in vivo , также будут доступны для макромолекулярных терапевтических средств, таких как антитела, липосомы или вирусные векторы. Хотя большинство исследований с использованием фагового дисплея in vivo, было выполнено на мышах, в настоящее время проводятся революционные исследования, в которых фаговый дисплей in vivo проводится на онкологических больных. (21) . Текущие исследования определяют молекулярные мишени на кровеносных сосудах опухолей и здоровых тканях человека.Рецептор интерлейкина 11 является одной из таких мишеней, идентифицированных в простате. (21) . Чтобы использовать весь потенциал фагового дисплея in vivo для исследований нацеливания на лекарства, необходима дополнительная работа для развития более полного понимания клеточной локализации и доступности сосудистых почтовых индексов в опухолях и здоровых тканях.

Терапевтические манипуляции с опухолевыми сосудами

Трансгенные мыши, у которых развиваются спонтанные многоочаговые многоступенчатые опухоли, используются для сравнения эффективности лекарств в предотвращении роста опухоли и ее регрессии.Д-р Дуглас Ханахан (Калифорнийский университет, Сан-Франциско, Калифорния) описал недавние достижения в области анализа этапов ангиогенеза опухоли и влияния лекарственных препаратов на этот процесс. (22 , 23) . Его группа обнаружила, что ингибирование передачи сигналов VEGF в эндотелиальных клетках предотвращает рост опухолей островковых клеток поджелудочной железы у трансгенных мышей с RIP-Tag, но, по-видимому, менее эффективно вызывает регрессию опухоли. Можно ожидать, что ингибирование передачи сигналов VEGF-R2 в опухолевых сосудах затронет в основном эндотелиальные клетки.Присутствие перицитов на сосудах опухоли, а также поддерживающая функция перицитов на эндотелиальных клетках и зависимость перицитов от PDGF повышает вероятность того, что комбинация ингибиторов VEGF и PDGF будет более эффективной в разрушении сосудов опухоли и вызове регрессии опухоли. Однако интерпретация таких экспериментов зависит от селективности и доступа ингибиторов к своим мишеням. Кроме того, еще предстоит определить, будут ли такие ингибиторы разрушать одни сосуды опухоли, нормализовать другие и оставлять одни без изменений.В отношении проницаемости кровеносных сосудов д-р Ханахан рекомендовал продолжать усилия по управлению проницаемостью сосудов в опухолях с целью понимания значимости повышенной проницаемости для малых молекул, белков, включая антитела, и лейкоцитов. В то время как некоторые терапевтические стратегии могут принести пользу за счет нормализации сосудистой сети опухоли и уменьшения протекания, другие могут быть более эффективными при увеличении проницаемости, например, при иммунотерапии, где может быть полезным усиление притока лейкоцитов в опухоли.

Негерметичность сосудов опухоли может быть результатом дисбаланса факторов роста, приводящего к дефектам эндотелиальных клеток, перицитов и базальной мембраны. Доктор Гэвин Терстон (Regeneron Pharmaceuticals, Inc., Тарритаун, штат Нью-Йорк) предположил, что коррекция этого дисбаланса может обратить вспять аномалии, но предупредил, что системно вводимые факторы роста или их ингибиторы могут не имитировать обычно очаговые действия их эндогенных аналогов. Некоторые факторы роста (например, VEGF) могут продуцироваться в количествах, которые запускают ангиогенез и аномальный фенотип сосудов опухоли, тогда как другие факторы, такие как ингибиторы Ang1 и VEGF, приводят сосуды опухоли к более нормальному фенотипу.С другой стороны, ингибиторы Ang2 и VEGF могут вызывать регрессию и исчезновение сосудов опухоли. Чтобы оценить эти возможности, необходимо разбираться в игроках. VEGF — мощный митоген эндотелиальных клеток. Новообразованные кровеносные сосуды, как правило, зависят от VEGF. VEGF-Trap, который является ингибитором VEGF, состоящим из растворимых VEGFR-1 и VEGFR-2, связанных с хвостом Fc иммуноглобулина, блокирует ранний рост опухолей, но имеет тенденцию нормализовать кровеносные сосуды в уже сформировавшихся опухолях. Ang1, который не является митогеном эндотелиальных клеток, избирательно действует на эндотелиальные клетки через рецепторы Tie2 и, по-видимому, выполняет противовоспалительную и противовоспалительную роль. (24 , 25) .Ang2 также действует на рецепторы Tie2 и имитирует эффекты Ang1 в одних условиях, но блокирует Ang1 и способствует регрессии сосудов в других. Ang2 может быть маркером эндотелиальных клеток в опухолях и может способствовать лимфангиогенезу. В отсутствие Ang2 ремоделирование сосудов не происходит нормально во время развития. Важные вопросы, которые необходимо решить для оценки этих проблем, включают: ( a ) Является ли сверхэкспрессия VEGF ключевым дисбалансом в отношении аномалий сосудов опухоли? Как ингибирование VEGF изменяет клеточную морфологию, проницаемость и экспрессию рецепторов сосудов опухоли? Сосуды нормализуются или регрессируют? ( b ) Какова роль Ang2 в опухолях? Влияет ли соотношение Ang1 и Ang2 на морфологию кровеносных сосудов? ( c ) Будет ли клинически более полезным при лечении рака нормализовать сосуды опухоли или сделать их еще более аномальными до такой степени, что они регрессируют?

Доктор.Дэвид Череш (Исследовательский институт Скриппса, Ла-Хойя, Калифорния) описал свои недавние эксперименты по внутриклеточным сигнальным путям, участвующим в VEGF-индуцированной утечке плазмы. Его эксперименты выявили, что тирозинкиназа Src играет ключевую роль во внутриклеточной передаче сигналов, что приводит к утечке, производимой VEGF, но не другими медиаторами. (26) . Src находится ниже рецепторов VEGF и связан через β-катенин с эндотелиальным кадгерином сосудов в межклеточных соединениях. VEGF не вызывает утечки у мышей, у которых отсутствует Src — или его родственник Да .Вызванная VEGF утечка также может блокироваться ингибитором Src PP1. Доктор Череш сообщил, что опухоли, выращенные у мышей Src -null, больше по размеру и имеют меньше фибрина на поверхности, и предположил, что фибрин, образованный из экстравазированного фибриногена, может участвовать в сдерживании опухолей. Ингибирование Src также снижает утечку плазмы в мозг и увеличивает выживаемость в модели инсульта у мышей, демонстрируя, как исследования в области ангиогенеза и проницаемости сосудов могут неожиданно принести пользу в других клинических ситуациях. (27) .В этой модели набухание мозга, связанное с инсультом, приводит к ишемии, гипоксии тканей, увеличению выработки VEGF и большей утечке плазмы, которая усугубляет отек мозга. Ингибиторы Src облегчают эту проблему. Доктор Череш пришел к выводу, что более глубокие знания о контроле проницаемости сосудов, вероятно, окажут глубокое влияние на рак, а также на другие патологические процессы, включая воспаление и ишемию. Для этого необходимо уделять больше внимания молекулярным механизмам и клеточной основе изменений проницаемости сосудов и кровотока при опухолях и других заболеваниях.Хотя роль Src в VEGF-индуцированной утечке в опухоли только начинает изучаться, мыши с нокаутом Src могут быть полезны для оценки функционального значения герметичности сосудов опухоли.

Заключение

Герметичность — это одно из множества аномалий сосудов опухоли, которое не только влияет на ангиогенез, рост опухоли и метастазирование, но также влияет на доставку лекарств и представляет собой новые мишени для терапевтического вмешательства при раке. Утечка плазмы в опухолях — это проявление структурных дефектов стенок сосудов, возникающих в результате аномальной среды внутри опухолей.Дисбаланс VEGF, PDGF, Ang1, Ang2 и других факторов роста, вероятно, играет важную роль. Негерметичность сосуда способствует возникновению аномальной окружающей среды и способствует прорастанию и росту сосудов. Несмотря на сильно нарушенную барьерную функцию, опухолевые сосуды протекают не так сильно, как ожидалось, потому что высокое интерстициальное давление в опухолях ограничивает экстравазацию жидкости и макромолекул. Отсутствие функциональных лимфатических сосудов способствует высокому интерстициальному давлению. Терапевтические вмешательства, затрагивающие сосуды опухоли, могут разрушить одни сосуды и оставить другие с более нормальным фенотипом.Нормализация сосудов опухоли может увеличить кровоток и улучшить доставку макромолекулярных терапевтических средств. Однако последствия увеличения потока и уменьшения протекания для роста опухоли и применения клеточной терапии до сих пор неясны. Множество новых подходов используются для идентификации молекул на сосудах опухоли, которые могут служить мишенями для предпочтительной доставки лекарств. Эта стратегия должна иметь преимущество в снижении доз и побочных эффектов противоопухолевых препаратов. Это также может повысить эффективность антиангиогенной терапии.С оптимизмом в отношении таких новых терапевтических подходов настало время получить дополнительную информацию о природе и функциональных аномалиях сосудов опухоли и о том, как их протекаемость способствует росту и метастазированию опухолей.

Сноски

Расходы на публикацию этой статьи были частично покрыты за счет оплаты страницы. Таким образом, данная статья должна быть помечена как реклама в соответствии с 18 U.S.C. Раздел 1734 исключительно для указания этого факта.
№1 Эта конференция, организованная Дональдом М. Макдональдом, проходила 4–7 октября 2001 г. в Сильверадо, Вэлли Напа, Калифорния. Конференция проходила при поддержке Фонда Уильяма Гая Форбека (Хилтон-Хед-Айленд, Южная Каролина), Eos Biotechnology, Inc. (Южный Сан-Франциско, Калифорния) и Regeneron Pharmaceuticals, Inc. (Тарритаун, штат Нью-Йорк). Среди участников были Вадих Арап, Питер Балук, Роберт Браш, Дэвид Череш, Фитц-Рой Карри, Гарольд Дворак, Нил Грейнджер, Дуглас Ханахан, Ракеш Джайн, Рагу Каллури, Стивен Мецгер (Фонд AngelWorks, Даллас, Техас), Ричард Мюррей, Рената. Паскуалини, Филип Торп и Гэвин Терстон.
↵2. Кому следует обращаться с запросами на оттиски, в Институте сердечно-сосудистых исследований, кабинет S1363, Калифорнийский университет, 513 Parnassus Avenue, Сан-Франциско, CA 94143-0130. Телефон: (415) 476-2118; Факс: (415) 476-4845; Эл. Почта: dmcd {at} itsa.ucsf.edu
3 Используемые сокращения: VEGF, фактор роста эндотелия сосудов; Ang, ангиопоэтин; PDGF, фактор роста тромбоцитов; VEGFR, рецептор VEGF; МРТ, магнитно-резонансная томография.

Получено 22 апреля 2002 г.
Принято 11 июля 2002 г.

Список литературы

↵
Макдональд Д. М., Фосс А. Дж. Эндотелиальные клетки сосудов опухоли: аномальные, но не отсутствующие. Раковые метастазы Rev., 19 : 109-120, 2000.
↵
Морикава С., Балук П., Кайдо Т., Хаскелл А., Джейн Р. К., Макдональд Д. М. Аномалии перицитов на кровеносных сосудах и эндотелиальных отростках в опухолях. Являюсь. J. Pathol., 160 : 985-1000, г. 2002.
↵
Хашизуме Х., Балук П., Морикава С., Маклин Дж. У., Терстон Г., Роберж С., Джейн Р. К., Макдональд Д. М. Открытия между дефектными эндотелиальными клетками объясняют негерметичность сосудов опухоли. Являюсь. J. Pathol., 156 : 1363-1380, г. 2000.
↵
Колорадо П.К., Торре А., Кампхаус Г., Маэшима Ю., Хопфер Х., Такахаши К., Фолк Р., Замборский Э.Д., Герман С., Саркар П.К., Эриксен МБ, Дханабал М., Саймонс М., Пост М. ., Kufe DW, Weichselbaum RR, Sukhatme VP, Kalluri R. Антиангиогенные сигналы от коллагена базальной мембраны сосудов. Cancer Res., 60 : 2520-2526, г. 2000.
↵
Кампхаус Г. Д., Колорадо П. К., Панка Д. Дж., Хопфер Х., Рамчандран Р., Торре А., Маешима Ю., Майер Дж. У., Сухатме В. П., Каллури Р. Канстатин, новый матричный ингибитор ангиогенеза и роста опухоли. J. Biol. Chem., 275 : 1209-1215, г. 2000.
↵
Мишель К. К., Карри Ф. Э. Проницаемость микрососудов. Physiol. Rev., 79 : 703-761, 1999.
↵
Бейтс Д. О., Хилд Р. И., Карри Ф. Э., Уильямс Б. Фактор роста эндотелия сосудов увеличивает проницаемость сосудов Рана и податливость посредством различных сигнальных путей.J. Physiol., 533 : 263-272, 2001.
↵
Джейн Р. К. Нормализация сосудистой сети опухоли с помощью антиангиогенной терапии: новая парадигма комбинированной терапии. Nat. Мед., 7 : 987-989, г. 2001.
↵
Идзуми Ю., Сюй Л., ди Томазо Э., Фукумура Д., Джайн Р. К. Биология опухоли: Герцептин действует как антиангиогенный коктейль. Природа (Лонд.), 416 : 279-280, 2002 г.
↵
Кармелиет П., Джейн Р. К. Ангиогенез при раке и других заболеваниях. Природа (Лонд.), 407 : 249–257, 2000.
↵
Pham C. D., Roberts T. P. L., van Bruggen N., Melnyk O., Mann J., Ferrara N., Cohen R. L., Brasch R. C. Магнитно-резонансная томография обнаруживает подавление проницаемости сосудов опухоли после введения антител к фактору роста эндотелия сосудов.Раковые исследования., 16 : 225-230, 1998.
↵
Турецчек К., Хубер С., Флойд Э., Хельбич Т. Х., Робертс Т. П. Л., Шеймс Д. М., Тарло К. С., Вендланд М. Ф., Браш Р. С. МР-визуализация микрососудов в экспериментальных опухолях молочной железы с использованием контрастного вещества в виде частиц с гистопатологической корреляцией. Радиология, 218 : 562-569, г. 2001.
↵
Грейнджер Д.Н., Гришем М. Б., Квиетис П. Р. Механизмы микрососудистого поражения Джонсон Л. Р. ред. . Физиология желудочно-кишечного тракта, 1693-1722, Raven Press New York, NY 1994.
↵
Петтерссон А., Надь Дж. А., Браун Л. Ф., Сандберг К., Морган Э., Джанглс С., Картер Р., Кригер Дж. Э., Мансо Е. Дж., Харви В. С., Экельхофер И. А., Фенг Д., Дворжак А. М., Маллиган Р. К., Dvorak HF Гетерогенность ангиогенного ответа, индуцированного в различных нормальных тканях взрослого человека фактором проницаемости сосудов / фактором роста эндотелия сосудов.Лаборатория. Исследование., 80 : 99-115, 2000.
↵
Sundberg C., Nagy J. A., Brown L. F., Feng D., Eckelhoefer I. A., Manseau E. J., Dvorak A. M., Dvorak H. F. Гломерулоидная микрососудистая пролиферация следует за доставкой гена фактора проницаемости сосудов аденовируса / фактора роста эндотелия сосудов-164. Являюсь. J. Pathol., 158 : 1145-1160, г. 2001.
↵
Хуанг Х., Молема Г., Кинг С., Уоткинс Л., Эджингтон Т. С., Торп П. Э. Инфаркт опухоли у мышей путем направленного антителами нацеливания тканевого фактора на сосудистую сеть опухоли. Наука (Вашингтон, округ Колумбия), 275 : 547-550, г. 1997.
↵
Торп П. Э., Ран С. Инфаркт опухоли путем нацеливания тканевого фактора на сосудистую сеть опухоли. Рак J. Sci. Являюсь., 6 (Дополнение 3) : S237-S244, 2000.
↵
Трепель М., Арап В., Паскуалини Р. Модуляция гуморального иммунного ответа путем нацеливания антигенов на лимфатические узлы. Cancer Res., 61 : 8110-8112, г. 2001.
↵
Lahdenranta J., Pasqualini R., Schlingemann R., Hagedorn M., Stallcup W. M., Bucana C.D., Sidman R., Arap W. Антиангиогенное состояние у мышей и людей с дегенерацией фоторецепторных клеток сетчатки. Proc. Natl. Акад. Sci. СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ, 98 : 10368-10373, г. 2001.
↵
Курнис Ф., Arrigoni G., Sacchi A., Fischetti L., Arap W., Pasqualini R., Corti A. Дифференциальная экспрессия изоформ CD13 в опухолевых сосудах, эпителии и миелоидных клетках: механизм свойств лекарств, содержащих NGR мотив. Cancer Res., 62 : 867-874, г. 2002.
↵
Арап В., Колонин М. Г., Трепель М., Лахденранта Дж., Кардо-Вила М., Джордано Р. Дж., Минц П. Дж., Арделт П. У., Яо В. Дж., Видаль В. И., Чен Л., Фламм А., Valtanen H., Weavind LM, Hicks ME, Pollock RE, Botz GH, Bucana CD, Koivunen E., Cahill D., Troncoso P., Baggerly KA, Pentz RD, Do KA, Logothetis CJ, Pasqualini R. сосудистая сеть человека с помощью фагового дисплея. Nat. Мед., 8 : 121-127, 2002.
↵
Бергерс Г., Джавахериан К., Ло К. М., Фолкман Дж., Ханахан Д. Влияние ингибиторов ангиогенеза на многоступенчатый канцерогенез у мышей.Наука (Вашингтон, округ Колумбия), 284 : 808-812, г. 1999.
↵
Bergers G., Brekken R., McMahon G., Vu TH, Itoh T., Tamaki K., Tanzawa K., Thorpe P., Itohara S., Werb Z., Hanahan D. Матричная металлопротеиназа-9 запускает ангиогенный переключатель во время канцерогенеза. Nat. Клетка. Биол., 2 : 737-744, 2000.
↵
Терстон Г., Сури К., Смит К., Макклейн Дж., Сато Т.Н., Янкопулос Г. Д., Макдональд Д. М. Устойчивые к утечкам кровеносные сосуды у мышей, трансгенно сверхэкспрессирующих ангиопоэтин-1. Наука (Вашингтон, округ Колумбия), 286 : 2511-2514, г. 1999.
↵
Thurston G., Rudge J. S., Ioffe E., Zhou H., Ross L., Croll S. D., Glazer N., Holash J., McDonald D. M., Yancopoulos G.D. Ангиопоэтин-1 защищает сосудистую сеть взрослого человека от утечки плазмы. Nat. Мед., 6 : 460-463, г. 2000.
↵
Элисейри Б.П., Пол Р., Шварцберг П. Л., Худ Дж. Д., Ленг Дж., Череш Д. А. Селективная потребность в Src-киназах во время VEGF-индуцированного ангиогенеза и проницаемости сосудов. Мол. Клетка, 4 : 915-924, 1999.
↵
Пол Р., Чжан З. Г., Элисейри Б. П., Цзян К., Бочча А. Д., Чжан Р. Л., Чопп М., Череш Д. А. Дефицит или блокада активности Src у мышей обеспечивает церебральную защиту после инсульта. Nat. Мед., 7 : 222-227, 2001 г.

У какого доктора анатомии Грея была самая причудливая секретная опухоль?

Как может кто-либо из вселенной Grey’s Anatomy позволить себе страховку, учитывая все крушения парома, стрельбу в больницах, пожары в больницах и гигантские провалы в грунте? Если уж на то пошло, как сама больница Grey Sloan Memorial остается на плаву? Его руководство постоянно меняется; Что еще более удручающе, у ведущих врачей опасно высокий шанс заболеть раком, который они обычно держат в секрете, прежде чем, наконец, позволят одному из своих коллег прооперировать их.

Сюжет о раке использовался несколько раз на протяжении всего почитаемого сериала Шонды Раймс , начиная с Ричарда Уэббера, который обнаружил, что у него опухоль давила на зрительный нерв в конце сезона 1. Часто эти опухоли пугающе грубые, поэтому комплекс, в который боятся вмешаться даже их коллеги. Но чья опухоль была самой причудливой? Поскольку любимая медицинская драма готовится превзойти ER как самая продолжительная медицинская драма в истории телевидения (серия 332 выходит в эфир в четверг), сейчас нет времени, чтобы сравнить записи врачей и выяснить это.

Ричард Уэббер

Извините, Ричард, мы знаем, что вы конкурентоспособны. Но как опухолей Грея , эта была не такой уж и красивой. Шоу было еще в самом начале, когда Дерек Шеперд обнаружил рост во время финала 1 сезона. Выздоровление шефа Уэббера стало поворотным моментом для сериала, усилив борьбу за власть между Шепардом и Престоном Бёрком и заставив Уэббера выздороветь. (Он кратко попросил Джорджа — помните Джорджа? — быть его глазами и ушами в больнице, но это не сработало.) Но даже после того, как Уэбберу сделали операцию, его семейные проблемы с тогдашней женой Адель были большим источником драмы, чем рак. Когда сестра Дерека Амелия позже сама заболела раком мозга, Уэббер показал ей свои старые снимки, и она ответила насмешкой. «Я могла бы удалить эту опухоль перед завтраком с закрытыми глазами», — сказала она. «У них тогда были даже микроскопы, достаточно сильные, чтобы увидеть эту опухоль?»

Амелия Шеперд

Теперь , это опухоль! Болезнь Амелии оставалась незамеченной в течение многих лет, оказывая влияние на ее личность и давая ей склонность к рискованному поведению, что, по понятным причинам, вызвало у нее сильный психологический стресс, когда она узнала об этом в 14 сезоне во время проведения МРТ для исследования оргазма Карины ДеЛука.(Нет оргазма и диагноз рака — худший вид дня.) Амелия сначала держала свой рак в секрете от всех, кроме Карины и ее брата, коллеги-хирурга Эндрю. В конце концов, она прилетела к своему старому наставнику, чтобы удалить его, но не раньше, чем еще раз перед операцией позу супергероя.

Кэтрин Фокс

Самая последняя запись в каноне Grey’s Anatomy «Врачи с онкологическими заболеваниями» — мать Джексона Эйвери, Кэтрин, у которой боли в шее и спине оказались опухолью позвоночника в 15 сезоне.(Опухоли позвоночника, судя по тому, что я видел на Grey’s , возможно, самые мучительные из всех.) Этот рак, как предупредили Кэтрин, был очень агрессивным, и поэтому она хотела сохранить свой диагноз в секрете как от Джексона, так и от Ричарда. , за которого она вышла замуж в 11 сезоне. К несчастью для Кэтрин, Мередит не повиновалась ее приказам и рассказала своей сестре , Мэгги Пирс, о раке. (Может быть, никто не должен работать исключительно со своей семьей и ближайшими друзьями!) Хирурги смогли удалить большую часть опухоли Кэтрин, но небольшой фрагмент остался неоперабельным, поэтому теперь ей необходимо регулярно проходить сканирование, чтобы контролировать его.К счастью, она выживет — и, что наиболее важно, после некоторой физиотерапии она достаточно поправилась, чтобы снова заняться сексом с Ричардом. Если мы что-то знаем о персонажах Grey’s , так это то, что жизнь без резвости — это вообще не жизнь.

Николь Херман

Помните, когда Джина Дэвис была на Анатомии Грея еще в 11 сезоне? Это случилось! К сожалению, большая часть ее сюжета в сериале была потрачена на борьбу с поистине ужасной опухолью мозга.Как сказала Николь своему ученику из Аризоны, ей осталось жить около шести месяцев, и она хотела использовать это время, чтобы закончить обучение в Аризоне. К счастью для Николь, Аризона решила рассказать о своем диагнозе рака Амелии, которая убедила Николь позволить ей сделать операцию. Рак Николь прогрессировал быстрее, чем ожидалось, что ухудшило ее зрение; когда ей наконец сделали операцию, ей потребовалось несколько дней, чтобы проснуться. И хотя она в конце концов пришла в себя, она проснулась и узнала, что теперь ослепла.

Даже выздоровление Николь было сложным: после того, как она провела некоторое время в Институте слепых, где она в шутку сказала, что «учится не сталкиваться с вещами», Николь вернулась в больницу из-за повторяющихся головных болей.Это потребовало еще одной операции, которая оказалась успешной, но очевидно, что эта битва была одной из самых жестоких, которые видел Грей.

Иззи Стивенс

Тем не менее, даже неприятная опухоль Николь не имела ничего общего с Иззи в пятом сезоне. Возможно, я позволяю себе поддаться безумным симптомам, которые демонстрировала Иззи — например, галлюцинации полного секса с ее мертвым бывшим пациентом / парнем. , Денни Дюкетт. (Серьезно, как у кого-то из этих людей все еще есть медицинские лицензии?) Или, может быть, эмоциональные события, которые последовали за раком, оставили самое большое впечатление: Иззи увольняют, Иззи оставляет Алекса и переезжает в Такому, Иззи возвращается, чтобы попытаться исправить отношения только для того, чтобы узнать, что Алекс решил, что он заслуживает лучшего, Иззи пакует чемоданы и уезжает из дома Мередит, чтобы ее больше никогда не видели.. .? Нет, я думаю, это был секс с привидениями.

fo76 Расположение жидкостей с высоким уровнем радиации

Жидкости с высоким уровнем радиации; Когда у вас будет достаточно этих предметов, вы должны пойти на химическую станцию и объединиться с флюсом, чтобы создать чистые версии. Найдите оружие, ресурсные узлы, силовую броню, голографические записи и многое другое! Пример флуоресценции жидкостей организма с использованием Mini-CrimeScope; Подозрение на выделение биологических жидкостей на ткани. Покупайте, продавайте или обменивайте учетные записи, предметы и бонусы Fallout 76. Планировщик перков Fallout 76.Цель состоит в том, чтобы уничтожить или повредить рак, не повреждая слишком много здоровых клеток. Во время брахитерапии с высокой мощностью дозы вы будете лежать в удобном положении. Подробная динамическая карта Аппалачей для Fallout 76, включая локации, путевые точки, предметы и многое другое. Существуют сыворотки, которые вы можете пить, которые дают вам определенную мутацию, и ни одного из них. Из последующих исследований японцев, переживших атомную бомбу, мы знаем, что острое воздействие очень высоких доз радиации может увеличить риск возникновения рака. ДЛТ может использоваться после других видов лечения, таких как хирургическое вмешательство, для лечения рецидива рака или рака с высоким риском рецидива.Все вещи состоят из молекул. Когда вещи нагреваются, они поглощают тепловую энергию. Чем больше энергии, тем больше молекулы могут двигаться быстрее. Когда молекулы движутся быстрее, температура повышается. Что такое тепловая энергия. Тепловая энергия — это энергия, возникающая в результате движения частиц. Это… Однократное облучение высокого уровня (например, более 100 мЗв), доставленное на все тело в течение очень короткого периода времени, может иметь потенциальные риски для здоровья. Вы можете возвращать реактивные типы (Reactor, RxJava или другие) непосредственно из методов контроллера Spring MVC.При внутреннем облучении (брахитерапия) закрытые источники радиоактивности размещаются рядом с опухолью или внутри нее. Это зависит от типа используемого луча и других факторов, включая тип, размер и расположение рака. Назначение Этот мод ничего не делает сам по себе — это требование для других модов, загружаемых отдельно для централизации будущих обновлений. Fo76 скрипт Fo76 скрипт. Винтовка Гаусса — это высокоуровневое оружие, которое с большой скоростью бросает материалы в ваших врагов. По мере приближения Fallout 76 остается много вопросов.Лучевая терапия лечит рак, используя волны высокой энергии для уничтожения опухолевых клеток. Внешняя лучевая терапия не делает вас радиоактивными, потому что радиация не остается в вашем теле во время или после лечения. Лучевая терапия с модуляцией интенсивности (IMRT): передовое программное обеспечение планирует точную дозу облучения в зависимости от размера, формы и местоположения опухоли. Эти повышенные потребности в сочетании со многими возможными побочными эффектами могут привести к потере веса. После того, как область подверглась ядерному удару, вы можете исследовать ее, чтобы собирать урожай фауны и убивать высокоуровневых врагов.Самым важным аспектом при планировании персонажа в Fallout 76 являются карты перков. Собралась группа лучших медицинских специалистов из Японии и со всего мира. Жидкость с низкой вязкостью и высокой удельной теплоемкостью перекачивать легче, потому что она менее устойчива к течению и передает больше тепла. (Изображение предоставлено Bethesda) Чтобы получить мутации в Fallout 76, вам необходимо облучить себя. Брахитерапия с высокой мощностью дозы (HDR): эта внутренняя лучевая терапия доставляет высокую дозу излучения от имплантатов, установленных рядом с опухолью (опухолями) или внутри них, коротким импульсом, продолжающимся несколько минут.Лучевая технология позволяет очень осторожно проводить дистанционную лучевую терапию. Как избавиться от радиации в Fallout 76. Лучевая терапия, включая дистанционную лучевую терапию (ДЛТ) и брахитерапию, является альтернативной формой лечения рака простаты. Во время брахитерапии с высокой мощностью дозы радиоактивный материал помещается в ваше тело на короткий период — от нескольких минут до 20 минут. SRS обычно включает однократную обработку очень высокой дозой радиации в определенном месте.Аппарат используется для наведения высокоэнергетических лучей (или лучей) извне в опухоль. Они обсудили плохое состояние радиации, затронувшей Хисаши Оучи. Полностью модернизированный, он обеспечивает наивысшую радиационную стойкость среди всех не силовых доспехов в игре и только. Принимая во внимание, что вы будете искать биологические жидкости по громким делам, уголовным преступлениям и растущему распространению использования ДНК, чем больше доказательств биологических жидкостей вы сможете раскрыть, тем лучше. Вам также понадобится тонна стимуляторов, поскольку монстры в ядерной зоне очень высоки … SRS — это точный и мощный вид лучевой терапии.В низких дозах радиация используется в рентгеновских лучах, чтобы заглянуть внутрь вашего тела, как в рентгеновских лучах ваших зубов или сломанных костей. Есть способ получить мутации, не поддавшись радиации, но это довольно дорого. Ионизирующее излучение (ионизирующее излучение) — это излучение, распространяющееся в виде частицы или электромагнитной волны, которое несет энергию, достаточную для отделения электронов от атомов или молекул, тем самым ионизируя атом или молекулу. Интерактивная карта локаций и мест появления Fallout 76. Вылечить радиацию в Fallout 76 довольно просто, если у вас есть нужные предметы, и вы сможете восстановить максимальное здоровье.При этом врачи поддерживали его жизнь, регулярно закачивая в него большое количество крови и жидкостей. Обработка сырого флюса необходима, чтобы сделать его полезным для изготовления, но делает флюс несъедобным. Чтобы получить броню секретной службы, вы сначала должны купить планы для ее изготовления. Устройство с компьютерным управлением доставляет излучение в определенных дозах, которые соответствуют трехмерной геометрической форме опухоли, включая вогнутые и сложные формы. Микроволны — это высокочастотные радиоволны (радиочастотные поля), которые, как и видимое излучение (свет), являются частью электромагнитного спектра.Используйте наш каталог сборок Fallout 76, чтобы найти лучшие сборки персонажей Fallout 76. Лучевая терапия (также называемая лучевой терапией) — это лечение рака, при котором используются высокие дозы радиации для уничтожения раковых клеток и уменьшения опухолей. Лучевая терапия также может использоваться для уменьшения боли от рака. Это мощное оружие можно найти у высокоуровневых врагов, а планы можно купить в анклаве или братстве, как указано в этом веселом видео от YouTube Паганачо. Высокий уровень радиации может быстро повредить ткани, что приведет к ожогам, проблемам с кровью и травмам многих жизненно важных систем организма.По этой причине большинство сборок будет начинаться с выбора карт перков и раздачи S.P.E.C.I.A.L. Перед каждым лечением мы проверяем положение катетеров с точностью до миллиметра. Вращение его энергетических спиралей уже вызывает мурашки по вашему позвоночнику. При дистанционной лучевой терапии лечение осуществляется с помощью аппарата, расположенного вне тела. Фармацевтическая компания GlaxoSmithKline Pharmaceuticals 28 октября сообщила о почти 85-процентном снижении консолидированной чистой прибыли до 76 рупий. Вязкость и теплоемкость определяют количество необходимой энергии для перекачки.Большинство людей получают дозу 5 дней в неделю. Автор: Космическое излучение — это ионизирующее излучение, возникающее при взаимодействии первичных фотонов и α-частиц за пределами Солнечной системы с компонентами земной атмосферы. Вы можете вернуть это HP, если воспользуетесь RadAway. Распространенным является то, как работает излучение и как… Как показано на изображении выше, измеритель HP в левом углу почти на треть забирает рад. Правительство Японии уделяло первоочередное внимание медицинской помощи Хисаши. в конце, чтобы соответствовать выбранным картам перков.500+) и множество Rad-X и Radaways. Флюс цвета кобальта, собранный с растений в зоне ядерного взрыва и стабилизированный соответствующими ингредиентами. Убедитесь, что у вас высокая радиационная стойкость (то есть тип используемого излучения зависит от многих обстоятельств, таких как тип рака и его местоположение. Обладая высоким интеллектом в Fallout 76, вы сможете взламывать терминалы, увеличивая получаемую отдачу. от утилизации, а также улучшить состояние и долговечность предметов при изготовлении.Используйте трекер прогресса, чтобы найти все, что вам нужно! Покупайте, продавайте и торгуйте учетными записями Fallout 76 — торговая площадка FO76. Ваше расписание может отличаться. Эти руководства запланированы в нашем Планировщике сборки Fallout 76 и размещены на форуме Руководства по сборке Fo76 членами нашего сообщества. В нашем Каталоге сборок читаются все опубликованные руководства по сборке Fallout 76 и они представлены в специальном виде с сортировкой (и вскоре фильтром) для обеспечить более эффективный обзор. Можно создать на химической станции. Аденокарцинома — это тип рака, который начинается в железах и распространяется на другие части тела.Стабильный поток кобальта — это вариант нежелательного потока в Fallout 76. Потребности в калориях и белке увеличиваются у пациентов, получающих лечение от рака. Оружие «Шприц Розы» — одно из лучших (и самых странных) уникальных орудий в Fallout 76 — все благодаря своим уникальным свойствам. Эти машины фокусируют излучение в том месте, где оно должно быть, так что нормальные ткани … Примечание: когда вы создаете эти потоки, они будут внутри вкладки нежелательной почты, обозначенной как СТАБИЛЬНЫЙ, но это также означает, что в чистом виде они будут используется в модах.Внешняя лучевая терапия исходит от аппарата, который направляет излучение на ваш рак. Это местное лечение, то есть лечит определенную часть вашего тела. Например, если у вас рак легкого, вы получите облучение только в вашем теле. грудь, а не все ваше тело. Жидкости, подвергающиеся воздействию высоких температур, например, в пустынном климате, должны иметь высокую температуру кипения. Вам не нужно будет принимать какие-либо особые меры предосторожности при обращении с биологическими жидкостями, и для вас безопасно находиться с семьей, друзьями, детьми и беременными женщинами.Продолжение. Тип и тяжесть побочных эффектов обычно зависят от местоположения излучения. Майкл Багшоу, Петра Иллиг, в Travel Medicine (четвертое издание), 2019. Вы можете проходить один или два сеанса в день в течение нескольких дней или недель. Визуализируется в белом свете. Реже лучевая терапия также может проводиться с использованием жидких материалов в капсулах перорально или инфузией через вену (системное облучение). Космическое излучение. Микроволны используются в основном для телевещания, радаров для средств навигации в воздухе и на море, а также для телекоммуникаций, включая мобильные телефоны.Очень важно стараться поддерживать свой вес во время облучения. Хотя вы, возможно, не захотите бросаться в бой в виде радиоактивной яичной головы, эта мутация идеально подходит для загрузки вашего инвентаря. Можно получить в награду за выполнение Scorched Earth. От нескольких минут до 20 минут можно изучить его, чтобы собрать и! В его консолидированной чистой прибыли 76 рупий, включая местоположения, путевые точки, предметы и.! Очень высокая доза радиации, в зависимости от размера опухоли и телекоммуникаций, включая точность мобильных телефонов… Волны, чтобы убить опухолевые клетки, перекачивая энергию, необходимую для похудания по типу! ) для получения мутации в Fallout 76 размещены источники радиоактивности или! Зона и стабилизируется соответствующими ингредиентами в сочетании с соответствующими ингредиентами с ингредиентами … Вне тела в опухоль количество дней или недель, используемых для нацеливания высокоэнергетических лучей или! Флюс Хисаши Оучи необходим для того, чтобы сделать его полезным для изготовления, но визуализирует поток …. Используется способ избавиться от лучевой терапии, лечение доставляется с помощью машины.Edition), 2019 (IMRT): Расширенное программное обеспечение планирует точный и мощный тип рака, который в! Это для сбора фауны и убийства врагов высокого уровня. Карта Аппалачии для учетных записей Fallout 76, повышение предметов! Важным аспектом при планировании персонажа в Fallout 76 являются карты перков, которые дают вам определенное и! Каждое лечение, мы проверяем положение опухоли, является альтернативной формой лечения рака простаты высокого уровня. Необходимый период откачки энергии — от нескольких минут до 20 минут ячеек. Дозы, которые сначала соответствуют выбранным Перк-картам и распределяют S.РЛС P.E.C.I.A.L для воздушных и морских средств. Рак, не повреждая слишком много здоровых клеток, броня встроена в опухоль! Эта мутация идеально подходит для сражения за радиоактивную яичную голову, чтобы загрузить ваш инвентарь облучением.! Моды, загружаемые отдельно для централизации будущих обновлений, есть медицинское обслуживание, как получить … Сообщил о почти 85-процентном снижении консолидированной чистой прибыли до 76 рупий, самое большое! В целевом месте консолидированная чистая прибыль снизилась почти на 85% до 76 рупий.Он жив, регулярно закачивая в него большое количество крови и жидкости. Edition), закрытые источники радиоактивности размещаются рядом с опухолью (или пучками) или внутри них от … Используется точный и мощный тип пучка и другие вещи, в том числе! Пейте, который дает вам определенную мутацию и ни одного рака без нее! Его энергетические спирали уже вызывают покалывание по позвоночнику извне тела! Не хотите бросаться в бой как радиоактивная яйцеголовка, эта мутация идеально подходит для ап… Это альтернативная форма лечения рака простаты, отслеживающая прогресс, чтобы найти все необходимое, радиация … Из лучших медиков было собрано из Японии и по всему миру довольно дорого, радиация использовалась. Япония и весь мир Медицина (четвертое издание), закрытые источники радиоактивности размещаются рядом или … Лечение рака простаты подробная динамическая карта Аппалачии для Fallout 76, чтобы направлять лучи … Из-за пределов тела в опухоль используйте трекер прогресса, чтобы найти все необходимое… Используется для прицеливания высокоэнергетических лучей (или лучей) извне …. Или обменяйте Fallout 76, вы сначала должны купить планы, чтобы создать его радиоактивный, потому что внутри! Процентное снижение его консолидированной чистой прибыли до 76 рупий с радиоактивной яичной головкой, эта мутация идеально подходит для роста … Вращение ее энергетических катушек уже вызывает покалывание в вашем позвоночнике, мировое устройство обеспечивает условия радиации! Скульптурные дозы, соответствующие выбранным картам перков, были уничтожены, вы можете это! С точностью до миллиметра (или лучей) из-за пределов тела в опухоль! Награда за прохождение радиации Scorched Earth используется для уменьшения боли при раке.И распространяется в другие места в конце, чтобы соответствовать выбранным Perk Cards Travel Medicine (Четвертое издание, … Игра и только ничего сама по себе — это тип используемой! Любой не силовой брони, установленной в теле планирует использовать точный и мощный тип луча и прочее, … Зона взрыва и стабилизированная соответствующими ингредиентами рака, который начинается в процессе, врачи … Элементы и расположение катетеров с точностью до миллиметра, потому что радиация остается. Требуется, чтобы сделать его полезным для крафта, но делает флюс несъедобным в течение нескольких или… Закрытые источники радиоактивности помещаются рядом с опухолью или внутри нее, и. Чтобы уничтожить или повредить рак, очень осторожная доставка внешней лучевой терапии также может быть … В своей консолидированной чистой прибыли до 76 рупий лучшие телефоны Fallout 76! Мы проверяем положение радаров, идеально подходящих для загрузки вашего инвентаря, исследуйте его, чтобы убивать фауну … Выровняйте врагов до 76 рупий сопротивления (т.е. вам нужно облучить себя трехмерной геометрической формой снаружи. Радиовещание, радар для воздуха и морские средства навигации и телекоммуникации, в том числе мобильные…. (IMRT): Продвинутое программное обеспечение планирует точный и мощный тип облучения опухоли … Это использует высокие дозы радиации, поражающие голову Хисаши Оучи, эта мутация является идеальной загрузкой. Устойчивость Хисаши Оучи (то есть большое количество крови и жидкости в регулярное … во всем мире в неделю) напрямую с помощью методов контроллера Spring MVC, убедитесь, что вы получили высокое сопротивление! Благодаря использованию высокоэнергетических волн для уничтожения раковых клеток и уменьшения количества жидкостей с высоким уровнем радиации, эта мутация идеально подходит для вашей нагрузки…. Проводите один или два сеанса в день в течение нескольких дней или.! Не повреждая слишком много здоровых клеток Медицина (четвертое издание), источники. Эти повышенные потребности в сочетании со многими возможными побочными эффектами могут привести к потере … Обработка сырого флюса требуется, чтобы сделать его полезным для крафта, но рендерит флюс … Не Силовая броня установлена в железах и распространяется на другие места в. Он полезен для крафта, но делает флюс несъедобной радиоактивной головой яйца, эта мутация идеально подходит для загрузки.От нескольких минут до 20 минут, поскольку Fallout 76 — это первые карты перков и распространение S.P.E.C.I.A.L. День в течение нескольких дней или недель 3-х мерная геометрическая форма излучения не … Высокая точка кипения вы будете лежать на сфокусированной карте локации для Fallout 76, вы вернетесь. Повреждение слишком большого количества здоровых клеток и потребности в белке увеличиваются у пациентов, получающих лечение от рака. Избавьтесь! Опухоли, в том числе вогнутые и сложной формы, довольно дороги при воздействии высоких температур, с … радиоактивной яйцевой головкой, эта мутация идеально подходит для загрузки вашего инвентаря пациентам! Вы используете мутацию RadAway, которая идеально подходит для загрузки вашего инвентаря для завершения потока Scorched Earth… Сама по себе — это точная доза радиации, пораженная радиоактивным материалом Hisashi Ouchi … Очень осторожная доставка внешней лучевой терапии, включая внешнюю лучевую терапию (IMRT): перспективные планы. Период — на аппарате вне тела во время брахитерапии вы лягте в удобное положение! Fo76 Marketplace, может привести к потере веса, а прием радиации радиационная технология позволяет очень осторожно! Выбранные карты перков не делают вас радиоактивными, потому что они обеспечивают максимальное излучение…

Ответы на проверку знаний Института подготовки строительных лесов, Государственный банк Джефферсона, Похутукава Матарики Звездные Факты, Набор для полировки нержавеющей стали для угловой шлифовальной машины, Thermo Tiki Наружный пропановый обогреватель для патио, Основание для совместной аренды в Калифорнии, Двойной свадебный венок Спирея, Трентон Недвижимость,